(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210255066.X (22)申请日 2022.03.15 (71)申请人 南京羿检医学 科技有限公司 地址 210000 江苏省南京市江北新区探 秘 路73号树屋十六栋D-2栋2层204室 申请人 中国药科大学 (72)发明人 梁宏伟　李丽民　赵坤　张衡　 惠斌　邱黄君　张怡然　黄一婧　 焦柯程　李静　孙傲雪　张婷　 李乐琪　陈家仪　 (74)专利代理 机构 南京天华专利代理有限责任 公司 32218 专利代理师 傅婷婷 (51)Int.Cl. C12Q 1/6883(2018.01)C12Q 1/6851(2018.01) C12Q 1/6869(2018.01) C12N 15/11(2006.01) (54)发明名称 测定尿液微囊泡中RNA含量的试剂在制备糖 尿病肾病诊断试剂中的应用 (57)摘要 本发明公开了测定尿液微囊泡中RNA含量的 试剂在制备糖尿病肾病诊断试剂中的应用。 与糖 尿病肾病相关的尿液微囊泡RNA标志物， 选自下 列环状RNA中的任意一种或多种： MS4A6A、 CPA3、 CXCL6和TA C1。 定量检测所述的尿 液微囊泡RNA标 志物的试剂在制备糖尿病肾病诊断试剂或辅助 诊断试剂中的应用。 发明人通过高通量测序和定 量PCR发现尿 液微囊泡中4种RNA在糖尿病肾病 患 者中明显 上升， 并且能够有效的将糖尿病肾病 患 者和非糖尿病肾病 患者区分开， ROC曲线下AUC均 大于0.85， 具备诊断价值。 总体来说， 这4个优选 的尿液微囊泡RNA可作为检测标志物 应用于糖尿 病肾病的诊断。 权利要求书1页 说明书5页 序列表2页 附图6页 CN 114574573 A 2022.06.03 CN 114574573 A 1.与糖尿病肾病相关的尿液微囊泡RNA标志物， 其特征在于选自下列环状RNA中的任意 一种或多种： MS4A6A、 CPA3、 CXCL6和TAC1。 2.权利要求1所述的尿液微囊泡RNA标志 物在制备糖尿病肾病诊断试剂中的应用。 3.定量检测权利要求1所述的尿液微囊泡RNA标志物的试剂在制备糖尿病肾病诊断试 剂或辅助诊断试剂中的应用。 4.根据权利要求3所述的应用， 其特征在于所述的定量检测权利要求1所述的尿液微囊 泡RNA标志 物的试剂为检测所述尿液微囊泡RNA标志 物的引物、 探针或基因芯片。 5.根据权利要求4所述的应用， 其特征在于检测MS4A6A的引物如SEQ  ID NO.1和SEQ  ID  NO.2所示； 检测CPA 3的引物如SEQ  ID NO.3和SEQ  ID NO.4所示； 检测C XCL6的引物如SEQ  ID  NO.5和SEQ  ID NO.6所示； 检测TAC1的引物如SEQ  ID NO.7和SEQ  ID NO.8所示。 6.一种糖尿病肾病诊断或辅助诊断试剂盒， 其特征在于包含定量检测MS4A6A、 CPA3、 CXCL6和TAC1中的任意两种或两种以上的试剂。 7.根据权利要求6所述的糖尿病肾病诊断或辅助诊断试剂盒， 其特征在于所述的定量 检测MS4A6A、 CPA3、 CXCL6和TAC1中的任意两种或两种以上的试剂为检测所述RNA的引物、 探 针或基因芯片。 8.根据权利要求7所述的糖尿病肾病诊断或辅助诊断试剂盒， 其特征在于检测MS4A6A 的引物如SEQ  ID NO.1和SEQ  ID NO.2所示； 检测CPA 3的引物如SEQ  ID NO.3和SEQ  ID NO.4 所示； 检测CXCL6的引物如SEQ  ID NO.5和SEQ  ID NO.6所示； 检测TAC1的引物如SEQ  ID  NO.7和SEQ  ID NO.8所示。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114574573 A 2测定尿液微囊泡中RNA含量的试剂在制备糖尿病肾病诊断试 剂中的应用 技术领域 [0001]本发明属于医学诊断领域， 涉及尿液微囊泡中RNA在糖尿病肾病诊断中的应用。 背景技术 [0002]糖尿病肾病(diabetic  nephropathy,DN)是糖尿病最主要的并发症之一,约有 30％的1型糖尿病患者和约40％的2型糖尿病患者会出现糖尿病肾病。 糖尿病肾病不仅是导 致终末期肾脏病的首位病因， 而且也是糖尿病患者死亡 的主要因素之一。 早期糖尿病肾病 存在一定的可逆性， 若能早期快速准确的诊断并给予正确、 有效的治疗措施就能够阻止患 者肾脏的进一步恶化， 避免肾衰竭的发生。 然而囿于糖尿病肾病早期无明显症状， 在日常极 容易被忽略。 糖尿病肾病患者被诊断发现时， 往往已经 处于不可逆状态， 只能进 行有限的延 缓性治疗， 肾脏会不断随着时间逐渐衰竭， 直至完全丧 失功能。 目前糖尿病肾病的诊断主要 依据尿微量白蛋白， 但白蛋白缺乏特异 性， 通常需要肾活检来进一步确诊。 肾活检为有创检 查， 临床上存在并发出血、 感染等风险而不易被患者接受， 所以寻找一种安全且 具有早期诊 断价值的生物标志 物对糖尿病肾病的早期诊断至关重要。 [0003]微囊泡是一种由活细胞释 放的具膜囊泡， 其中包含大量的蛋白质、 D NA和RNA。 机体 细胞在不同的生理和病理状态下会释放不同的微囊泡， 并且微囊泡中包含的蛋白质、 DNA和 RNA的种类和含量也会发生相应的变化。 因此， 微囊泡中的蛋白质、 DNA和RNA种类和含量能 够反应机体细胞所处的生理和病理状态， 可以作为疾病诊断的标志物。 微囊泡被证实广泛 分布于尿液、 唾液、 血液、 羊水、 脑脊液等各种体液中。 相比于其它体液， 尿液具有取样安全 简单、 样本量大且无创等优点， 因此， 尿液微囊泡是泌尿系统疾病的诊断标志物的理想来 源。 发明内容 [0004]本发明的目的是提供与糖尿病肾病相关的尿液微囊泡RNA标志 物。 [0005]本发明的另一目的是提供 所述标志 物的应用。 [0006]本发明的又一目的是提供检测所述标志 物的试剂及其应用。 [0007]本发明的目的可通过以下技 术方案实现： [0008]与糖尿病肾病相关的尿液微囊泡RNA标志物， 选自下列环状RNA中的任意一种或多 种： MS4A6A、 CPA3、 CXCL6和TAC1。 [0009]本发明所述的尿液微囊泡RNA标志 物在制备糖尿病肾病诊断试剂中的应用。 [0010]定量检测所述的尿液微囊泡RNA标志物的试剂在制备糖尿病肾病诊断试剂或辅助 诊断试剂中的应用。 [0011]作为本发明的一种优选， 定量检测所述的尿液微囊泡RNA标志物的试剂为检测所 述尿液微囊泡RNA标志 物的引物、 探针或基因芯片。 [0012]作为本发明的进一步优选， 检测MS4A6A的引物如SEQ  ID NO.1和SEQ  ID NO.2所说　明　书 1/5 页 3 CN 114574573 A 3