ICS 65.100 B 13 GD 中华人民共和国国家标准 GB/T 31270.7—2014 化学农药环境安全评价试验准则 第7部分：生物富集试验 Test guidelines on environmental safety assessment for chemical pesticidesPart 7: Bioconcentration test 2014-10-10发布 2015-03-11实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布 中国国家标准化管理委员会 GB/T31270.7—2014 前言 GB/T31270《化学农药环境安全评价试验准则》分为21个部分： 第1部分：土壤降解试验； 第2部分：水解试验； 第3部分：光解试验； 第4部分：土壤吸附/解吸试验； 第5部分：土壤淋溶试验； 第6部分：挥发性试验； 一第7部分：生物富集试验； 第8部分：水-沉积物系统降解试验； 第9部分：鸟类急性毒性试验； 第10部分：蜜蜂急性毒性试验； 第11部分：家蚕急性毒性试验； 第12部分：鱼类急性毒性试验； 第13部分：涵类急性活动抑制试验； 一第14部分：藻类生长抑制试验； 第15部分：蜥蚓急性毒性试验； 第16部分：土壤微生物毒性试验； 第17部分：天敌赤眼蜂急性毒性试验； 第18部分：天敌两栖类急性毒性试验； 第19部分：非靶标植物影响试验； 第20部分：家畜短期饲喂毒性试验； 第21部分：大型甲壳类生物毒性试验。 本部分是GB/T31270的第7部分。 本部分按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本部分由中华人民共和国农业部提出并归口。 本部分负责起草单位：农业部农药检定所、环保部南京环境科学研究所。 本部分主要起草人：单正军、林荣华、孔祥吉、王娜、李莹、吴珉、张宏涛 I GB/T 31270.7—2014 化学农药环境安全评价试验准则 第7部分：生物富集试验 1范围 GB/T31270的本部分规定了生物富集试验的材料、条件、操作、质量控制、数据处理、试验报告等 的基本要求。 本部分适用于化学农药登记而进行的生物富集试验，仅当供试物LogK。w>3时才进行该项试验。 其他类型的农药可参照使用。 2术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 2.1 bioconcentration 生物富集 生物体从生活环境与食物中不断吸收低剂量物质、逐渐在体内积累浓缩的过程。 同义词：生物浓缩、生物蓄积bioaccumulation。 ［NY/T1667.5—2008.定义3.5] 2.2 供试物test substance 试验中需要测试的物质。 2.3 化学农药 chemical pesticide 利用化学物质人工合成的农药。其中有些以天然产品中的活性物质为母体，进行仿制、结构改造， 创新而成，为仿生合成农药。 同义词：有机合成农药syntheticorganicpesticide。 [NY/T1667.1—2008,定义2.3.1] 2.4 原药technical material 在制造过程中得到的有效成分及杂质组成的最终产品，不能含有可见的外来物质和任何添加物，必 要时可加入少量的稳定剂。 ［NY/T1667.2—2008,定义2.5.1] 2.5 有效成分active ingredient;a.i. 农药产品中具有生物活性的特定化学结构成分。 ［NY/T1667.2—2008,定义3.1] 2.6 半静态试验法 semi-static test 试验期间每隔一定时间（如24h）更换一次药液，保持试验药液的浓度不低于初始浓度的80%。 1 GB/T31270.7—2014 2.7 静态试验法 statictest 试验期间不更换试验药液。 2.8 流水式试验法 flow-through test 试验期间药液自动连续地流入试验容器，同时保持容器内药液体积的相对恒定 3试验概述 采用鱼类作为供试生物，按供试物的性质采用静态法、半静态法或流水式试验法。