ICS 71.100.70 Y42 中华人民共和国国家标准 GB/T 37649—2019 化妆品中硫柳汞和苯基汞的测定 高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱法 Determination of thimerosal and diphenylmercury in cosmetics- High performance liquid chromatography-inductively coupled plasma mass spectrometry 2019-06-04发布 2020-01-01实施 国家市场监督管理总局 发布 中国国家标准化管理委员会 GB/T37649—2019 前言 本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。 本标准由中国轻工业联合会提出。 本标准由全国香料香精化妆品标准化技术委员会（SAC/TC257）归口。 本标准起草单位：上海市质量监督检验技术研究院（国家保洁产品质量监督检验中心），上海市日用 化学工业研究所（国家香料香精化妆品质量监督检验中心）。 本标准主要起草人：段文锋、冷桃花、陈贵宇、解楠、潘煜辰、周静、康薇 GB/T37649—2019 化妆品中硫柳汞和苯基汞的测定 高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱法 1范围 本标准规定了化妆品中硫柳汞和苯基汞的高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱测定方法的原理、 试剂和材料、仪器设备、测定步骤、结果计算、回收率与精密度、允许差等内容。 本标准适用于膏、霜和乳液类化妆品中硫柳汞和苯基汞含量的测定 本标准方法硫柳汞和苯基汞的检出限（以汞计）为：0.3mg/kg，定量限（以汞计）为1.0mg/kg 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3原理 样品在经过提取后，经高效液相色谱仪分离，电感耦合等离子质谱仪检测，外标法定量。 4试剂和材料 除非另有规定，所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。 4.1硫柳汞：纯度不小于96.0%。硫柳汞的中文名称，INCI名称（国际化妆品原料名称）/英文名称、 CAS号、分子式、相对分子质量和结构式参见附录A中的表A.1。 4.2苯基汞：纯度不小于98.0%。苯基汞的中文名称、INCI名称/英文名称、CAS号、分子式、相对分子 质量和结构式参见附录A中的表A,1。 4.3L-半胱氨酸：纯度不小于98.0%。 4.4甲醇：色谱纯。 4.5乙酸铵。 4.6乙酸铵水溶液（c=60mmol/L，含有0.1%L-半胱氨酸）：分别准确称取4.625g乙酸铵，1.000gL 半胱氨酸，用水定容至1000mL，混匀。经0.45μm水系滤膜过滤后，于超声水浴中超声脱气30min， 备用。 4.7混合标准工作溶液：分别准确称取适量的硫柳汞和苯基汞标准品，用甲醇（4.4）溶解定容，制备成 0.50g/L（以汞计）的硫柳汞和苯基汞标准储备溶液（一18℃以下避光保存，有效期6个月）。移取适量 标准储备溶液于100mL的容量瓶中，用乙酸铵水溶液（4.6）定容至刻度，作为混合标准工作溶液，参考 线性范围为0.00μg/L、2.50μg/L、5.00μg/L、12.5μg/L、25.00μg/L、50.00μg/L（以汞计）。 5仪器设备 5.1高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱联用仪。 1 GB/T37649—2019 5.2 电子天平：感量为0.01g和0.0001g。 5.3 离心机：转速不低于5000r/min。 5.4 超声清洗仪。 5.5 孔径0.45μm有机滤膜。 6 测定步骤 6.1 样品处理 称取0.2g（精确至0.001g）样品置于15mL具塞刻度管中，用10mL甲醇（4.4）溶解，超声提取 15min，用乙酸铵水溶液（4.6）定容至15mL，混合均匀，置于5000r/min高速离心机上离心5min，经 0.45um滤膜过滤，滤液作为待测样液，备用。可依据需要对待测液进行浓缩或稀释。 6.2 仪器参考条件 6.2.1 高效液相色谱参考条件 高效液相色谱参考条件如下： a) 色谱柱：C18反相色谱柱或相当者（4.6um×150mm，5um）； b) 流动相：流动相A：甲醇；流动相B：乙酸铵水溶液[（4.6)]；高效液相色谱梯度洗脱程序参见 表1; c) 流速：1.0mL/min; (P 柱温：25℃； e) 进样量：20uL。 表1 高效液相色谱梯度洗脱程序 时间/min 流动相A/% 流动相B/% 0 20 80 5 50 50 8 50 50 80 11 20 15 20 80 6.2.2 电感耦合等离子质谱参考条件 电感耦合等离子质谱参考条件如下： a) 射频(RF)功率：1400W； b) 载气流速：0.54L/min； c) 辅助气流速：0.28L/min； d) 反应气比例：80%Ar+20%O2（体积分数）； e) 采样模式：时间积分； f) 分析时间：900s； g) 检测元素：202Hg。 2 GB/T 37649—2019 6.3标准工作曲线的绘制 按照6.2仪器参考条件检测，以标准系列溶液0.00ug/L、2.50μg/L、5.00μg/L、12.5μg/L、 25.00μg/L、50.00μg/L（以汞计)的质量浓度为横坐标，对应的峰面积为纵坐标进行线性回归得到标准 曲线方程。 硫柳汞和苯基汞标准物质色谱图参见附录B中的图B.1。 6.4测定 按6.2的仪器条件，取6.1步骤中的滤液进样，从标准曲线上查得试样溶液中硫柳汞和苯基汞（以汞 计）的含量。试样溶液中硫柳汞和苯基汞（以汞计）的响应值应在标准曲线线性范围内，超过线性范围则 应将提取液稀释后测定或增加提取溶液的量重新检测。 6.5平行试验 样品中的硫柳汞和苯基汞（以汞计）含量应根据两次独立的平行试验结果的平均值确定。 所有测定步骤应在24h内完成 7结果计算 样品中硫柳汞或苯基汞的含量（以汞计）按式（1)计算 DpV (1) m×1000 式中： 一—样品中硫柳汞或苯基汞的含量（以汞计），单位为毫克每干克（mg/kg）； 稀释倍数； 从标准工作曲线上查得的待测样液中硫柳汞或苯基汞的质量浓度（应扣除空白值，以汞 计),单位为微克每升（μg/L)； V. 样品定容体积，单位为毫升（mL）； m 样品取样量，单位为克（g）。 3回收率与精密度 8 在样品中添加5μg/L~50μg/L的硫柳汞和苯基汞（以汞计），回收率在79.0%～118.4%，相对标 准偏差小于10%。 9 允许差 在重复条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。 3