ICS 13.300;11.100 A 80 GB 中华人民共和国国家标准 GB/T29764—2013 化学品 青鱼早期生命阶段毒性试验 Chemicals-Fish (Oryzias latipes,d-rR Medaka) early life stage toxicity test 2013-09-18发布 2014-03-20实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布 中国国家标准化管理委员会 GB/T 29764—2013 目 次 前言 范围 规范性引用文件 2 术语和定义 3 受试物信息 方法概述 仪器设备 6 试验准备 试验程序 质量保证与质量控制 9 10 数据与报告. 6 附录A（资料性附录）青（Oryziaslatipes，d-rRMedaka)驯养繁殖和培育的环境参数 附录B（资料性附录）合格稀释水的化学特征· 10 附录C（资料性附录）孵化液的配制成分 11 参考文献 GB/T 29764—2013 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准参照了经济合作与发展组织（OECD)化学品测试导则No.210（1992年）《鱼类早期生命阶段 毒性试验》（英文版），并主要增加了以下内容： 喂量等资料； 异常特征中增加了多种胚胎损伤和幼鱼畸形表述； 一在性别比率表述中增加了雌雄形态区别； 一统计参数增加了试验结束时雌雄鱼性别比率。 本标准由全国危险化学品管理标准化技术委员会（SAC/TC251)提出并归口。 记中心、上海市检测中心。 本标准主要起草人：查金苗、王子健、李伟、朱莉飞、李兆利、李晞、程艳、刘纯新。 GB/T29764—2013 化学品 青鱼早期生命阶段毒性试验 1范围 本标准规定了青鱼（d-rR品系青，以下简称“鱼”）早期生命阶段化学品毒性试验的方法概述 仪器设备、试验准备、试验程序、质量保证与质量控制、数据与报告。 本标准适用于测试化学品对鱼类早期生命阶段（胚胎发育和幼鱼生长阶段）的毒性。 2规范性引用文件 2 下列文件对于本文件的应用是必不可少的，凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T27861化学品鱼类急性毒性试验 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3. 1 最低可观察效应浓度 lowest observed effect concentration;LOEC 与对照组相比，对受试物产生显著效应（p<0.05)的最低受试物浓度。 3.2 无观察效应浓度-znoobserved effectconcentration;NOEC 试验中直接低于LOEC的受试物浓度。 3.3 半数致死浓度 median lethal concentration;LC5o 引起50%的受试鱼死亡的受试物浓度，以LC5表示。 4 受试物信息 a) 结构式； b) 纯度； c) 水中溶解度； d) 蒸汽压； e) 水解离常数（pKa)； f) 正辛醇/水的分配系数（Pow）； g) 在水中和光中的稳定性； h) 在试验液中受试物的可靠定量分析方法及其精确度、检测限； i) 在试验条件下的稳定性； j) d-rR品系青的LC5o值； k) 快速生物降解性试验结果。 1 GB/T297642013 5方法概述 鱼类早期生命阶段毒性试验优先采用流水式试验系统，可选择半静态（静水更新）试验系统，将胚 胎-幼鱼阶段的受试鱼（d-rR品系青）暴露于一定浓度范围的受试物水溶液中。试验自受精卵放人试 验容器时开始，至幼鱼达到21日龄时结束。通过测定受试鱼的致死和亚致死效应，并与对照组值相比 较来测定受试物的LOEC和NOEC。 6仪器设备 仪器设备如下： a) 实验室常规仪器设备； b) 测定水温、pH值、溶解氧和硬度的仪器； c) 温度控制仪； d) 试验容器或装置：全玻璃、不锈钢或其他化学情性材质制成，容器的尺寸符合负荷率标准。流 水式试验方法采用流水式试验装置，具备受试物贮备液连续分配和稀释系统，并具控温、充气、 流量等装置。 7试验准备 SAG 7.1系统选择 试验期间应尽可能维持条件的恒定，推荐流水式试验系统或半静态试验系统 7.2受试生物 7.2.1受试生物的选择 本试验推荐受试生物为d-rR品系青。 7.2.2受试生物的养 亲鱼驯化所需适宜条件的详细资料可参见附录A， 7.3试验水质 试验用水符合附录B要求，或参照附录C配制孵化液作为试验用水。实验用水应满足以下要求 对照组中受试鱼的孵化率应大于或等于80%，孵化后幼鱼的存活率应大于或等于80%。试验期间应保 持水质恒定，并对水样进行定期分析，以保证稀释不会对试验结果和亲鱼繁殖产生不良影响（例如对 受试物的络合作用）。稀释水样的水质分析指标包括：重金属（如Cu2+、Pb2+，Zn²+、Hg²+、Cd2+、 Ni2+），主要阴、阳离子（如Ca2+、Mg2+、Na+、K+，CISO,2-），常见农药，总有机碳和悬浮物等。 7.4试验溶液 7.4.1通过稀释受试物的浓缩贮备液（母液）来配制所选择浓度的试验溶液 7.4.2贮备液配制：最好选择机械方法（如搅拌或超声），使受试物在稀释水中简单地混合或搅动。根 据受试物溶解度值来确定浓缩贮备液的适宜浓度。某些情况下，配制高浓度贮备液需要添加助溶剂或 分散剂，但应尽可能避免使用。适合本试验的助溶剂有：丙酮、乙醇、甲醇、二甲基亚、二甲基替甲酰 N