ICS 71. 100. 70 Y42 GB 中华人民共和国国家标准 GB/T 24800.4—2009 化妆品中氯噻酮和盼噻嗪的测定 高效液相色谱法 Determination of chlortalidone and phenothiazine in cosmetics by high performance liquid chromatography method 2009-11-30发布 2010-05-01实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布 中国国家标准化管理委员会 GB/T24800.4—2009 前言 本标准的附录A为资料性附录。 本标准由中国轻工业联合会提出。 本标准起草单位：中国检验检疫科学研究院、上海市日用化学工业研究所、上海香料研究所。 本标准主要起草人：肖海清、张庆、王超、武婷、席广成、王星、吴颖、康薇。 GB/T24800.4—2009 引言 本标准中的被测物质是我国《化妆品卫生规范》规定的禁用物质，不得作为化妆品生产原料即组分 添加到化妆品中。如果技术上无法避免禁用物质作为杂质带人化妆品时，则化妆品成品应符合《化妆品 卫生规范》对化妆品的一般要求，即在正常及合理的可预见的使用条件下，不得对人体健康产生危害 目前我国尚未规定这些物质的限量值，本标准的制定，仅对化妆品中测定这些物质提供检测方法。 GB/T24800.4—2009 化妆品中氯噻酮和盼噻嗪的测定 高效液相色谱法 1范围 本标准规定了化妆品中氯噻酮和盼噻嗪的高效液相测定方法。 本标准适用于化妆品中氯噻酮和盼噻嗪含量的测定。 本标准对于氯噻酮和盼噻嗪的检出限为2mg/kg，定量限为8mg/kg 2原理 以丙酮为提取溶剂，超声波水浴提取后，离心，用0.45μm的有机滤膜过滤，取20μL溶液注人配 有紫外检测器的高效液相色谱仪检测，外标法定量 3试剂和材料 除非另有说明，所用试剂均为分析纯，水为高纯水。 3.1丙酮。 3.2无水磷酸二氢钠 3.3氢氧化钠。 3.4甲醇（色谱纯）。 3.5氯噻酮，纯度不小于98.0%。 3.6吩噻嗪，纯度不小于99.0%。 3.70.5%氢氧化钠溶液：称取2.5g氢氧化钠（3.3），精确至0.001g，用500mL水溶解，保存于塑料 瓶中。 水溶解后，用0.5%氢氧化钠溶液（3.7调节pH为5.60，过0.45μm有机滤膜。 3.9分别称取氯噻酮（3.5）和盼噻嗪（3.6)0.1g，精确至0.0001g，用甲醇（3.4）溶解后分别定容至 100mL容量瓶中，密封、避光、冷藏保存，保存期6个月。 3.10氯噻酮和吩噻嗪混合标准储备液（200mg/L）：分别移取氯噻酮和盼噻嗪标准储备液（3.9)10mL 于50mL容量瓶中，用甲醇（3.4）定容，密封、避光、冷藏保存，保存期6个月。 （3.8）（55+45，v/v）稀释，配制成浓度为0.2mg/L，0.5mg/L，2mg/L，5mg/L，20mg/L的溶液，现用 现配。 4仪器 4.1高效液相色谱仪，配紫外检测器。 4.2 微量进样器，50μL。 4.3超声波清洗器。 4.4高 离心机，最高转速不小于15000r/min。 4.5溶剂过滤器，能放置孔径为0.45μm的有机过滤膜。 4. 6 具塞比色管10mL、25mL。 1 GB/T24800.4—2009 5试验步骤 5.1提取 称取化妆品试样0.5g（精确到0.001g），置于10mL具塞离心管中，加人丙酮（3.1)6mL，充分混 匀，在超声波清洗器中超声提取10min，以15000r/min离心10min，将上清液转移至25mL具塞管 中，下层沉淀用丙酮（3.1)重复提取两次，每次2mL，合并上清液，用30mmol/L磷酸二氢钠溶液（3.8） 定容至25mL，混匀。取约5mL上述溶液于离心管中，以15000r/min离心15min，上清液过0.45μm 有机滤膜后，待用。 5.2测定 5.2.1色谱条件 5.2.1.2流动相：A：30mmol/L磷酸二氢钠溶液（3.8）,B甲醇（3.4），梯度洗脱条件见表1。 表1方法的梯度洗脱条件 时间/min 0 6 15 16 21 24 28 A/% 45 20 20 10 10 45 45 B/% 55 80 80 90 06 55 55 5.2.1.3 流速：1.0mL/min。 5.2.1.4检测波长：230nm。 5.2.1.5色谱柱温：30℃。 5.2.1.6进样量：20μL。 5.2.2标准工作曲线绘制 取浓度为0.2mg/L,0.5mg/L2mg/L，5mg/L，20mg/L的标准工作溶液（3.11），按色谱条件 （5.2.1)行测定，以色谱峰的峰面积为纵坐标，对应的溶液浓度为横坐标作图，绘制标准工作曲线。 标准物质色谱图参见附录A的图A.1。 5.3试样测定 试样溶液（5.1）注人液相色谱仪，按色谱条件（5.2.1)进行测定，记录色谱峰的保留时间和峰面积， 由色谱峰的峰面积可从标准曲线上求出相应的色谱峰浓度。样品溶液中的氯噻酮和盼噻嗪的响应值均 应在标准工作曲线浓度范围之内，氯噻酮和盼噻嗪含量高的试样可取适量试样溶液用流动相稀释后进 行测定。必要时，阳性样品需用其他方法进行确认试验 5.4空白试验 除不称取试样外，均按上述操作步骤进行。 6结果计算 结果按式（1）计算（计算结果应扣除空白值）： .(1) m 式中： X—样品中氯噻酮或吩噻嗪的质量浓度，单位为毫克每千克（mg/kg）； 标准曲线计算所得氯噻酮或盼噻嗪的浓度，单位为毫克每升（mg/L）； 标准曲线计算所得空白样品中氯噻酮或吩噻嗪的浓度，单位为毫克每升（mg/L）； Vi 样品稀释后的总体积，单位为毫升（mL）； 样品质量，单位为克（g）。 m 2