ICS 07.100.20 J 77 中华人民共和国国家标准 GB/T 37206—2018 有机分离膜抗菌性能测试方法 Test method for antibacterial properties of organic separation membrane 2018-12-28发布 2019-11-01实施 国家市场监督管理总局 发布 中国国家标准化管理委员会 GB/T37206—2018 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准由全国分离膜标准化技术委员会（SAC/TC382)提出并归口。 本标准起草单位：天津膜天膜工程技术有限公司、北京科泰兴达高新技术有限公司、天津大学、天津 膜天膜科技股份有限公司、山东招金膜天股份有限公司、长江大学、广州中国科学院先进技术研究所、浙 江津膜环境科技有限公司、国家海洋局天津海水淡化与综合利用研究所。 本标准主要起草人：赵莹、于慧、周明璟、王志、王春浩、王乐译、张梦、孔、王剑鸣、冯磊、王瀚漪、 刘燕、许以农、唐小珊。 GB/T 37206—2018 有机分离膜抗菌性能测试方法 1范围 本标准规定了水处理用有机分离膜抗菌性能的测试方法。 本标准适用于有机平板膜、中空纤维膜抗菌性能的测试，其他类型的有机分离膜可参考执行 2规范性引用文件 2 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB4789.2一2016食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数测定 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 GB/T26813双光束紫外可见分光光度计 YY0569—2011I Ⅱ级生物安全柜 TAC 术语和定义 3 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 抗菌 antibacterial 制品表面抑制细菌生长的状态或药剂抑制制品表面细菌生长的效果。 [GB/T31402—2015,定义3.1] 3.2 有机膜 organicmembrane 以有机聚合物制成的具有分离功能的半透膜。 [GB/T20103—2006,定义2.1.8］ 3.3 平板膜 flatmembrane 外形为平板或纸片状的膜。 [GB/T20103—2006,定义2.1.27] 3.4 中空纤维膜 hollow fiber membrane 外形为纤维状，空心的膜。 注：改写GB/T20103—2006，定义2.1.28。 3.5 菌落形成单位 colony forming unit;CFU 在活菌培养计数时，为表达活菌的数量，由单个菌体或聚集成团的多个菌体在固体培养基上生长繁 殖所形成的集落 1 GB/T37206—2018 3.6 抗菌率 antibacterial rate 在抗菌试验中用百分率表示微生物数量减少的值。 ［GB21551.1—2008,定义3.6] 4方法原理 细菌数，计算膜试样的抗菌率。 5 仪器设备 5.1 Ⅱ级生物安全柜：符合YY0569—2011的规定 5.2 2分光光度计：符合GB/T26813的规定。 5.3 3恒温恒湿培养箱：温度应保持（36土1)℃。 5.4电热恒温水浴锅：控温准确度土1℃。 5.5 高压蒸汽灭菌锅：温度应保持（121土2）℃。 5.6 5冷藏箱：温度应保持5℃~10℃。 天平：感量为0.1g。 5.7 5.8 8无菌平皿：玻璃或聚苯乙烯制，直径90mm。 无菌试管：15mm×150mm。 5.10 无菌移液器：量程为10μL~100μL、100μL~1000μL、2mL~10mL。 5.11 无菌接种环。 6 试剂或材料 6.1要求 测试中培养基和试剂应按制造商的说明书配制，配制后，放人高压蒸汽灭菌锅中，在121℃条件下 灭菌20min后待用。如不立即使用，应置于无菌冷藏箱中，在5℃～10℃条件下保藏。所有培养基和 试剂存放时间不应超过30d。 6.2 主要试剂 6.2.1 无菌水：符合GB/T6682中规定的二级水，使用前灭菌。 6.2.2 氢氧化钠（NaOH)：分析纯。 6.2.3 盐酸(HCI)：分析纯。 6.2.4 氯化钠（NaCI)：分析纯 6.2.5 磷酸二氢钾（KH2PO4）：分析纯 6.2.6 葡萄糖：分析纯。 6.2.7 牛肉膏：生化试剂。 6.2.8 蛋白陈：生化试剂。 6.2.9 琼脂粉：生化试剂。 6.2.10 酵母膏：生化试剂。 6.2.11 胰蛋白陈：生化试剂。 2 GB/T37206—2018 6.3培养基和试剂的制备 6.3.11/500营养肉汤 称取0.3g牛肉膏、1.0g蛋白陈、0.5g氯化钠于烧杯中，加人100mL无菌水，加热煮沸溶解并混合 均匀后，取2mL用无菌水稀释至1000mL，用0.1mol/L的NaOH溶液和0.1mol/L的HCl溶液调 节pH值至7.0±0.2。 6.3.2营养琼脂 称取3.0g牛肉膏、10.0g蛋白陈、5.0g氯化钠、15.0g琼脂粉于烧杯中，加入1000mL无菌水，加 热煮沸溶解并混合均匀后，用0.1mol/L的NaOH溶液和0.1mol/L的HCl溶液调节pH值至7.0士 0.2。 6.3.3平板计数琼脂 称取2.5g酵母膏、5.0g胰蛋白陈、1.0g葡萄糖、15.0g琼脂粉于烧杯中，加人1000mL无菌水， 加热煮沸溶解并混合均匀后，用0.1mol/L的NaOH溶液和0.1mol/L的HCl溶液调节pH值至7.0土 0.2。 6.3.4斜面培养基 取6mL10mL经过高压蒸汽灭菌未凝固的营养琼脂加入到倾角约15°的试管中，冷却凝固。 6.3.5磷酸盐缓冲液 称取3.4g磷酸二氢钾溶解于50mL无菌水中，用浓度为1mol/L的NaOH溶液调节pH值至 7.0士0.2，转移到100mL容量瓶中加无菌水定容，然后取1.25mL稀释至1000mL。 6.4菌种 测试所用的菌种或菌株应来源于国家级菌种保藏管理中心。根据需要可选用其他菌种或菌株作为 测试用菌，但应在检测报告中注明并说明理由。推荐用测试菌种如下： 一金黄色葡萄球菌（CGMCC1.2910或ATCC6538P）； —大肠杆菌（CGMCC1.2463或ATCC8739）。 7测试方法 7.1样品处理 在无菌环境下对膜试样进行处理，操作步骤如下： 将待测有机平板膜制成直径为（20士1)mm的圆形，中空纤维膜剪成（20土1)mm的试样； a） b）用无菌水清洗干净，浸泡24h，多次漂洗； c） 对膜试样进行灭菌处理，风干24h； d）中空纤维膜试样整齐紧密地排成（20士1)mm×（20士1)mm的正方形，固定。准备3个平行 试样。 7.2测试用菌悬液的制备 7.2.1菌种保藏 将菌种接种于斜面培养基（6.3.4）上，在5℃10℃下保藏，每月转种1次。不得使用转种超过5次或 3