(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210669324.9 (22)申请日 2022.06.14 (71)申请人 苏州健雄职业技术学院 地址 215411 江苏省苏州市太 仓市科教新 城健雄路1号 (72)发明人 王杨　常柏松　聂锦山　黄秋燕　 方渊　 (74)专利代理 机构 苏州市方略专利代理事务所 (普通合伙) 32267 专利代理师 刘燕娇 (51)Int.Cl. A61K 9/16(2006.01) A61K 47/34(2017.01) A61K 38/44(2006.01) A61K 47/54(2017.01)A61P 35/00(2006.01) A61K 33/26(2006.01) (54)发明名称 一种用于级联反应增强抗肿瘤治疗的可降 解氧化铁纳米微球 (57)摘要 本发明属于高分子肿瘤 靶向药物领域， 具体 公开了一种用于级联反应增强抗肿瘤治疗的可 降解氧化铁纳米微球， 所述微球的外层为聚乳 酸‑羟基乙酸共聚物PLGA； 所述微球的内部包含 有油酸修饰的疏水性Fe3O4纳米粒子Fe3O4‑OA  NPs和葡萄糖氧化酶Gox； 进一步的， 公开了上述 微球的制备： 1） 油酸修饰的Fe3O4纳米粒子Fe3O4‑ OA NPs的合成： 通过共沉淀法合成油酸修饰的疏 水性Fe3O4纳米粒子Fe3O4‑OA NPs； 2） Fe3O4/GOx‑ PLGA纳米粒子的合成： 采用乳化溶剂蒸发技术， 将Fe3O4‑OA NPs和葡萄糖氧化酶GOx包裹在聚乳 酸‑羟基乙酸共聚物PLGA微球中， 得到Fe3O4/ GOx‑PLGA NPs。 本发明所述微球综合了化学动力 学治疗CDT、 饥饿疗法和缺氧疗法的优势， 显著提 高了肿瘤 治疗的疗效、 降低了对正常组织或器官 的副作用。 权利要求书2页 说明书8页 附图5页 CN 115025050 A 2022.09.09 CN 115025050 A 1.一种用于级联反应增强抗肿瘤治疗的可降解氧化铁纳米微球， 其特征在于， 所述微 球的外层为聚乳酸 ‑羟基乙酸共聚物PLGA； 所述微球的内部包含有油酸修饰的疏水性Fe3O4纳米粒子Fe3O4‑OA NPs和葡萄糖 氧化酶 Gox。 2.根据权利要求1所述的一种用于级联反应增强抗肿瘤治疗的可降解氧化铁纳米微 球， 其特征在于， 所述F e3O4‑OA NPs和Gox的质量比为 （1 ‑2） : （1‑2） 。 3.如权利要求1所述的一种用于级联反应增强抗肿瘤治疗的可降解氧化铁纳米微球的 制备方法， 其特 征在于， 包括以下步骤： 1） 油酸修饰的Fe3O4纳米粒子Fe3O4‑OA NPs的合成： 通过共沉淀法合成油酸修饰的疏水 性Fe3O4纳米粒子F e3O4‑OA NPs ； 2） Fe3O4/GOx‑PLGA纳米粒子的合成： 采用乳化溶剂蒸发技术， 将Fe3O4‑OA NPs 和葡萄糖 氧化酶GOx 包裹在聚乳酸 ‑羟基乙酸共聚物PLGA微球中,得到F e3O4/GOx‑PLGA NPs。 4.