ICS 65.020.01 CCS B 04 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T3858—2021 番茄抗匍柄霉叶斑病鉴定 技术规程 Technical code of practice for identification of tomato to stemphyliumleaf spot 行业标准信息服务平台 2021-05-07发布 2021-11-01实施 中华人民共和国农业农村部发布 NY/T3858—2021 全国农前食品标准 公共服务平台 本文件按照GB/T1.1一2020《标准化工作导则 起草规则》的规定 起草。 本文件由农业农村部种植业管理司提出并归口。 本文件起草单位：中国农业科学院蔬菜花卉研究所、宁夏大学、浙江省农业科学院植物保护与微生物 研究所。 本文件主要起草人：谢学文、李宝聚、石延霞、柴阿丽、张雪艳、武军。 行业标准信息服务平台 I NY/T3858—2021 番茄抗匍柄霉叶斑病鉴定技术规程 1范围 本文件规定了番茄匍柄霉叶斑病抗病性鉴定术语和定义、接种体制备、抗病性鉴定、病情调查、抗病性 鉴定记录表格。 本文件适用于各种类型番茄品种及资 源对葡霉叶斑病 的室内抗性鉴定。 2规范性引用文件 下列文件中的内容通 其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适 用 包括 有的修改单）适用于本 文件。 GB/T17980 和晚疫病 NY/T 1958 晚 交病鉴定技术规程 NY/T195 病鉴定技术规程 3术语和定 IRA 下列术语 3.1 番茄匍柄霉 叶斑病 temphyliumleaf spot tomat 起 由茄匍柄 Semp 的叶斑病。 3. 2 抗病性 stanc 能够 植物体所具 原体致病作 用的可 遗传的生 3. 3 R 抗病性鉴定 istance 通过适宜技术 江鉴人植 染 勺抵抗水 3. 4 抗性评价resistanceeyaluation 根据采用的技术标准判别植 物对特定病反应程度 抗水平的 3. 5 急服务平 致病性pathogenicity 病原物所具有的破坏寄主和引起病变的能力。 3. 6 人工接种artificiafinoculation 3.7 病情级别diseaseratingscale 植物个体或群体发病程度的数字化描述。 3.8 接种体inoculum 用于接种以引起病害的病原体或病原体的一部分。 NY/T 3858—2021 3.9 接种悬浮液inoculumsuspension 用于接种的含有定量接种体的液体 3. 10 病情指数diseaseindex(DI) 全面评价发病率和严重程度的综合指标数值。 4接种体制备 4.1接种体分离 采用常规组织分离法，从番茄植株发病组织病健交界处分离病原物 4.2接种体鉴定 菌饼法诱导产孢鉴定：选择感病番茄品种，匍柄霉菌在马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PotatoDextrose Agar，简称PDA)上培养3d后，用5mm打孔器打取菌饼，将带有菌丝面贴到番茄叶片上，接种后置于 25℃～30℃条件下保湿培养，3d后菌饼背面产孢，可参考附录A进行鉴定。 4.3接种体保存 4.3.1短期保存方法 将单孢分离到的匍柄霉菌株接种在PDA试管斜面内，在26℃～28℃下培养，10d后置4℃冰箱内 保存，保存期1个月～2个月。 4.3.2长期保存方法 采用液体石蜡油低温保存法，即在斜面菌种上加一层灭菌的优质液体石蜡（高出斜面顶部1cm），液 体石蜡在使用前需要经过121℃高压蒸汽灭菌20min，置一4℃～4℃下保存2年。 4.4接种体繁殖与悬浮液制备 将供试菌株从试管中转人PDA平板，25℃黑暗条件下活化两次后，转接到PDA平板培养5d～7d， 挑取菌丝块转接至PD培养液中，在28℃,120r/min的恒温摇床上震荡培养7d。将在PD液体培养基 中培养好的菌丝球用双层纱布过滤，然后用组织捣碎机将菌丝打碎。再将打碎后的菌丝用离心机以 4000r/min的速度离心10min，弃上清液，取沉淀物加入适量的含1%吐温-40的蒸馏水稀释，用分光光 度计（波长600nm）检测，菌丝菌悬液的浓度稀释到吸光度值1.55~1.65。 5鉴定条件和试验设计 5.1鉴定环境 人工接种鉴定室应温度、湿度及光照条件可控，使植物（番茄）人工接种后具备良好的发病环境。 5.2鉴定设计 鉴定材料随机排列或顺序排列，每份鉴定材料重复至少3次，每一重复10株苗。 5.3鉴定对照材料 选择1个感病对照和1个抗病对照，如果生产中无抗性品种，抗性对照可不选。感病对照要求高度感 病，选择标准为规定接种量及适宜环境条件下病情指数达到高感程度，且感病性稳定；抗病对照品种选用 在规定接种量及适宜环境条件下病情指数低于10，且抗病性稳定。 6接种 6.1鉴定材料育苗 1mm~3mm时播种于50孔育苗钵中，覆土厚度1cm~2cm。育苗基质为草炭、蛭石和珍珠岩（3：1： 1），经高温蒸汽灭菌（121℃，30min）。在日光温室内育苗，室内温度为20℃～25℃，每钵一苗，所有幼苗 应生长健壮、一致。 2