ICS 67.080.20 CCS B 31 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T 3871—2021 大蒜中蒜氨酸的测定 高效液相色谱法 Determination of alliin in garlic- High performance liquid chromatography 行业标准信息服务平台 2021-11-01实施 2021-05-07发布 中华人民共和国农业农村部发布 NY/T3871—2021 本文件按照GB/T1.1一2020标准化工作导则 起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由农业农村部种植业管理司提出并归口。 验测试中心（郑州）。 大杰、张车锋、魏振亚、钟红舰、裴金花。 GRI 服务平台 NY/T 3871—2021 大蒜中蒜氨酸的测定 高效液相色谱法 1范围 本文件规定了大蒜中蒜氨酸含量的高效液相色谱测定方法。 本文件适用于大蒜中蒜氨酸含量的测定。 本文件的检出限为0.012g/kg，定量限为0.040g/kg 2规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3原理 大蒜中蒜氨酸在紫外光区214nm波长处有最大吸收，经灭酶、磷酸溶液提取、HPLC分离后，紫外检 测器测定，外标法定量。 4试剂或材料 除非另有规定，本文件所用试剂均为分析纯。水为GB/T6682规定的一级水。 4.1试剂 4.1.1甲醇(CH;OH):色谱纯。 4.1.2磷酸（HPO,）：优级纯。 4.2溶液配制 磷酸溶液（0.01%，体积分数）：准确吸取0.100mL磷酸（4.1.2)于预先加入一定量水的1000mL容 量瓶，稀释至刻度，经0.22um水相滤膜过滤。 4.3标准品 蒜氨酸标准品（Alliin，C.HNOS.CAS号：556-27-4）：含量≥98%。 4.4标准溶液配制 蒜氨酸标准储备液（500mg/L）：称取蒜氨酸标准品（4.3）5mg（精确至0.01mg）于10mL容量瓶中， 加水适量使溶解并稀释至刻度，摇匀，4℃保存，有效期为1个月 息服务平台 5仪器设备 5.1高效液相色谱仪：配有紫外或二极管阵列检测器。 5.2分析天平：感量0.01g、0.001g和0.01mg。 5.3组织捣碎机。 5.4微波炉：功率900W。 5.5超声波清洗器。 5.6离心机：转速10000r/min 6样品 取有代表性的大蒜样品可食部分，混匀缩分至约50g（精确至0.01g），置于250ml烧杯中，微波功 NY/T3871—2021 率900W高火灭酶1min，冷却至室温，用水补充微波灭酶过程中损失的质量，再按缩分后样品质量（约50 g)比1：1加水，用组织捣碎机粉碎制成蒜泥，作为试样。试样置于密闭容器内，一20℃冷冻保存。 7试验步骤 7.1试样处理 平行做两份试验。称取试样2g（精确至0.001g）于100mL三角瓶中，加入60mL磷酸溶液（4.2）， 手动振荡1min后超声提取15min，静置至恢复室温，用磷酸溶液（4.2）转移至100mL容量瓶中并定容， 取10mL溶液于10mL离心管中，10000r/min离心15min，上清液过0.22μm水相滤膜，待测。 7.2色谱参考条件 耐水液相色谱柱：Clg，250mm×4.6m，5um，或相当者 流动相：磷酸溶液（4.2) 流速：0.8mL/min； PUBLI 进样量：10L； 柱温：30℃： 检测波长：21 nm 7.3标准曲线的制作 准确吸取 酸标准储备液 用水配制成浓度丝 20mg/L50mg/L、 列标准浴液共高效液相色谱仪测 100mg/L.2 7.4测定 取待测液（ D利相应浓度的标准溶液（7 谱客考条件测 点校准或多点校准，以 以色谱 保留时间定性 峰面积外标法定量。 待测液和标维工作浴液中蒜氨酸 值应在仪器检测的线 性范围内。 条件不，标氨酸准溶液的色谱图见附录人 8 试验数据处 理 大蒜中 酸的测 (1) 式中： 分数的数值单位克年于克 待测液中 棕氨酸的 衣度的数值 p 华单位为享克每升 V 定容体积的 数值，单位 雪坊 mL 试样质量的数值，单位 m 1加水的换 2 样品按质量比 测定结果用平行测定的算术平 均值表示，计算结果保留有效数字。 9精密度 9.1重复性 9.2再现性 在再现性条件下获得的2次独立测定结果的绝对差值不大于这2个测定值的算术平均值的15%。 2