(19)中华 人民共和国 国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210074359.8 (22)申请日 2022.01.21 (71)申请人 四川农业大 学 地址 611130 四川省成 都市温江区惠民路 211号 (72)发明人 康厚扬　龚壁燃　张浩　周永红　 徐黎黎　王益　曾建　凡星　 沙莉娜　吴丹丹　程怡燃　 (74)专利代理 机构 北京众合诚成知识产权代理 有限公司 1 1246 代理人 刘妮 (51)Int.Cl. C12Q 1/6895(2018.01) C12N 15/11(2006.01) (54)发明名称 一种检测偃麦草7StL染色体的特异分子标 记及其应用 (57)摘要 本发明公开了一种检测偃麦草7StL染色体 的特异分子标记及其应用， 该分子标记的核苷酸 序列如SEQ  ID NO.3所示， 检测偃麦草7StL染色 体的特异分子标记的引物对的核苷酸序列如SEQ   ID NO.1和SEQ  ID NO.2所示。 本发明的特异分子 标记不仅可用偃麦草7StL染色体或其片段的快 速检测， 而且 可以准确地鉴别偃麦草与其他近缘 属物种染色体， 为分子标记辅助选择育种、 小麦 族系统进化和种质资源鉴定等方面提供了重要 的应用基础。 权利要求书1页 说明书4页 序列表1页 附图1页 CN 114277181 A 2022.04.05 CN 114277181 A 1.一种检测偃麦草7StL染色体的特异分子标记， 其特征在于， 该分子标记 的核苷酸序 列如SEQ ID NO.3所示。 2.一种检测偃麦草7StL染色体的特异分子标记 的引物对， 其特征在于， 该分子标记 的 引物对的核苷酸序列如SEQ  ID NO.1和SEQ  ID NO.2所示。 3.一种检测偃麦草7StL染色体的PCR试剂， 其特征在于， 该PCR试剂中的引物采用如权 利要求2所述的引物对。 4.如权利要求2所述的检测偃麦草7StL染色体的特异分子标记 的引物对的应用， 其特 征在于， 该应用为以下任意 一种： (1)检测或辅助检测偃麦草7StL染色体或其片段； (2)用于制备检测或辅助检测含有偃麦草7StL染色体或其片段的产品； (3)追踪或辅助追踪偃麦草7StL染色体或其片段； (4)追踪或辅助追踪含有偃麦草7StL染色体或其片段的产品； (5)小麦分子 育种； (6)用于制备小麦分子 育种的产品。 5.一种检测偃麦草7StL染色体的方法， 其特 征在于， 该 方法包含： 采用如权利要求2所述的检测偃麦草7StL染色体的特异分子标记的引物对， 以待检测 小麦的DNA为模板进行PCR扩增， 若扩增出 条带， 则待测小麦中含有偃麦草7StL染色体。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114277181 A 2一种检测偃麦草7StL 染色体的特异分子标记及其应用 技术领域 [0001]本发明属于作物遗传育种技术领域， 具体涉及一种检测偃麦草7StL染色体的特异 分子标记及其应用。 背景技术 [0002]偃麦草(Elymus  repens(L.)Could， 2n＝6x＝42， StStStStHH)， 多年生草本植物， 属禾本科披碱草属， 具有耐寒、 耐旱、 多分蘖， 盐碱、 抗赤霉病、 条锈病和白粉病等特点， 是小 麦遗传改良的重要基因资源。 [0003]广泛利用偃麦草和普通小麦杂交始于20世纪80年代， Fedak等获得了含42条染色 体的小麦 ‑偃麦草杂交后代。 Wang等利用E.tsukushiense与普通小麦杂交， 获得3个附加系 和1个体代换系， 通过赤霉病抗性鉴定发现， 其中1Ets#1附加系高抗赤霉病。 Cainong等成功 将E.tsukushiense赤霉病抗性基因定位到1Ets#1染色体短臂上， 并命名为 Fhb6。 Gong等利用 国审品种川农16和小麦 ‑偃麦草部分双二倍体P1142 ‑1‑2杂交、 回交， 在后代筛选得到了两 个小麦‑偃麦草易位系材料K15 ‑1192‑2和K15‑1194‑2， 且两个易位系均高抗条锈病和赤霉 病。 [0004]通过远缘杂交及染色体工程技术， 转移小麦野生近缘种优良基因， 是实现小麦遗 传改良的一条重要而有效的途径。 例如对全世界小麦育种具有重大贡献的小麦 ‑黑麦1RS· 1BL易位系， 由于1RS染色体上携带有Pm8、 Yr9和Lr26等抗性基因， 受到育种家们的广泛应 用， 成功培育出无芒一号、 高加索和山前麦等抗病高产的优质小麦品种。 在这些远缘杂交后 代中， 检测携带 的外源染色体(或其片段)成为及其重要的问题。 虽然目前可以利用一些细 胞学技术进行检测， 如基因组原位杂交和荧光原位杂交等， 但这些技术不适合高通量和大 规模鉴定 。 [0005]开发偃麦草染色体特异分子标记， 可以高效、 准确的鉴定在小麦背景中的偃麦草 染色体(或其片段)， 尤其是可用于检测原 位杂交等技术难以分辨的渗入系。 刘成等(小麦族 中含St染色体组物种的特异分子标记的建立， 《遗传》 ， 2007年 10月)筛选出St染色体的特异 分子标记OPH11542、 OPH11742和OPH11743； Hu等(New  St‑chromosome‑specific  molecular   markers for identifying  wheat–Thinopyrum  intermedium  derivative  lines[J] .Journal of Genetics,2014)利用普通小麦序列开发了39对St染色体特异的PLUG标记和3 对SCAR标记； 戴刚等(茸毛偃麦草1St染色体上重复序列分析与特异分子标记 开发[D].电子 科技大学,2015)开发得到了37对1St染色体特异标记； Kong等(Development  and  characterization  of a complete  set of Triticum  aestivum –Roegneria  ciliaris   disomic addition  lines[J].Theoretical  and Applied Genetics,2018,131(8):1793 ‑ 1806)利用位于普通小麦7个同源群共1845对EST ‑SSR引物在一整套小麦 ‑纤毛鹅观草二体 附加系中进行了验证， 筛 选得到了1St‑7St染色体特异标记。 [0006]综上， 近年来针对偃麦草St染色体 的分子标记开发相对较少， 这严重阻碍了偃麦 草基因资源的开发和应用。说　明　书 1/4 页 3 CN 114277181 A 3