ICS 65.020.01 CCS B 04 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T3951—2021 马铃薯中龙葵素含量的测定 液相色谱一串联质谱法 Determination of solanine in potatoes by liquid chromatography- 行业标准信息服务平台 tandem mass spectrometry 2021-11-09发布 2022-05-01实施 中华人民共和国农业农村部 发布 NY/T3951—2021 信 公共服务 本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由农业农村部农产品质量安全监管司提出。 本文件由农业农村部农产品营养标准专家委员会归口。 本文件起草单位：农业农村部食物与营养发展研究所、北京市营养源研究所、内蒙古蒙牛乳业（集团） 股份有限公司、中国合格评定国家认可委员会、国家食品行业生产力促进中心、北京市理化分析测试中心、 中国农业科学院蔬菜花卉研究所、国家蔬菜工程技术研究中心、中检集团中原农食产品检测（河南）有限 公司。 本文件主要起草人：朱大洲、崔亚娟、梁敏慧、孔凡华、白沙沙、孙君茂、屠振华、熊兴耀、郭燕枝、仇菊、 杨春雪、罗欣、李东、杨志刚、马文丽、王佳、李宏、马杰、贾丽、王万兴、刘光敏、宗珊盈。 行业标准信息服务平台 1 NY/T 3951—2021 马铃薯中龙葵素含量的测定 液相色谱-串联质谱法 1范围 本文件规定了马铃薯中龙葵素的液相色谱串联质谱测定方法。 本文件适用于马铃薯中α茄碱和卡茄碱含量的测定。 2规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。 其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于 本文作： 文件。 GB/T6682 分析实验室用 3术语和定义 本文件没有需要界 和定 S 4原理 试样中α-苏碱和 %1 外标法定量。 5 试剂和材料 5.1试剂 水为GB/T D 5.1. 1 甲酸(H 色 5. 1. 2 甲醇CH 5.1.3乙腈(CH） 5.1.4乙酸铵(CH 5.2试剂配制 5.2.11%甲酸水溶液：准确吸取甲酸 1.00 用水定容至刻度，混匀。 5.2.2 21%甲酸水-甲醇溶液（50 +50）：世取 水溶液（52.1）50 加人甲醇（5.1.2）50ml 混匀。 5.2.30.1%甲酸-10mmol/L乙酸铵溶液：称取乙酸铵(5. 4)0.708g于1000mL容量瓶中，加人甲 酸（5.1.1)1.00mL，加水定容至刻度，混匀。 5.3标准品 5.3.1α茄碱标准品（C45H3NO15，CAS号：20562-02-1)：纯度大于98%，或经国家认证并授予标准物质 证书的标准物质。 5.3.2α卡苏碱标准品（C4Hz3NO14，CAS号：20562-03-2）：纯度大于98%，或经国家认证并授予标准物 质证书的标准物质。 5.4标准溶液配制 5.4.1α茄碱和α-卡茄碱标准储备液：分别称取标准品1.00mg（精确至0.01mg）.用甲醇（5.1.2)溶解 并定容至10mL，配制成浓度分别为100μg/ml.的标准储备液，转移至棕色试剂瓶中，于一18℃保存，有 效期3个月。 1 NY/T3951—2021 5.4.2混合标准中间液：分别准确移取标准储备液（5.4.1）1.00mL于100mL容量瓶中，用甲醇 （5.1.2）稀释并定容至刻度，制成浓度分别为1.00μg/mL的混合标准中间液，现用现配。 1.00mL、1.50ml、2.00mL溶液置于6个10mL棕色容量瓶中，用1%甲酸水-甲醇溶液（5.2.2)定容至 刻度，得到浓度为10.0ng/mL、20.0ng/mL、50.0ng/ml、100ng/ml、150ng/ml200ng/mL的混合标 准工作溶液，现用现配。 5.5材料 有机相滤膜：0.22μm。 6仪器与设备 6.1液相色谱-串联质谱仪：配有电喷雾离子源。 6.2分析天平：感量为0.01mg和0.1mg。 6.3组织捣碎机。 6.4涡旋振荡器。 6.5超声波清洗仪：40kHz,500W。 7试样制备 将样品经过缩分、粉碎均匀后，储存于样品瓶中，于一18℃冷冻存放。 8分析步骤 8.1提取 称取样品1g（精确至0.1mg）于50mL离心管中，加人1%甲酸水-甲醇溶液（5.2.2)30mlL，涡旋混 匀1min，超声30min，冷却后转移至50ml容量瓶中，用1%甲酸水-甲醇溶液（5.2.2）定容至刻度，混勾， 过0.22um滤膜后，上机测定。 8.2测定 8.2.1色谱参考条件 色谱柱：Cl：柱，柱长100mm，内径2.1mm，粒径1.7μm，或性能相当者； 柱温：35℃； 进样体积：10μL； c） 流速：0.3mL/min; 流动相A：0.1%甲酸-10mmol/L乙酸铵溶液（5.2.3)，流动相B:乙睛（5.1.3），梯度洗脱条件见 e) 表1。 表1流动相梯度洗脱条件 时间，min A.% B,% 0 95 5 0. 1 95 5 95 3 95 4 5 5 4. 5 95 6 95 8.2.2质谱参考条件 电离方式：电喷雾正离子模式； b) 扫描模式：多反应监测（MRM)模式； 毛细管电压：3kV； 2