将受试鱼暴露于 两个浓度的供试物溶液中，定期采样测定鱼体与药液中供试物的浓度，计算得生物富集系数（BCF），以 此评价供试物的生物富集性。根据农药登记管理法规及其他规定选择相关方法进行试验。 4试验方法 4.1材料和条件 4.1.1供试物 供试物应使用农药纯品、原药或制剂。 4.1.2供试生物 试验用鱼种宜选择的斑马鱼（Brachydoniorerio）、鲤鱼（Cyprinuscarpio）、虹鳟鱼（Oncorhynchus mykiss）、青（Oryziaslatipes）或稀有鲫（Gobiocyprisrarus）幼鱼，具体体长和水温条件等驯养要 求参见附录A。如选用其他鱼类作为供试生物，应采用相应的驯养和试验条件，并加以说明。 试验用鱼应健康无病，大小一致。试验前应在与试验时相同的环境条件下驯养7d～14d,驯养期 间每天喂食1次～2次，每日光照12h16h，及时清除粪便及食物残渣。试验期间在必要时投入适量 饵料（每天投喂量约为鱼体重的1%～2%），每天用虹吸管及时清除试验鱼缸中剩余的饵料和排泄物。 4.1.3主要仪器设备 主要仪器设备如下： 一鱼缸； 气相色谱仪/液相色谱仪等。 4.1.4试验用水 试验用水为存放并去氯处理24h以上的自来水（必要时经活性炭处理）或能注明配方的稀释水。 水质硬度在10mg/L～250mg/L之间（以CaCO计），pH在6.0～8.5之间，并且试验期间变化量在 土0.5之间，溶解氧保持在试验温度下饱和值的60%。 4.2试验操作 4.2.11 供试物溶液配制 将供试物溶于水中，难溶于水的可用少量低毒、不易降解的有机溶剂（如叔丁醇或二甲亚）助溶 加量小于0.1mL/L 2 GB/T31270.7—2014 4.2.2方法的选择 按供试物的稳定性选择静态试验法、半静态试验法或流水式试验法。对于稳定性较强的供试物采 用静态试验法；对具有一定稳定性的供试物，如供试物水溶液在24h内浓度变化小于20%，采用半静态 试验法；对易降解与强挥发性的供试物，采用流水式试验法。方法选择详见附录B。 4.2.3正式试验 应先做鱼类急性毒性试验，求得LCso（96h）值，再进行生物富集试验。配制药液浓度通常为急性 毒性LC5（96h)的1/10和1/100两个处理，每个处理至少应设两个平行。每个处理投放一定数量的试 验用鱼，投放数量应满足试验分析的需要，并使生物承载量满足每天每升水承载鱼重（湿重）0.1g～ 1.0g。试验过程中定期测定水中pH、溶解氧含量，于0h、24h、48h、96h、144h、192h分别从各处理 中取水样与鱼样（称重，采集鱼尾数应满足试验分析的需要，采用虹吸法采集水样），测定水样与鱼样中 的供试物含量。同时设置不加供试物的对照处理。 4.3数据处理 检测鱼体摄入供试物的实际值。试验结束时水体及鱼体中供试物含量变化已达到平衡，则鱼体对 供试物的富集系数按式（1）计算，计算结果保留三位有效数字。 Cis BCF= I )... Cws 式中： BCF生物富集系数； Crs一平衡时鱼体内的供试物含量，单位为毫克每千克（mg/kg）； Cws 一一平衡时水体中的供试物含量，单位为毫克每升（mg/L）。 如果在试验结束时，鱼体中农药浓度尚未达到平衡，则用上述公式求出的富集系数值应注明是8d 的结果，即用BCFsd表示。 4.4J 质量控制 质量控制条件包括： 试验前试验用鱼应在实验室内预养一周，预养期间生长正常，死亡率小于5%； 一一水和鱼体中农药残留量测定方法回收率为70%～110%，最低检测浓度限应低于初始添加浓 度的1%； 一试验期间水中溶解氧保持试验温度下饱和值的60%； 一试验期间试验鱼生长正常； 一试验浓度设定以满足试验要求为标准。 5试验报告 试验报告至少应包括下列内容： 供试物的信息，包括供试农药的通用名、化学名称、结构式、CAS号、纯度、基本理化性质、来 源等； 供试生物的种名、来源、驯化时间、驯化条件、食物种类与数量、鱼龄和规格； 一一试验条件，包括试验时间、周期、温度、试验容器、农药浓度、pH、溶解氧、助溶剂及浓度、试验鱼 数量、投食时间和数量等； 3