(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210134832.7 (22)申请日 2022.02.14 (71)申请人 天津市泌尿 外科研究所 地址 300211 天津市河西区平江道 23号 (72)发明人 尚芝群　牛远杰　李阳　陈昱彤　 (74)专利代理 机构 北京预立 生科知识产权代理 有限公司 1 1736 专利代理师 高倩倩 (51)Int.Cl. C12N 15/113(2010.01) C12N 9/10(2006.01) C12Q 1/6886(2018.01) C12N 15/11(2006.01) G01N 33/574(2006.01) G01N 33/68(2006.01)A61K 45/06(2006.01) A61K 31/7088(2006.01) A61K 31/4166(2006.01) A61P 35/00(2006.01) (54)发明名称 METTL3的反义寡核苷酸及其在前列腺癌中 的应用 (57)摘要 本发明公开了METTL3的反义寡核苷酸及其 在前列腺癌中的应用。 本发明公开了抑制METT L3 的表达水平可以降低去势抵抗前列腺癌细胞的 增殖， 恢复耐药前列腺癌细胞株的药物敏感性， 为治疗去势抵抗前列腺癌以及耐药前列腺癌提 供了新的手段。 权利要求书2页 说明书11页 序列表7页 附图3页 CN 114438085 A 2022.05.06 CN 114438085 A 1.经修饰的反义寡核苷酸， 其特征在于， 所述经修饰的反义寡核苷酸由15 ‑30个核苷酸 组成， 所述反义寡核苷酸抑制M ETTL3的表达； 优选的， 所述反义寡核苷酸由18 ‑22个核苷酸组成； 优选的， 所述反义寡核苷酸由20个核苷酸组成； 优选的， 所述反义寡核苷酸选自SEQ  ID NO.1‑11任一项所述的序列； 优选的， 所述反义寡核苷酸的序列如SEQ  ID NO.2所示； 优选的， 所述 修饰包括至少一个核苷间键修饰； 优选的， 所述核苷间键修饰是硫代磷酸酯修饰； 优选的， 所述 修饰包括全链的核苷间键修饰； 优选的， 所述 修饰包括至少一个 糖修饰； 优选的， 所述糖修饰为2 ′ ‑O‑甲氧乙基修饰； 优选的， 所述 修饰包括至少6个 糖修饰； 优选的， 所述 修饰包括10个 糖修饰； 优选的， 所述糖修饰位于反义寡核苷酸序列两侧。 2.根据权利要求1所述的反义寡核苷酸， 其特征在于， 所述反义寡核苷酸包括至少一个 的核苷间键修饰和至少一个的糖修饰； 优选的， 所述反义寡核苷酸包括全链的核苷间键修饰和至少一个的糖修饰； 优选的， 所述反义寡核苷酸包括全链的核苷间键修饰和至少6个的糖修饰； 优选的， 所述反义寡核苷酸包括全链的核苷间键修饰和10个 糖修饰； 优选的， 所述经修饰的反义寡核苷酸的序列如SEQ  ID NO.25所示。 3.一种组合物， 其特征在于， 所述组合物包括权利要求1或2所述的反义寡核苷酸或其 盐； 优选的， 所述组合物还 包括药学上可接受的载体。 4.一种组合物， 其特 征在于， 所述组合物包括M ETTL3的抑制剂和治疗前列腺癌的药物； 优选的， 所述药物选自 阿比特龙、 多西他 赛、 恩杂鲁胺； 优选的， 所述药物为恩杂鲁胺； 优选的， 所述抑制剂降低M ETTL3 mRNA或蛋白的水平； 优选的， 所述抑制剂选自核酸抑制物， 蛋白抑制剂， 蛋白水解酶， 蛋白结合分子； 优选的， 所述核酸抑制物选自： shRNA、 siRNA、 dsRNA、 微小RNA、 反义寡核苷酸， 或能表达 或形成所述shRNA、 siRNA、 dsRNA、 微小RNA、 反义寡核苷酸的构建物； 优选的， 所述核酸抑制物选自shRNA、 反义寡核苷酸或其核酸构建物； 优选的， 所述反义寡核苷酸如权利要求1或2所述； 优选的， 所述组合物还 包括药学上可接受的载体。 5.一种诊断耐药 前列腺癌的产品， 其特 征在于， 所述产品包括检测M ETTL3的试剂； 优选的， 所述试剂包括特异性识别M ETTL3的探针； 或 特异性扩增M ETTL3的引物； 或 特异性结合M ETTL3的抗体或配 体； 优选的， 所述产品包括芯片、 试剂盒。 6.一种筛选治疗耐药前列腺癌的候选药物的方法， 其特征在于， 用待筛选物质处理表权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 114438085 A 2达或含有METTL3基因或其编码的蛋白的培养体系； 和检测所述体系中METTL3基因或其编码 的蛋白的表达或活性； 其中， 当所述待筛选物质促进METTL3基因的或其编码的蛋白的表达 水平或活性时， 该待筛 选物质是治疗耐药 前列腺癌的候选药物。 7.如下任一项所述的应用： (1)权利要求1或2所述的反义寡核苷酸、 权利要求3或4所述的组合物在制备治疗去势 抵抗前列腺癌的药物组合物中的应用； (2)权利要求1或2所述的反义寡核苷酸、 权利要求3或4所述的组合物在制备治疗耐药 前列腺癌的药物组合物中的应用； (3)检测M ETTL3的试剂在制备诊断耐药 前列腺癌的产品中的应用； (4)METTL3在筛选治疗耐药 前列腺癌的候选药物中的应用。 8.根据权利要求7所述的应用， 其特征在于， 所述耐药前列腺癌选自耐阿比特龙、 多西 他赛、 恩杂鲁胺的前列腺癌； 优选的， 所述耐药 前列腺癌为耐恩杂鲁胺的前列腺癌。 9.根据权利要求7所述的应用， 其特征在于， 所述产品包括通过RT ‑PCR法、 RT ‑qPCR法、 生物芯片检测法、 DNA印迹法、 原位杂交法、 免疫印迹法检测METTL3基因或蛋白表达水平的 试剂。 10.根据权利要求7所述的应用， 其特征在于， 筛选治疗耐药前列腺癌的候选药物的步 骤如下： 用待筛选物质处理表达或含有METTL3基因或其编码的蛋白的培养体系； 和检测所述体 系中METTL3基因或其编码的蛋白的表达或活性； 其中， 当所述待筛选物质促进METTL3基因 的或其编码的蛋白的表达水平或活性时， 该待筛 选物质是治疗耐药 前列腺癌的候选药物。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 114438085 A 3