ICS 11.220 CCS B 41 21 辽 宁 省 地 方 标 准 DB21/T 3600—2022 奶牛养殖场副结核病防治技术规范 Technical specification for control of paratuberculosis in large-scale dairy farms 2022 - 06 - 30 发布 2022 - 07 - 30 实施 辽宁省市场监督管理局 发 布 DB21/T 3600—2022 前 言 本文件按照GB/T 1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件起草单位：大连市现代农业生产发展服务中心、辽宁佰瑞生物科技有限公司、大连市金弘基 种畜有限公司。 本文件主要起草人：苍真伟、赵怡雯、刘佳、胡永倩、张桐源、于汉勋、程淑晶、梅强、姜卓、任 利枢、高波、张玉平、王蕴玥。 本文件发布实施后，任何单位和个人如有问题和意见建议，均可以通过来电和来函等方式进行反馈， 我们将及时答复并认真处理，根据实际情况依法进行评估及复审。 归口管理部门通讯地址： 辽宁省农业农村厅（沈阳市和平区太原北街2号），联系电话：024-23447862。 文件起草单位通讯地址：大连市现代农业生产发展服务中心（大连市甘井子区姚工街6号），联系 电话：0411-86420938。 I DB21/T 3600—2022 奶牛养殖场副结核病防治技术规范 1 范围 本文件规定了奶牛养殖场副结核病的诊断技术、日常管理、监测与净化、无害化处理的要求。 本文件适用于奶牛养殖场副结核病的防治。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB/T 27637 副结核分枝杆菌实时荧光PCR检测方法 NY/T 539 副结核病诊断技术 NY/T 1567 标准化奶牛场建设规范 NY/T 5049 无公害食品 奶牛饲养管理准则 SN/T 1084 牛副结核病检疫技术规范 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 副结核病 paratuberculosis 是由副结核分枝杆菌引起的反刍兽的慢性消化道疾病，又称副结核性肠炎。以顽固性腹泻、渐进性 消瘦、肠黏膜增厚并形成皱襞为特征。 4 诊断技术 4.1 流行特点 副结核病无明显季节性，但常发生于春秋两季，多呈散发或地方性流行。副结核病主要引起牛，尤 其是奶牛发病，3月龄以内的犊牛最易感，且在规模化的奶牛养殖场较分散饲养牛群的发病率高。副结 核病在牛群中流行很难根除。病牛和带菌牛是副结核病的主要传染源，发病期和潜伏期均能持续或间歇 性向体外排出大量细菌，致病菌可通过排泄物排出体外，也可随乳汁和尿液排出体外，污染周围环境、 饮水、器具等。 副结核病传播比较缓慢，在感染初期不出现任何症状。犊牛感染后有较长的潜伏期，往往到2岁～5 岁才表现病状。母牛在怀胎、分娩及泌乳期由于机体抵抗力变低也易感染，饲料中缺乏矿物质、饲养密 1 DB21/T 3600—2022 度较大， 可致使牛免疫力变低促使副结核病发生。副结核病多发于2岁～5岁的高产奶牛，也发生于公牛， 生产6胎以上的老牛很少发生。 4.2 病原特性 副结核分枝杆菌是一种抗酸菌，革兰氏阳性菌，细胞内寄生，对外界环境的抵抗力强，易在酸性土 壤环境下存活和繁殖，在潮湿和较冷的条件下可存活长达一年，在高热和干燥的环境下则可降低其活性。 对酸性消毒药的抵抗力强，在碱性环境中也可降低其活性。加热较易杀死本菌。 4.3 传播途径 早期的粪口传播是最常见的传播途径。牛采食了被病菌污染的饲料、饮水和牧草，经消化道感染传 播，也可经乳汁感染幼畜或经胎盘宫内感染给犊牛。 