ICS 71.100.70 Y 42 中华人民共和国国家标准 GB/T 35948—2018 化妆品中7种4-羟基苯甲酸酯的测定 高效液相色谱法 Determination of seven parabens in cosmeticsHigh performance liquid chromatography 2018-09-01实施 2018-02-06发布 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布 中国国家标准化管理委员会 GB/T35948—2018 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准由中国轻工业联合会提出。 本标准由全国香料香精化妆品标准化技术委员会（SAC/TC257）归口。 本标准起草单位：广州质量监督检测研究院、苏州世谱检测技术有限公司、江苏省产品质量监督检 验研究院 本标准主要起草人：吴楚森、黄金凤、王强、刘冬虹、刘香梅、寻知庆、洗燕萍、贾芳、王小丹、黄金花 卢剑、车文军、郭新东、侯向昶、吴玉銮。 1 GB/T35948—2018 引言 本标准中的被测物质4-羟基苯甲酸异丙酯、4-羟基苯甲酸异丁酯、4-羟基苯甲酸苯酯、4-羟基苯甲 酸苄酯和4-羟基苯甲酸戊酯是我国《化妆品安全技术规范（2015年版）》规定的禁用物质。 禁用物质是指不能作为化妆品生产原料即组分添加到化妆品中的物质。《化妆品安全技术规范 （2015年版）》规定：若技术上无法避免禁用物质作为杂质带人化妆品时，应进行安全性风险评估，确保 在正常、合理及可预见的使用条件下不得对人体健康产生危害， 目前我国尚未规定4-羟基苯甲酸异丙酯、4-羟基苯甲酸异丁酯、4-羟基苯甲酸苯酯、4-羟基苯甲酸 芊酯和4-羟基苯甲酸戊酯的限量值，本标准的制定，仅对化妆品中测定这些物质提供检测方法。 Ⅱ GB/T35948—2018 化妆品中7种4-羟基苯甲酸酯的测定 高效液相色谱法 1范围 本标准规定了化妆品中4-羟基苯甲酸丙酯、4-羟基苯甲酸异丙酯、4-羟基苯甲酸丁酯、4-羟基苯甲 酸异丁酯、4-羟基苯甲酸苯酯、4-羟基苯甲酸苄酯和4-羟基苯甲酸戊酯等7种4-羟基苯甲酸酯的高效液 相色谱测定方法的试剂和材料、仪器设备、分析步骤、结果计算、回收率和精密度、允许差等内容 本标准适用于膏霜类、乳液类、啫喱类、水类、粉类、蜡基类化妆品中4-羟基苯甲酸丙酯、4-羟基苯甲 甲酸戊酯等7种4-羟基苯甲酸酯的测定 本标准的方法检出限：7种4-羟基苯甲酸酯的方法检出限均为2mg/kg。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3原理 膏霜类、乳液类、啫喱类和水类化妆品试样用95%乙醇提取：粉类化妆品试样用乙睛提取；蜡基类 化妆品试样经环已烷分散后，再用乙睛提取；提取液经离心、过滤，用高效液相色谱法测定。根据保留时 间和光谱图定性，外标法定量。 4试剂和材料 除非另有说明，所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。 4.1 甲醇：色谱纯。 4.2乙腈：色谱纯。 4.39 95%乙醇。 4.4环已烷：色谱纯。 4.57种4-羟基苯甲酸酯标准样品/物质：纯度均不小于97%。7种4-羟基苯甲酸酯标准品中文名称、 英文名称，CAS登录号和分子式参见附录A。 4.64-羟基苯甲酸酯标准储备溶液（各为1000mg/L）：准确称取各种4-羟基苯甲酸酯标准品（4.5） 100mg，分别置于100ml棕色容量瓶中，用甲醇（4.1）定容，于4℃避光保存 各10.0mL，于100mL棕色容量瓶中，用甲醇（4.1）定容，于4℃避光保存。 4.8滤膜：孔径为0.22μm的有机过滤膜。 1 GB/T35948—2018 5仪器设备 5.1高效液相色谱仪：配有二极管阵列检测器 5.2分析天平：感量0.0001g。 5.3漩涡振荡器。 5.4超声波清洗仪。 5.5高速离心机：转速不小于10000r/min。 6分析步骤 6.1试样处理 6.1.1膏霜类、乳液类、啫喱类和水类试样 称取0.5g样品（精确至0.001g）于10mL具塞刻度离心管中，加人8mL95%乙醇（4.3），于漩涡 振荡器（5.3）上振荡混匀后，超声提取15min，冷却至室温，用95%乙醇定容至10mL。取2mL溶液 于离心管中，10000r/min离心2min，经滤膜（4.8)过滤后测定。 