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ICS 67.120.10 CCS X 22 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T 3876—2021 猪肉中卡拉胶的检测 液相色谱一串联质谱法 Determination of carrageenan in pork-Liquid chromatography-tandemmass spectrometrymethod 行业标准信息服务平台 2021-05-07发布 2021-11-01实施 中华人民共和国农业农村部 发布 NY/T3876—2021 通 本文件按照GB/T1.12020《标准化工作尊则 起草。 本文件由农业农村部畜牧兽医局提出。 本文件由全国屠宰加工标准化技术委员会(SAC/TC516)归口。 本文件起草单位:中国动物卫生与流行病学中心、必维信诺(山东)检测技术有限公司。 本文件主要起草人:王君玮、王琳、邓书、丛睿、赵格、邵绪卿、江翠芸、高玉斌、宋时萍。 行业标准信息服务平台 NY/T3876—2021 猪肉中卡拉胶的检测 液相色谱-串联质谱法 1 范围 本文件规定了猪肉中卡拉胶检测的制样和液相色谱-串联质谱测定方法。 本文件适用于鲜、冻猪肉中卡拉胶的测定。 2规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性可用而构成本文件必不可少的条款。 其中,注日期的引用文件, 仅该日期对应的版本适用于本文件,不注口期的号用文解.其最新版本(包括所有的修改)适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验 3术语和定义 RESE 和定义 4原理 中联 川液相色 质谱仪检测寡糖含 JRA 量,外标法定量 5试剂和材料 除另有说明, 规定的 级水 5.1试剂 5.1.1乙腈(CHCN色) 5.1.2乙酸铵(CH 5.1.3浓盐酸(H 5.1.4乙酸锌[(C 5.1.5亚铁氰化钾LK 5.2标准品 卡拉胶(CAS号:9000-07)纯度 5.3材料 5.3.1滤膜:水相,0.22μm。 5.3.2滤膜:有机相,0.22μm。 5.4溶液配制 5.4.10.005mol/L乙酸铵水溶液:称取乙酸铵0.39g,用水溶解并定容至1000ml,过0.22μm水相 滤膜。 5.4.2 190g/L乙酸锌溶液:称取乙酸锌19g,用水溶解并定容至100mL% 5.4.3 150g/L亚铁氰化钾溶液:称取亚铁氰化铆15g,用水溶解并定容至100mL。 5.4.4标准储备液(1000mg/L):称取卡拉胶对照品0.0100g,加人适量水,60℃恒温水浴溶解。冷却 至室温后,转移至10mL容量瓶用水定容至刻度,即为1000mg/L储备液。临用现配。 6仪器设备 6.1液相色谱-串联质谱仪:配电喷雾离子(ESI)源。 NY/T3876—2021 6.2分析天平:感量为0.0001g和感量为0.01g。 6.3 3低温高速离心机:转速≥8000r/min。 6.4涡旋混合器。 6.5组织捣碎机。 6.6匀浆机。 6.7 恒温振荡水浴锅。 7 试样制备与保存 7.1试样的制备 取适量新鲜或解冻的空白或供试组织,用组织捣碎机绞碎并均质: 取均质的供试样品,作为供试试样; 取均质的空白样品,作为空白试样。 7.2试样的保存 在一20℃以下保存。 8试样处理 称取5g(精确至0.01g)试样于50mL离心管中。加人20mL水,于4℃10000r/min匀浆1min。 加入2mL浓盐酸,涡旋30s,置于80℃恒温振荡水浴锅振荡2h,取出后冷却至室温。依次加入1.5ml 190g/L的乙酸锌溶液、1.5mL150g/L的亚铁氰化钾溶液,涡旋1min沉淀蛋白质。于4℃8000r/ min离心5min,取上清液转移至50ml容量瓶中,用乙睛定容,过0.22μm有机相滤膜,供液相色谱-串 联质谱仪测定。 9测定 9.1液相色谱参考条件 9.1.1色谱柱:BEHAmide柱(1.7um,2.1mmX100mm),或相当者。 9.1.2进样量:1uL。 9.1.3柱温:30℃。 9.1.4 流速:0.4mL/min。 9.1.5 流动相:A相:0.005mol/L乙酸铵水溶液:B相:乙。梯度洗脱程序见表1。 表1梯度洗脱程序 A相 时间 B相 min % % 0.00 50 50 50 2.00 50 2.01 25 275 4.00 25 75 50 50% 4.01 6.00 50 50 9.2质谱参考条件 9.2.1离子源:电喷雾电离源(ESI)。 9.2.2参考质谱条件如下: a) 检测方式:多反应监测(MRM); 2
NY-T 3876-2021 猪肉中卡拉胶的检测 液相色谱-串联质谱法
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