(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211495838.3 (22)申请日 2022.11.28 (71)申请人 东北农业大 学 地址 150030 黑龙江省哈尔滨市香坊区长 江路600号 (72)发明人 姜毓君　满朝新　张宇　汪禹宏　 苏悦　 (74)专利代理 机构 北京东方盛凡知识产权代理 有限公司 1 1562 专利代理师 菅士腾 (51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01) C12R 1/225(2006.01) (54)发明名称 一种鼠李糖 乳杆菌JL1高密度发酵的方法 (57)摘要 本发明公开了一种鼠李 糖乳杆菌JL1高密度 发酵的方法， 属于微生物发酵技术领域。 该高密 度发酵培养基， 其由下述组分及配比组成： D ‑半 乳糖44‑52 g/L， L‑半胱氨酸32 ‑37 g/L， 磷酸氢 二钾3‑5 g/L， 柠檬酸氢二铵2 ‑5 g/L， 乙酸钠8 ‑ 10 g/L， 硫酸镁0.10 ‑0.30 g/L， 硫酸锰0.02 ‑ 0.05 g/L和吐温 ‑80 1.00‑2.00 g/L， 余量为水。 本发明以工业化生产为出发点， 对 具有潜在益生 特性菌株鼠李 糖乳杆菌JL1高密度培养基配方和 培养工艺进行优化， 优化后发酵液活菌数显著提 高， 实现了菌株的高密度培养， 为后续的鼠李糖 乳酸菌产品工业 化生产提供理论支持。 权利要求书1页 说明书9页 附图4页 CN 115537364 A 2022.12.30 CN 115537364 A 1.一种鼠李糖乳杆菌JL1的高密度发酵培 养基， 其特 征在于， 由下述组分及配比组成： D‑半乳糖44 ‑52 g/L， L‑半胱氨酸32 ‑37 g/L， 磷酸氢二钾3 ‑5 g/L， 柠檬酸氢二铵2 ‑5  g/L， 乙酸钠8 ‑10 g/L， 硫酸镁0.10 ‑0.30 g/L， 硫酸锰0.02 ‑0.05 g/L和吐温 ‑80 1.00‑2.00  g/L， 余量为水。 2.根据权利要求1所述的高密度发酵培 养基， 其特 征在于， 由下述组分及配比组成： D‑半乳糖44.28  g/L， L‑半胱氨酸33.29  g/L， 磷酸氢二钾3.52  g/L， 柠檬酸氢二铵3.52   g/L， 乙酸钠8.98  g/L， 硫酸镁0.20  g/L， 硫酸锰0.04  g/L和吐温 ‑80 1.00 g/L， 余量为水。 3.一种鼠李糖乳杆菌JL1高密度发酵的方法， 其特征在于， 包括将活化的鼠李糖乳杆菌 JL1接种到 权利要求1或2所述的高密度发酵培 养基中， 在 pH为5.8‑6.0下发酵的步骤。 4.根据权利要求3所述的方法， 其特征在于， 所述发酵的条件为： pH为5.9， 温度为37℃， 发酵时间为20 h。 5.根据权利要求3所述的方法， 其特征在于， 所述活化的鼠李糖乳杆菌JL1的接种量为4   %v/v。 6.根据权利要求5所述的方法， 其特征在于， 所述活化的鼠李糖乳杆菌JL1是将所述鼠 李糖乳杆菌JL1菌种接种至 MRS液体培 养基中进行活化后获得的。 7.根据权利要求6所述的方法， 其特征在于， 所述活化具体为将所述鼠李糖乳杆菌JL1 菌种以5%  v/v接种量接种至所述MRS液体培养基， 在37℃和pH为6.5 ‑6.8条件下活化培养 24h。 8.一种根据权利要求3 ‑7任一项所述的方法获得的鼠李糖乳杆菌JL1高密度发酵 液。 