ICS 13.060.50 CCS Z 16 37 山 东 省 地 方 标 准 DB 37/T 4477—2021 水中双酰胺类杀虫剂残留量的测定 液相色谱-串联质谱法 Determination of diamide insecticides residues in water —Liquid chromatography-tandem mass spectrometry method 2021 - 12 - 29 发布 2022 - 01 - 29 实施 山东省市场监督管理局 发 布 DB 37/T 4477—2021 目 次 前言 ................................................................................. II 1 范围 ............................................................................... 1 2 规范性引用文件 ..................................................................... 1 3 术语和定义 ......................................................................... 1 4 原理 ............................................................................... 1 5 试剂或材料 ......................................................................... 1 6 仪器设备 ........................................................................... 2 7 样品 ............................................................................... 2 8 试验步骤 ........................................................................... 2 9 实验数据处理 ....................................................................... 4 10 精密度 ............................................................................ 4 11 定量限 ............................................................................ 4 附录 A（资料性） 5 种双酰胺类杀虫剂中英文名称、CAS 号及分子式信息 ...................... 5 附录 B（资料性） 质谱仪参数 ........................................................... 6 附录 C（资料性） 5 种双酰胺类杀虫剂监测离子对、碰撞电压和保留时间 ..................... 7 附录 D（资料性） 5 种双酰胺类杀虫剂多反应监测（MRM）色谱及质谱图 ...................... 8 附录 E（资料性） 实验室重复性限（r）数据表 ........................................... 10 附录 F（资料性） 实验室再现性限（R）数据表 ........................................... 11 I DB 37/T 4477—2021 前 言 本文件按照GB/T 1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由山东省农业农村厅提出并组织实施。 本文件由山东省农业标准化技术委员会种植业标准化分技术委员会归口。 II DB 37/T 4477—2021 水中双酰胺类杀虫剂残留量的测定 液相色谱-串联质谱法 1 范围 本文件规定了水中5种双酰胺类杀虫剂残留量的液相色谱-串联质谱检测方法。 本文件适用于地表水和地下水中氯虫苯甲酰胺、溴氰虫酰胺、环溴虫酰胺、氟苯虫酰胺、四氯虫酰 胺残留量的测定。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。 4 原理 水样中残留的双酰胺类杀虫剂经聚合物亲水固相萃取小柱富集，然后用有机溶剂洗脱，浓缩定容， 用液相色谱-串联质谱仪检测，外标法定量。 5 试剂或材料 除另有规定外，所用试剂均为色谱纯，水为符合GB/T 6682中规定的一级水。 