ICS 11.080 C 50 GB 中华人民共和国国家标准 GB/T 33417—2016 过氧化氢气体灭菌生物指示物检验方法 Test method of biological indicator for hydrogen peroxide vapour sterilization processes 2016-12-30发布 2017-07-01实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布 中国国家标准化管理委员会 GB/T 33417—2016 前言 本标准按照GB/T1.12009给出的规则起草。 本标准由中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会提出并归口。 本标准起草单位：中国疾病预防控制中心环境与健康相关产品安全所、中国人民解放军疾病预防控 制所、中国医学科学院协和医院。 本标准主要起草人：张流波、张剑、姚楚水、张青、王立飞、张玮、王香、王洪敏、史绍毅、王妍彦、邱侠、 马玲、朱亭亭， GB/T33417—2016 过氧化氢气体灭菌生物指示物检验方法 1范围 本标准规定了过氧化氢气体灭菌生物指示物的检验方法。 本标准适用于过氧化氢气体灭菌生物指示物的检验。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB18281.1医疗保健产品灭菌生物指示物第1部分：通则 GB/T24628医疗保健产品灭菌生物与化学指示物测试设备 消毒技术规范（2002年版）卫生部 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 生物指示物 biologicalindicator;BI 对指定条件下的特定灭菌程序具有一定抗力，并装在内层包装中可供使用的染菌载体 3.2 过氧化氢气体灭菌 hydrogen peroxide vapour sterilization 以汽化的过氧化氢作为主要杀灭微生物因子的灭菌方式。 3.3 载体 carrier 试验微生物的支持物。 3.4 存活时间 survival time;ST 测定生物指示物抗力时，受试样本经杀菌因子作用后，全部有菌生长的最长作用时间。 3.5 杀灭时间 killing time;KT 测定生物指示物抗力时，受试样本经杀菌因子作用后，全部无菌生长的最短作用时间。 3.6 D值 Dvalue 杀灭微生物数量达到90%所需要的时间。 3.7 自含式生物指示物 self-contained biological indicator 含有微生物复苏生长所需培养基的生物指示物 1 GB/T33417—2016 3.8 生物指示物抗力测试仪biologicalindicatorevaluatorresistometer 产生限定条件下灭菌过程中物理变化规定组合，以测量抗力的专用设备。 4检验指标与方法 4.1抗力 4.1.1菌种 用于制作过氧化氢气体灭菌生物指示物的菌株为嗜热脂肪杆菌芽孢（Geobacillusstearothermophilus ATCC7953或SSIK31)或被证明具有本标准所要求的同等性能的微生物。 4.1.2菌量 回收菌量大于或等于1X10°CFU/片，对于成品的指示物，载体回收的菌量与说明书上的菌量误差 在一50%～十300%之间。测定菌量时，应最少测试4个样本，具体检测方法参见附录A。 4.1.3D值 测试时应使用生物指示物抗力测试仪，生物指示物抗力测试仪要求见GB/T24628。在使用浓度 为59%士2%过氧化氢，灭菌舱内作用浓度为2.3mg/L士0.4mg/L，作用温度50℃0.5℃的条件下， D值的要求为0.75s～8s。对于成品的生物指示物，测试的D值应在说明书上的D值土20%范围内。 应使用下列2种方法进行测试： 部分阴性法测试D值，参见附录B； ai b) 验证法测试D值，将a)测试出的D值和4.1.2的回收菌量的平均数带入式（1)和式（2)，计算 出ST值和KT值。参见附录C ST≥(logN。-2)X D 值 (1) KT≤（logN。+4)XD值 ......(2) 式中： N。—每批生物指示物的回收菌量的平均数。 4.2载体 按GB18281.1的要求进行灭菌过程兼容性的测试。 4.3 恢复培养基 4.3.1恢复培养基应满足下列要求： a）有使10CFU～100CFU的微生物恢复生长的能力； b）有使损伤的微生物恢复生长的能力，并且有中和残留的灭菌因子对微生物抑制生长的能力； c） 经过过氧化氢气体灭菌后不会产生抑制微生物生长的物质。 4.3.2恢复培养基按以下方法检验： 每个样本的恢复培养基中，接种10CFU～100CFU的嗜热脂肪杆菌芽孢（ATCC7953），同时设置 阴性对照和阳性对照，培养至规定时间后观察有无嗜热脂肪杆菌芽孢生长（一般观察培养基的颜色变 化）。如果恢复培养基有菌生长，并且阴性对照无菌生长和阳性对照有菌生长，判断恢复培养液合格。 2