ICS 79.010 B 60 中华人民共和国国家标准 GB/T35809—2018 林业生物质原料分析方法 蛋白质含量测定 Method for analysis of forestry biomass- Determination of protein content 2018-09-01实施 2018-02-06发布 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布 中国国家标准化管理委员会 GB/T35809—2018 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准由国家林业局提出。 本标准由全国林业生物质材料标准化技术委员会（SAC/TC416）归口。 本标准起草单位：北京林业大学、济南海能仪器股份有限公司、廊坊华日家具股份有限公司、山东理 工大学、山东绿森塑木复合材料有限公司、浙江省林业科学院、厦门标普标准化服务有限公司、中国林业 科学院木材工业研究所 本标准主要起草人：任学勇、常建民、陈凤义、贺亮、王志刚、刘丰祥、刘毅、张扬、张柏林、赵宏飞 易维明、蔡红珍、郭京雷、许金飞、范东斌。 1 GB/T358092018 林业生物质原料分析方法 蛋白质含量测定 1范围 本标准规定了测定林业生物质原料中蛋白质含量的方法、试剂与材料、仪器与设备、分析步骤以及 结果表述等。 本标准适用于木材、竹材、藤材、树皮、树叶、果壳等林业生物质原料。 种林业生物质原料；后者是一种快速测定蛋白质含量的高效方法，在批量快速检测林业生物质原料时推 荐使用。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T30366—2013生物质术语 3术语和定义 GB/T30366一2013界定的以及下列术语和定义适用于本文件。 3.1 林业生物质 forestrybiomass 林业生产和加工过程中产生的生物质，主要包括林产品（如木材、竹材、藤材等）、林业剩余物（如枝 丫、锯末、木屑、梢头、板皮和截头、果壳和果核等采伐剩余物和加工剩余物、造纸废弃物以及废弃木材）、 能源林等。 [GB/T30366—2013，定义2.1.3] 4凯氏定氮法 4.1原理 林业生物质原料中的蛋白质在催化加热条件下被分解，产生的氨气与硫酸结合生成硫酸铵，碱化蒸 馏使氨游离，用硼酸吸收后以硫酸或盐酸标准滴定溶液滴定，根据酸的消耗量确定氮含量后乘以氮换算 为蛋白质的系数，即可得到原料中蛋白质的含量。 4.2试剂与材料 本标准方法中所用试剂均为分析纯（另有规定的除外），水为蒸馏水或者去离子水 4.2.1硫酸铜（CuSO·5H,O)。 4.2.2硫酸钾（K,SO）。 4.2.3硫酸（H,SO)：密度为1.84g/L。 1 GB/T35809—2018 4.2.4 硼酸（H,BO,）。 4.2.5 甲基红指示剂（CisHisN.O,）。 4.2.6 溴甲酚绿指示剂(C21H4BrO,S)。 4.2.7 亚甲基蓝指示剂（ClHisCINS·3H,O）。 4.2.8 氢氧化钠（NaOH)。 4.2.9 95%乙醇(CzH,OH)。 4.2.10 硼酸溶液（20g/L）：称取20g硼酸，加水溶解后并稀释至1000mL。 4.2.11 氢氧化钠溶液（400g/L）：称取40g氢氧化钠加水溶解后，放冷，并稀释至100mL。 4.2.12 硫酸标准滴定溶液（0.0500mol/L）或盐酸标准滴定溶液（0.0500mol/L）。 4.2.13 甲基红乙醇溶液（1g/L）：称取0.1g甲基红，溶于95%乙醇，用95%乙醇稀释至100mL。 4.2.14 4.2.15 混合指示液：1份甲基红乙醇溶液（4.2.13）与5份溴甲酚绿乙醇溶液（4.2.14)临用时混合。 4.3 仪器与设备 4.3.1 天平：测量精度为0.0001g。 4.3.2 定氮蒸馏装置：如图1所示。 4.3.3 自动凯氏定氮仪。 说明： 1——电炉； 小玻杯及棒状胶塞； 橡皮管及螺旋夹； 2— 一水蒸气发生器（2L烧瓶）； 5- 反应室； 8- 一冷凝管； 螺旋夹； 6 反应室外层； 9- 蒸馏液接受瓶。 图1定氮蒸馏装置图 4.4分析步骤 4.4.1手动凯氏定氮法 4.4.1.1试样处理：首先将生物质材料粉碎至40目以上的颗粒，干燥至水分绝干状态。称取充分混匀 的固体试样1g2g，精确至0.0001g，移入干燥的250mL定氮瓶（硝化瓶）中，加入0.2g硫酸铜 （4.2.1）、6g硫酸钾（4.2.2）及20mL硫酸（4.2.3），轻摇后于瓶口放一小漏斗，将瓶以45°角斜支于有小 2