ICS 67.080.10 CCSB 31 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T3943—2021 水果中葡萄糖、果糖、蔗糖和山梨醇 的测定 离子色谱法 Determination of glucose, fructose, sucrose and sorbitol in fruits by ion chromatography method 行业标准信息服务平台 2021-11-09发布 2022-05-01实施 中华人民共和国农业农村部发布 NY/T3943—2021 本文件按照GB/T1.1一2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》和GB/T 20001.4一2015《标准编制规则第4部分：试验方法标准》的规定起草 请注意本文件某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由农业农村部种植业管理司提出 本文件由全国果品标准化技术委员会（SAC/TC501）归口。 实验室、山东农业工程学院。 本文件主要起草人：聂继云、匡立学、李静、张建一、高贯威、李银萍、李海飞、秦旭。 行业标准信息服务平台 I NY/T3943—2021 水果中葡萄糖、果糖、蔗糖和山梨醇的测定 离子色谱法 1范围 本文件规定了水果中葡萄糖、果糖、熊糖和山梨醇测定的离子色谱法。 本文件适用于水果中葡萄糖、果糖、蔗糖和山梨醇的含量测定。 2规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本义件必不可少的条款。其中，注日期的引用文 文件。 RD GB/T6682 3术语和定义 RESE S 4原理 试样用甲醇 长取小柱 定： 保留时间定 性，峰面积外标法 5试剂或材料 除非另有说明 682规定的 CE 5.1甲醇(CH,O. 1.01 5.2氢氧化钠溶 laON 5.3200 mmol/L 瓦化钠泽 容至 00mL ml 5.4葡萄糖（CH12 66 证 书的标准物质。 5.5果糖(C.H12O。, 台 成经国家认证开授于标准物质 66 书的标准物质。 或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质。 5.6熊糖（CH2OC 5.7山梨醇（CHuO.CAs 或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质。 50-70 5.8标准储备液（1.0mg/ml） ：分别称取布吉 5）、熊糖（5. 、山梨醇（5.7)各50mg（精 确至0.1mg）于4个50mL容量瓶中，用水溶解并定容，配制成1.0mg/mL的标准储备液。4℃下保存， 有效期1个月。 5.9标准工作溶液：分别量取0.50mL、1.00mL、2.00mL、3.00mL、4.00mL、5.00mL葡萄糖、果糖、 燕糖标准储备液（5.8）和0.20mL、0.40ml、0.60mL、0.80mL、1.00mL1.20mL山梨醇标准储备液 （5.8）于6个100mL容量瓶中，用水稀释至刻度，配置成4种糖组分的混合标准济液，混合标准溶液中葡 萄糖、果糖、燕糖的浓度分别为5.0mg/L、10.0mg/L20.0mg/L、30.0mg/L、40.0mg/L、50.0mg/L， 山梨醇的浓度分别为2.0mg/L、4.0mg/L、6.0mg/L、8.0mg/L、10.0mg/L、12.0mg/L。 5.10固相苯取小柱：反相Cis固相萃取小柱，200mg/6mL.或性能相当者。 6仪器设备 6.1离子色谱仪：脉冲安培检测器，Au工作电极。 6.2电子天平：感量0.01g、0.1mg。 NY/T3943—2021 6.3冷冻研磨仪。 6.4超声波清洗机：频率不低于40kHz。 6.5离心机：转速不低于9.000r/min。 6.6固相苯取装置。 7试样的制备 取干净果实代表性的可食部分250g，适当切分，液氮冷冻，研磨成粉末，一18℃以下储存备用。 8分析步骤 8.1试样溶液的制备 称取5g（精确至0.01g）均匀试样至50mL离心管中，加人30mL甲醇（5.1)混匀，40kHz的频率下 室温超声提取20min，9000r/min离心15min，上清液转移至50mL容量瓶中，残渣再用10mL甲醇 （5.1)按上述步骤重复提取1次，合并2次提取液，用甲醇（5.1)定容至刻度，摇匀，得到样品提取液。吸取 1.00mL样品提取液于50mL容量瓶中，用水定容至刻度。依次用5mL甲醇（5.1）和5mL水预淋洗、 活化固相苯取小柱（5.10）。吸取5mL稀释后的样品提取液加人活化好的固相萃取小柱中过滤净化，弃 去2mL初始滤液，收集滤液供离子色谱分析测定。 8.2离子色谱参考条件 色谱柱：阴离子交换柱（PA10），250mm×4.0mm； b) 柱温：30℃； c) 流动相：A为水，B为200mmol/L氢氧化钠溶液（5.3）； d) 流速：1mL/min; e) 进样量：10μl； f) 工作电极：Au电极； g) 参比电极：Ag/AgCI参比电极； h) 检测池温度：30℃； 洗脱条件按表1设置。 表1洗脱条件 时间，min A,% B,% 0 76 24 15 76 24 15.5 0 100 18 0 100 19 76 24 27 76 24 8.3标准工作曲线绘制 按照8.2设定的色谱工作条件，待仪器稳定后，依次测定系列标准工作溶液（5.9）中葡萄糖、果糖、蔗 糖和山梨醇的色谱峰面积。以系列标准工作溶液（5.9)中葡萄糖、果糖、蔗糖和山梨醇的浓度为横坐标，以 相应峰面积为纵坐标，绘制葡萄糖、果糖、燕糖和山梨醇的浓度色谱峰面积标准曲线，标准品色谱图见附 录A。 8.4试样溶液的测定 当试样溶液注入离子色谱仪中，得到峰面积。根据标准曲线得到待测液中葡萄糖、果糖、燕糖和山梨 醇的浓度。若试样溶液中测定组分浓度超过标准曲线上限，应稀释至标准曲线浓度范围后再行测定。 8.5空白试验 除不加人试样外，采用完全相同的分析步骤进行测定。 2