(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211258437.6 (22)申请日 2022.10.14 (71)申请人 北京大学第三医院 地址 100083 北京市海淀区花园北路49号 申请人 清华大学 (72)发明人 陈超毅　梁晓龙　马骋　汤清双　 (74)专利代理 机构 北京众合诚成知识产权代理 有限公司 1 1246 专利代理师 陈波 (51)Int.Cl. A61K 49/22(2006.01) A61K 41/00(2020.01) A61K 33/26(2006.01) A61K 47/64(2017.01) A61K 47/60(2017.01)A61K 47/69(2017.01) A61P 35/00(2006.01) B82Y 5/00(2011.01) B82Y 40/00(2011.01) B82Y 25/00(2011.01) (54)发明名称 一种过氧化氢响应双靶向光化学动力学诊 疗一体化纳米酶 (57)摘要 本申请提供了一种过氧化氢响应双靶向光 化学动力学诊疗一体化纳米酶及其制备方法和 应用， 所述纳米酶由油酸修饰的四氧化三铁纳米 颗粒和3,3',5,5' ‑四甲基联苯胺分子组成， 所述 纳米酶表 面修饰有二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺 ‑聚 乙二醇分子以及二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺 ‑聚乙 二醇‑靶向穿膜肽cRGD分子。 本申请的纳米酶在 生物体中通过过氧化氢响应产生光热介质， 实现 过氧化氢响应型光声信号增强， 同时实现肿瘤的 光化学动力学治 疗。 权利要求书1页 说明书7页 附图8页 CN 115531561 A 2022.12.30 CN 115531561 A 1.一种过氧化氢响应双靶向光化学动力学诊疗一体化纳米酶， 其特征在于， 所述纳米 酶由油酸修饰的四氧化三铁纳米颗粒和3,3',5,5' ‑四甲基联苯胺分子组成， 所述纳米酶表 面修饰有二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺 ‑聚乙二醇分子以及二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺 ‑聚乙二 醇‑靶向穿膜肽cRGD分子 。 2.根据权利要求1所述的纳米酶， 其中所述纳米酶平均粒径为16纳米。 3.根据权利要求1所述的纳米酶的制备 方法， 其特 征在于， 所述制备 方法包括： (1)将油酸修饰的四氧化三铁纳米颗粒、 3,3',5,5' ‑四甲基联苯胺、 二硬脂酰基磷脂酰 乙醇胺‑聚乙二醇、 二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺 ‑聚乙二醇 ‑靶向穿膜肽cRGD溶解； (2)水浴超声处 理； (3)除去溶剂， 形成脂质膜； (4)加入缓冲液， 超声处 理； (5)清洗。 4.根据权利要求3所述的制备 方法， 其中步骤(1)中溶解使用的溶剂为 三氯甲烷。 5.根据权利要求3所述的制备方法， 其中步骤(1)中油酸修饰的四氧化三铁纳米颗粒、 3,3',5,5' ‑四甲基联苯胺、 二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺 ‑聚乙二醇、 二硬脂酰基磷脂酰乙醇 胺‑聚乙二醇‑靶向穿膜肽cRGD的质量比为0.5 ‑2:0.05‑0.2:1‑2:0.1‑0.3； 优选1:0.1:1.6: 0.2。 6.根据权利要求3所述的制备方法， 其中步骤(4)中加入的缓冲液为pH4.5 ‑9.0的磷酸 盐缓冲液， 优选pH7.4的磷酸盐缓冲液。 7.根据权利要求3所述的制备 方法， 其中步骤(2)、 (4)中超声处 理10‑40分钟。 8.根据权利 要求3所述的制备方法， 其中步骤(2)中超声 处理30分钟， 步骤(4)中超声处 理20分钟。 9.根据权利要求 4所述的制备 方法， 其中步骤(3)中旋转蒸发除去三氯甲烷。 10.根据权利要求1或2所述的纳米酶或者使用根据权利要求2 ‑9所述的方法所制备的 纳米酶在肿瘤诊断和治疗中的应用。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115531561 A 2一种过氧化氢 响应双靶向光化学动力学诊疗一体 化纳米酶 技术领域 [0001]本发明涉及 生物医药技术领域， 具体涉及 一种过氧化氢响应的双靶向光化学动力 学诊疗一体化纳米酶及其制备 方法和应用。 背景技术 [0002]过氧化氢是内源性产生的活性氧， 对生物分子具有高反应性， 参与多种生理和病 理过程。 包括癌症、 炎症、 心血管和神经疾病在内的许多疾病， 都会导致过氧化氢水平升高。 因此， 过氧化氢的可视化检测和量化对于早期肿瘤和其他谷胱甘肽相关疾病的诊断具有重 要意义。 此外， 纳米酶介导的芬顿反应可以很好地利用肿瘤微环境中的过氧化氢生成羟基 自由基， 并用于化学动力学治疗。 但受肿瘤微环境中过氧化氢浓度和纳米酶的递送效率的 限制， 纳米酶介导化学动力学治疗难以实现肿瘤的完全消除。 肿瘤光热诊疗因其高时空分 辨率、 肿瘤特异 性和无创性而 具有广阔的应用前景。 然而， 光穿透的物理限制和传统光热介 质的非特异性 导致难以实现肿瘤的精准诊断和完全消除。 [0003]光声成像作为一种可应用于临床和临床前研究的生物成像技术， 具有光学的对比 度和超声的穿透深度， 将基于不同生色团的结构影像和功 能影像拓展至声学成像深度， 突 破了光学散射极限， 可以探测深层生物组织的光谱信息， 同时具有非侵入、 无辐射、 高成像 速度与低成本等优势。 传统的光声成像方法借助生物体内源性光声生色团产生的光吸收对 比度(如血红蛋白、 黑色素、 脂肪等)实现深层生物组织的成像。 因此， 基于结合特异性响应 型探针的光声成像在临床 深层组织肿瘤检测 和临床前研究具有广泛的应用前 景。 [0004]现有技术公开了基于辣根过氧化物酶或金属纳米酶的纳米颗粒试剂可用于过氧 化氢的光声成像和光化学动力学诊疗一体化。 然而， 上述技术仍然面临递送效率低、 治疗不 彻底等缺点。 [0005]综上所述， 开发具有过氧化氢响应性能 同时具有较高递送效率和治疗效果的诊疗 一体化纳米酶， 用于活体过氧化氢检测和光化学动力学治疗， 为本领域亟待解决的技术问 题。 发明内容 [0006]为解决以上问题， 本发明提供了一种过氧化氢响应的双靶向光化学动力学诊疗一 体化纳米酶及其制备方法和应用， 本发明提供的过氧化氢响应的双 靶向光化学动力学诊疗 一体化纳米 酶具有在生物体中通过过氧化氢响应产生光热介质， 实现过氧化氢响应型光声 信号增强， 同时实现肿瘤的光 化学动力学治疗。 [0007]一方面， 本申请提供了一种过氧化氢响应双靶向光化学动力学诊疗一体化纳米 酶， 所述纳米酶由油酸修饰的四氧化三铁纳米颗粒和3,3',5,5' ‑四甲基联苯胺分子组成， 所述纳米酶表面修饰有二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺 ‑聚乙二醇分子以及二硬脂酰基磷脂酰乙 醇胺‑聚乙二醇 ‑靶向穿膜肽cRGD分子 。 [0008]进一步地， 所述纳米酶平均粒径为16纳米。说　明　书 1/7 页 3 CN 115531561 A 3