6.1.2粉类试样 称取0.5g样品（精确至0.001g）于10mL具塞刻度离心管中，加入4mL乙睛（4.2），于漩涡振荡 中，残渣中加入4mL乙睛（4.2）重复提取1次，合并上清液，用乙睛（4.2）定容至10mL。取2mL溶液 于离心管中，10000r/min离心2min，经滤膜（4.8)过滤后测定。 6.1.3蜡基类试样 称取0.5g（精确至0.001g）样品，于10mL具塞刻度离心管中，加入2mL环已烷（4.4），于漩涡振 荡器上振荡混匀后，加人4mL乙腈（4.2）于漩涡振荡器上振荡1min，超声提取15min，以2000r/min 离心2min，转移全部上清液于10mL具塞比色管中，残渣中加人4mL乙睛（4.2）重复提取1次，合并 上清液，用乙睛（4.2）定容至10mL。取2ml溶液于离心管中，10000r/min离心2min，经滤膜（4.8） 过滤后测定。 6.2测定 6.2.1高效液相色谱参考工作条件 高效液相色谱参考工作条件如下： a) 色谱柱：核壳型C18，2.7um，100mm×4.6mm；或相当者； b) 流动相：甲醇和水，高效液相色谱梯度洗脱条件见表1； c) 流速：1.2mL/min; 柱温：30℃； e) 波长：252nm； f) 进样量：5μL。 2 GB/T35948—2018 表1高效液相色谱梯度洗脱条件 时间/min 甲醇/% 水/% 0.0 40 60 23 55 45 28 70 30 29 96 5 31 95 5 32 40 60 6.2.2 标准工作曲线绘制 用乙逐级稀释4-羟基苯甲酸酯混合标准储备溶液（4.7），得到0.10mg/L、0.50mg/L、1.0mg/L、 5.0mg/L、10mg/L、50mg/L混合标准工作溶液，按色谱条件（6.2.1)进行测定，以峰面积为纵坐标，浓 度为横坐标作图，绘制标准工作曲线。 6.2.3试样测定 按色谱条件测定试样溶液（6.1），以保留时间以及光谱图定性：外标法定量。试样溶液中被测物的 响应值均应在标准曲线的线性范围之内，超出线性范围则应稀释后再进行测定。 7种4-羟基苯甲酸酯标准物质溶液的液相色谱图参见附录B中图B.1,7种4-羟基苯甲酸酯标准物 质溶液的光谱图参见图B.2~图B.8。 6.3空白试验 除不称取试样外，均按6.1和6.2进行。 结果计算 试样中4-羟基苯甲酸酯的含量按下式计算： (ci -Co) X V X, = Xf m 式中: Xi 试样中被测组分的含量，单位为毫克每千克（mg/kg）； 从标准曲线得到的试样溶液中被测组分的质量浓度，单位为毫克每升（mg/L）； Ci 从标准曲线得到的空白样品中被测组分的质量浓度，单位为毫克每升（mg/L）； 02 V 试样溶液定容体积，单位为毫升（mL）； m 试样质量，单位为克（g）； 稀释倍数。 f 结果保留两位有效数字。 回收率和精密度 8 在添加浓度为6mg/kg~60mg/kg范围内，回收率在85%~110%之间，相对标准偏差小于10%。 9允许差 在重复条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。 3 5 GB/T35948—2018 附录A （资料性附录） 4-羟基苯甲酸酯标准物质的中文名称、英文名称、CAS号、分子式、相对分子质量及结构式 4-羟基苯甲酸酯标准物质的中文名称、英文名称、CAS号、分子式、相对分子质量及结构式参见 表A.1。 表A.1 4-羟基苯甲酸酯标准物质的中文名称、英文名称、CAS号、分子式、相对分子质量及结构式 相对分子 序号 中文名称 英文名称 CAS号 分子式 结构式 质量 HO. 4-羟基苯甲酸丙酯 94-13-3 CloHiz O. propylparaben 180.2 2 4-羟基苯甲酸异丙酯 isopropylparaben 4191-73-5 CloHizO3 180.2 H0) 4-羟基苯甲酸丁酯 94-26-8 CHHuOs 194.23 3 butylparaben 4-羟基苯甲酸异丁酯 isobutylparaben 4247-02-3 CnHiuO3 194.23 1O 4-羟基苯甲酸苯酯 phenylparaben 17696-62-7Cl:HloO3 214.22 OH 4-羟基苯甲酸苄酯 94-18-8 Cl. H12 O, 228.24 benzylparaben OH 4-羟基苯甲酸戊酯 7 pentylparaben 6521-29-5 C12H16O3 208.25