根据权利要求3所述的种用于级联反应增强抗肿瘤治疗的可降解氧化铁纳米微球的 制备方法， 其特征在于， 所述步骤1） 油酸修饰的Fe3O4纳米粒子Fe3O4‑OA NPs的合成， 包括以 下步骤： S1采用化学共沉淀法制备Fe3O4‑OA NPs， 在机械搅拌和N2氛围下， 将  30 mL 3%~6%  FeCl2 水溶液缓慢滴入20  mL 3%~6% FeCl3水溶液中； S2开始加热， 当升温至60~80 ℃时， 30 min内逐滴加入40  ~60 mL浓氨水， 随后快速将3 ~5 mL油酸注入到溶液中， 在恒温无氧条件下保持60~80 ℃ 反应3 h， 之后将反应体系升温 至70~90℃， 反应3 0~40 min， 使NH3挥发完毕； S3反应结束后用大量超纯水冲洗， 使反应体系快速冷却至室温， 将pH调至6~8， 用丙酮 和超纯水冲洗3‑4次后磁分离除去残留离 子得到疏 水性Fe3O4‑OA NPs； S4将疏水性  Fe3O4‑OA NPs 分散在适当体积的正辛烷中， 在60~80 ℃下通过机械搅拌 除去丙酮， 得到固含量 为4~6 mg/mL 的 Fe3O4‑OA NPs 磁性流体。 5.根据权利要求3所述的用于级联反应增强抗肿瘤治疗的可降解氧化铁纳米微球的制 备方法， 其特 征在于， 所述 步骤2） Fe3O4/GOx‑PLGA纳米粒子的合成， 包括以下步骤： S5将1~2 mL Fe3O4‑OA磁流体用甲醇沉淀后分散在 1~2 mL氯仿中备用， 随后将  1~2 mL  1~3% PLGA 氯仿溶液与上述  Fe3O4‑OA分散液在超声下均匀混合， 再将混合物加入20~30 mL  9~12% Pluronic  F127水溶液中， 然后在冰浴中超声乳化5 ‑10 min， 形成Fe3O4‑‑PLGA NPs深 棕色奶茶状乳液； S6 接下来， 将  2~3 mL 预先制备的  2~4 mg/mL GOx 溶液加入到连续乳化的  Fe3O4‑ PLGA NPs 溶液中， 在 室温下300~500 rpm机械搅拌30~40 min后， 继续搅拌3~5 h挥发去除 氯仿得到棕黄色胶体 状溶液； S7将粗产物先用 800~1200 rpm离心分离1  min、 去除大颗粒团聚体， 再用 8000~10000  rpm离心10~15 min处理胶体溶液， 连续操作3~4次， 最后将产物分散在20  mL超纯水中并于4 ℃下储存， 得到所述F e3O4/GOx‑PLGA纳米粒子 。 6.检测如权利要求1所述的可降解氧化铁纳米微球催化效能的方法， 其特征在于， 包括 以下步骤： 用对苯二甲酸TA对Fe3O4/GOx‑PLGA NPs催化级联反应所产生的 •OH进行验证， 向PE管中权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115025050 A 2依次加入4~6 mL缓冲溶液(pH  4.0)； 0.3~0.5 mL的Fe3O4/GOx‑PLGA NPs储备液， 浓度3~5  mg/mL； 1 mL TA溶液， 浓度3~5 mM， 1 mL不同浓度的0~5 mM的β‑D‑葡萄糖储备液， 最后用超 纯水使总体积为9~10 mL， 室温下避光反应1  ~2 h后加入1~2 mL NaOH， 浓度0.5~1 M； 终止 反应， 在磁 体辅助下移除F e3O4/GOx‑PLGA NPs， 取3 mL清液进行荧 光光谱检测。 7.如权利要求1或2所述的可降解氧化铁纳米微球， 或者权利要求3 ‑6任一项所述的方 法在制备抗肿瘤药物中的应用。 8.抗肿瘤药物或者组合物， 其特征在于， 含有如权利要求1或2所述的可降解氧化铁纳 米微球。 9.根据权利要求8所述的抗肿瘤药物或者组合物， 其特征在于， 所述肿瘤为宫颈癌肿 瘤。 10.根据权利要求9所述的抗肿瘤药物或者组合物， 其特征在于， 所述可降解氧化铁纳 米微球的浓度为1 ‑20 mg/L。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115025050 A 3