4.4 临床症状 感染初期一般见不到明显临床症状，多在分娩后数周内突然出现症状。发病初期的主要症状为间歇 性腹泻，经对症治疗后短期内可缓解症状，但当遇到产犊、气候骤变、更换饲料等因素引起应激反应， 临床症状将反复出现，最后转为顽固性腹泻，2周～3周后病情恶化，转为持续性下痢，排出恶臭且带有 血液、气泡、黏液或血凝块的排泄物，严重者可呈喷射状下痢，对药物治疗不敏感。随着病情发展，临 床症状逐渐加重，病牛精神变差、食欲消减、甚至废绝，渐进性消瘦和体况下降。各部骨骼凸显、被毛 干涩无光、贫血、眼睛凹陷、泌乳减少甚至停止。进行直肠检查时可触摸到肥厚的小肠肠管。部分病牛 会出现肌肉萎缩，导致跛行或无法站立，全身衰竭而死。 4.5 病理变化 病死牛剖检可见以下变化：回肠增厚和水肿，黏膜面可出现典型的皱褶，回肠浆膜面淋巴管明显扩 张，回盲淋巴结和其他肠系膜淋巴结肿大，切面出现水肿液；在严重病例中，病变可出现在盲肠和结肠， 并且从回肠和盲肠向前扩散到小肠的前段。 4.6 诊断 4.6.1 养殖场自检可采用皮内变态反应方法进行，实验室检测可以采用病原学和血清学方法进行。 4.6.2 现场诊断 可以采用皮内变态反应试验，按照 NY/T 539 相关规定执行。 4.6.3 病原学诊断 可以采用分子生物学方法，按照 GB/T 27637 和 SN/T 1084 相关规定执行。 4.6.4 血清学诊断 可以采用酶联免疫吸附试验（ELISA）方法，对血清进行副结核抗体检测，按照 NY/T 539 相关规定执行。 5 日常管理 5.1 养殖场的选址、场区布局、牛舍、饲料贮存加工、卫生防疫以及配套工程等,应按照 NY/T 1567 中相关规定执行。养殖场的卫生消毒、饲喂管理、挤奶管理、灭蚊蝇、灭鼠等，应按 NY/T 5049 有关规 定执行。 5.2 保持牛舍内环境卫生，排泄物及其他污物应及时有序清理。每天应及时除去牛舍内及运动场褥草、 污物和排泄物，并将排泄物及污物运送到贮粪场发酵处理。 2 DB21/T 3600—2022 5.3 当发现有腹泻症状的牛时，应立即将病牛隔离饲养，并及时清理病牛的排泄物。对病牛的排泄物、 污染物及污染的环境用 3%～5%的火碱或生石灰等碱性消毒药进行彻底消毒处理，并适当增加消毒频次。 5.4 给牛饲喂草料和水等应先喂健康牛，再喂病牛。 5.5 隔离舍应独立配备饲养人员，且不应到健康舍串舍，隔离舍使用的工具应专舍专用，用后立即清 洗消毒。 5.6 初乳应消毒后喂养犊牛，4 月龄以下犊牛应与成母牛隔离饲养。 5.7 养殖场应按照相关文件规定，建立并保存养殖档案。 6 监测与净化 6.1 新建养殖场进牛，应 100%采样进行副结核抗体检测，抗体阴性牛方可入场。 6.2 对常规奶牛养殖场净化时，应先按照相关管理规定随机采样,进行副结核抗体检测，如果有阳性， 则应全群采样进行检测，并对抗体阳性牛隔离饲养。 6.3 对副结核检测抗体阳性牛应采集对应牛只排泄物用分子生物学方法做病原学检测；对副结核抗体 可疑的，应在 3 个月后进行复检，复检结果仍为可疑，按抗体阳性牛处理；复检结果为阴性的，按健康 牛正常饲养。 6.3.1 病原学检测结果呈阳性且有临床症状的，建议直接淘汰。 6.3.2 病原学检测结果阳性无临床症状的，建议隔离观察，一旦出现临床症状要立即采取消毒、淘汰 措施。 6.3.3 病原学检测结果呈阴性的，应至少每月检测一次，检测结果与处理方式按本章 6.3.1、6.3.2 条款执行。连续两次检测结果阴性按健康牛正常饲养。 6.4 对全群检测结果呈阴性的，至少每半年进行一次抗体检测，出现抗体阳性则应全群检测。临床有 腹泻或消瘦的则应进行病原学检测，阳性牛及时淘汰，并对全群开展紧急检测。 6.5 对于外引奶牛，按照本章 6.1 执行。 7 无害化处理 对于病死奶牛及其污染物无害化处理按照相关管理规定执行。 3