9.一种根据权利要求8所述的鼠李糖乳杆菌JL1高密度发酵液在制备鼠李糖乳杆菌产 品中的应用。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115537364 A 2一种鼠李糖乳杆菌JL1高密 度发酵的方 法 技术领域 [0001]本发明涉及微生物发酵技术领域， 特别是涉及一种鼠李糖乳杆菌JL1高密度发酵 的方法。 背景技术 [0002]乳酸菌 （Lactic  acid bacteria， LAB） 是一种以乳酸为主要发酵产物的革兰氏阳 性菌的统称， 主要包括乳杆菌属 （ Lactobacillus ） 、 乳球菌属 （ Lactococcus ） 、 双歧杆菌属 （Bifidobacterium ） 、 肠球菌属 （ Enterococcus ） 、 链球菌属 （ Streptococcus ） 和明串珠菌属 （Leuconostoc ） 。 它们通常都是兼性厌氧生物， 通过发酵糖类来获取能量， 因此需要持续不 断的补充嘌呤、 嘧啶、 维生素和氨基酸等物质以维持生命活力。 大量研究表明， 乳酸菌具有 多种益生功能， 主要体现在以下几方面： 抗氧化作用、 免疫调节作用、 降胆固醇作用、 预防肿 瘤作用、 调节血糖作用等。 [0003]鼠李糖乳杆菌( L.rhamnosus )， 从属于乳杆菌属， 是人体正常菌群之一， 肠道黏着 率高， 定植能力强， 并具有高效降胆固醇， 促进细胞分裂， 可起到调节肠道菌群、 预防和治疗 腹泻、 排除毒素、 预防龋齿、 提高机体免疫力及抗癌等重要的生理保健功能。 并已经正式应 用于食品和临床药品的生产。 [0004]目前， 消费者对于益生菌产品的需求日益增加， 如鼠李糖乳杆菌发酵的酸奶等产 品成为消费者追求的热潮， 菌剂的活菌数对发酵效果显得尤为重要。 然而， 当前市售的鼠李 糖乳杆菌发酵剂的活菌数数量级约为109 CFU/mL， 且工业生产用量大， 传统培养基发酵菌 液发酵的活菌数较低， 无法满足工业生产对于降低生产成本、 提高生产效率， 缩短生产周期 的工艺要求。 因此， 提出一种鼠李糖乳杆菌高密度发酵的方法是十分有必要的。 发明内容 [0005]本发明的目的是提供一种鼠李糖乳杆菌JL1高密度发酵的方法， 以解决上述现有 技术存在的问题， 该方法得到的发酵液活菌数达5.64 ×1011 CFU/mL以上， 实现了菌株的高 密度培养， 为后续的鼠李糖乳酸菌产品工业 化生产提供理论支持。 [0006]为实现上述目的， 本发明提供了如下 方案： 本发明提供一种鼠李糖乳杆菌JL1的高密度发酵培 养基， 由下述组分及配比组成： D‑半乳糖44 ‑52 g/L， L‑半胱氨酸32 ‑37 g/L， 磷酸氢二钾3 ‑5 g/L， 柠檬酸氢二铵 2‑5 g/L， 乙酸钠8 ‑10 g/L， 硫酸镁0.10 ‑0.30 g/L， 硫酸锰0.02 ‑0.05 g/L和吐温 ‑80 1.00‑ 2.00 g/L， 余量为水。 [0007]进一步地， 由下述组分及配比组成： D‑半乳糖44.28  g/L， L‑半胱氨酸33.29  g/L， 磷酸氢二钾3.52  g/L， 柠檬酸氢二铵 3.52 g/L， 乙酸钠8.98  g/L， 硫酸镁0.20  g/L， 硫酸锰0.04  g/L和吐温 ‑80 1.00 g/L， 余量 为水。 [0008]本发明还提供一种鼠李糖乳杆菌JL1高密度发酵的方法， 包括将活化的鼠李糖乳说　明　书 1/9 页 3 CN 115537364 A 3