ICS 71. 100. 70 Y42 GB 中华人民共和国国家标准 GB/T 29671—2013 化妆品中苯酚磺酸锌的测定 高效液相色谱法 Determination of zinc 4-hydroxybenzene sulphonate in cosmetics- High performance liquid chromatography 2013-09-06发布 2014-02-15实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布 中国国家标准化管理委员会 GB/T29671—2013 前言 M本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本标准由中国轻工业联合会提出。 本标准由全国香料香精化妆品标准化技术委员会（SAC/TC257）归口。 本标准起草单位：中国检验检疫科学研究院、上海市日用化学工业研究所。 本标准主要起草人：王烨、马强、白桦、王星、席广成、席海为、卢晓静、刘茜、武晓剑、康薇， I GB/T29671—2013 化妆品中苯酚磺酸锌的测定 高效液相色谱法 1范围 本标准规定了化妆品中苯酚磺酸锌的高效液相色谱测定方法。 本标准适用于水剂、香波、膏霜、蜡基、散粉类化妆品中苯酚磺酸锌的测定。 本标准对于苯酚磺酸锌的检出限和定量限：水剂类和香波类样品中检出限为24mg/kg，定量限为 30mg/kg；膏霜类和蜡基类样品中检出限为120mg/kg，定量限为140mg/kg；散粉类样品中检出限为 60mg/kg，定量限为90mg/kg。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3原理 试样经溶剂提取，离心过滤后，用高效液相色谱法进行测定，保留时间定性，外标法定量。 4试剂和材料 除非另有规定，所用试剂均为分析纯。水为GB/T6682规定的一级水。 4.1乙腈：色谱纯。 4.2四氢呋喃：色谱纯。 4.3 40%四丁基氢氧化铵水溶液（体积分数）。 4.4磷酸二氢钠。 4.5 磷酸溶液（0.5%）：准确量取5mL磷酸于1L容量瓶中，用水定容至刻度，混勾后备用。 4.620%乙睛水溶液：准确量取20mL乙睛和80mL水，混勾后备用。 4.780%乙睛水溶液：准确量取80mL乙腈和20mL水，混匀后备用。 4.8苯酚磺酸锌标准物质：分子式Ci2H1oO.SzZn，CAS号127-82-2,纯度不小于99%，结构式参见附 录A的图A.1。 5仪器和设备 5.1高效液相色谱（HPLC)仪：配有紫外检测器或二极管阵列检测器 5.2pH计：范围0.00~14.00，精度±0.01。 5.3分析天平：感量为0.00001g和0.0001g。 1 GB/T 29671—2013 5.4离心机：转速不低于5000r/min。 5.5超声波水浴。 5.6具塞锥形瓶：50mL。 5.7具塞塑料离心管：10mL。 5.8德 微孔滤膜：0.45μm，PTFE 6分析步骤 6.1样品处理 6.1.1水剂类样品 称取0.5g（精确至0.001g）试样于50mL具塞锥形瓶中，加人15mL20%乙睛水溶液（4.6），超声 0.45μm微孔滤膜过滤，供高效液相色谱测定。 6.1.2香波类样品 提取30min。取部分溶液转移至10mL具塞塑料离心管中，以5000r/min离心10min，上清液经 0.45um微孔滤膜过滤，供高效液相色谱测定。 6.1.3膏霜类样品 称取0.5g（精确至0.001g）试样于50mL具塞锥形瓶中，加人15mL80%乙睛水溶液（4.7），超声 提取30min。取部分溶液转移至10mL具塞塑料离心管中，以5000r/min离心10min，上清液经 0.45μm微孔滤膜过滤，供高效液相色谱测定。 6.1.4蜡基类样品 称取0.5g（精确至0.001g）试样于50mL具塞锥形瓶中，加人1.5mL四氢呋喃（4.2），超声提取 10min，再加80%乙睛水溶液（4.7）至15mL，超声提取30min。取部分溶液转移至10mL具塞塑料离 6.1.5散粉类样品 称取0.5g（精确至0.001g）试样于50mL具塞锥形瓶中，加入15mL80%乙睛水溶液（4.7），超声 提取30min。取部分溶液转移至10mL具塞塑料离心管中，以5000r/min离心10min，上清液经 0.45um微孔滤膜过滤，供高效液相色谱测定。 6.2测定条件 高效液相色谱测定的参考条件如下： a） 色谱柱：KromasilC18，5μm，250mmX4.6mm（内径）,或相当者； b) 流动相：乙腈十0.025mol/L磷酸二氢钠溶液（含0.005mol/L四丁基氢氧化铵，用磷酸溶液 （4.5）调至pH2.5）=20+80（体积比）； 流速：1.0mL/min; （P 柱温：30℃； 2 GB/T29671—2013 检测波长：230nm； e） (J 进样量：10μL。 6.3标准曲线的绘制 用流动相溶液[6.2.b)]将苯酚磺酸锌标准储备溶液逐级稀释得到的浓度为0.5μg/mL、1μg/mL、 2μg/mL、5μg/mL、10μg/mL、20μg/mL、50μg/mL的标准工作溶液，按6.2的测定条件浓度由低到 高进样测定，以峰面积-浓度作图，得到标准曲线回归方程。 苯酚磺酸锌标准品色谱图参见图A.2。 6.4测定 按6.2的测定条件对待测样液进行测定，记录色谱峰的保留时间和峰面积，可从标准曲线上由色谱 峰的峰面积计算相应的苯酚磺酸锌浓度。待测样液中苯酚磺酸锌的响应值应在标准曲线的线性范围 内，超过线性范围则应稀释后再进样分析。 6.5定性确证 高效液相色谱仪对样品进行定性测定，进行样品测定时，如果检出被测苯酚磺酸锌的色谱峰的保留 时间与标准品相一致，并且在扣除背景后的样品色谱图中，该物质的紫外吸收光谱与标准品的紫外吸收 光谱相一致，则可初步确认样品中存在被测苯酚磺酸锌。必要时，需用其他方法进行确认试验。 苯酚磺酸锌标准品紫外吸收光谱图参见图A.3。 6.6空白试验 除不称取样品外，均按上述测定条件和步骤进行。 7结果计算 结果按式（1）计算，计算结果保留两位小数，计算结果应扣除空白值： w=-CXV .(1) m 式中： 试样中被测苯酚磺酸锌的含量，单位为毫克每千克（mg/kg）； 02 ——从标准工作曲线上查出的样液中苯酚磺酸锌的浓度，单位为微克每毫升（μg/mL)； V—样液最终定容体积，单位为毫升（mL）； m一一试样的质量，单位为克（g）。 8检出限和定量限 苯酚磺酸锌的检出限和定量限：水剂类和香波类样品中检出限为24mg/kg，定量限为30mg/kg 膏霜类和蜡基类样品中检出限为120mg/kg，定量限为140mg/kg；散粉类样品中检出限为60mg/kg， 定量限为90mg/kg。 9回收率和精密度 在添加浓度24mg/kg~360mg/kg的范围内，回收率在93.6%~99.1%之间，相对标准偏差在 3