5.1 试剂 5.1.1 甲醇（CH3OH，65-56-1）。 5.1.2 甲酸（HCOOH，64-18-6）。 5.2 溶液配制 5.2.1 甲醇-水溶液（5+95）：量取 10 mL 甲醇，加入 190 mL 水中，混匀。 5.2.2 0.1 %甲酸（5.1.2）水溶液：移取 1.0 mL 甲酸于 1 000 mL 容量瓶中，用水定容至刻度，现配现 用。 5.3 标准品 5种双酰胺类杀虫剂标准品：纯度≥95 %，化合物中英文名称及CAS号等信息见附录A。 5.4 标准溶液配制 1 DB 37/T 4477—2021 5.4.1 标准储备溶液：分别称取约 0.01 g（精确至 0.1 mg）5 种双酰胺类杀虫剂标准品于 10 mL 容量瓶 中，用甲醇溶解并定容至刻度，配制成浓度约为 1 000 mg/L 的标准储备溶液，0 ℃～4 ℃保存，保存期 为 6 个月。 5.4.2 中间标准溶液：准确吸取适量标准储备溶液（5.4.1），用甲醇稀释配制成约 10 mg/L 的中间标 准溶液，0 ℃～4 ℃保存，保存期为 1 个月。 5.4.3 混合标准工作溶液：准确吸取适量的中间标准溶液（5.4.2），用甲醇稀释配制成所需浓度的混 合标准工作溶液，现配现用。 5.5 材料 5.5.1 5.5.2 5.5.3 5.5.4 有机滤膜：0.22 μm。 聚合物亲水固相萃取小柱（Hypersep Retain PEP1) )，500 mg，6 mL）。 定性滤纸。 聚四氟乙烯样桶：500 mL。 6 仪器设备 6.1 6.2 6.3 6.4 6.5 6.6 6.7 液相色谱-串联质谱仪：配有电喷雾离子源（ESI）。 分析天平：感量为 0.1 mg。 氮吹仪。 固相萃取装置。 真空泵。 量筒：50 mL。 刻度离心管：10 mL。 7 样品 取水样品约1 L，将样品通过定性滤纸过滤，分三份倒入洁净的聚四氟乙烯样桶中，每份约250 mL， 密封并做好标识，于-18 ℃以下冷冻保存。在试样制备过程中，应防止样品污染或发生残留物含量的变 化。 8 试验步骤 8.1 提取和净化 8.1.1 依次用甲醇和水各 3 mL 对固相萃取小柱（5.5.2）进行预淋，使每种溶剂在小柱中停留 3 min～ 4 min。 8.1.2 准确量取 50.0 mL 水样上柱，调节固相萃取装置（6.4）压力控制阀，使水样以 1 mL/min～2 mL/min 的流速通过小柱，待水样全部通过小柱后，继续抽真空约 1 min，然后用 3 mL 甲醇水溶液（5.2.1）洗 涤小柱，再抽真空约 1 min，弃去上述溶液，最后用 10 mL 甲醇淋洗小柱，将淋洗液收集于刻度离心管 （6.7）中。 8.2 定容 1) Hypersep Retain PEP 柱是 Thermo Fisher 产品的商品名称，给出这一信息是为了方便本文件的使用者，并不是表示对该产品的认可。 如果其他等效产品具有相同的效果，则可使用这些等效产品。 2 DB 37/T 4477—2021 在50 ℃水浴加热下，将淋洗液以氮气吹干，用甲醇定容至1.0 mL，经0.22 μm滤膜（5.5.1）过滤 后供液相色谱-串联质谱仪测定。 8.3 测定 8.3.1 液相色谱-串联质谱仪参考条件 参考条件如下： a) 色谱柱：C18 液相色谱柱 2.0 mm（i.d）×75 mm，1.6 μm，或相当者； b) 流动相及梯度洗脱条件见表 1； 表1 流动相及梯度洗脱条件 c) d) e) f) 时间 流速 流动相 A（甲醇） 流动相 B（0.1%甲酸） min mL/min % % 0.50 0.35 15 85 5.00 0.35 95 5 7.00 0.35 95 5 7.50 0.35 15 85 柱温：40 ℃； 进样量：1.0 μL； 质谱仪参数：见附录 B； 监测离子对、碰撞电压：见附录 C。 8.3.2 定性测定 在相同实验条件下进行样品测定时，如果检出的色谱峰的保留时间与标准样品相对误差在±2.5 % 之内，并且在扣除背景后的样品质谱图中，目标化合物的质谱定量和定性离子均出现，而且同一检测批 次，对同一化合物，样品中目标化合物的定性离子和定量离子的相对丰度比与质量浓度相当的基质标准 溶液相比，偏差不超过表2规定的范围，则可判断样品中存在目标农药。 表2 定性测定时相对离子丰度的最大允许偏差 相对离子丰度 ＞50 % ＞20 %至50 % ＞10 %至20 % ≤10 % 允许的相对偏差 ±20 % ±25 % ±30 % ±50 % 8.3.3 定量测定 本文件采用外标法定量测定，以待测物峰面积为纵坐标、混合标准工作溶液浓度为横坐标，绘制标 准工作曲线对样品进行定量。样品溶液中待测物的响应值均应在标准工作曲线的线性范围以内；如果超 出线性范围，应用甲醇（5.1.1）进行适当稀释后测定。5种农药标准物质的参考保留时间见附录C，多 反应监测（MRM）色谱及质谱图见附录D。 8.4 平行试验 按上述步骤对同一试样进行平行试验。 8.5 空白试验 3 DB 37/T 4477—2021 用符合G