ICS 65.020.01 B 16 GB 中华人民共和国国家标准 GB/T32766—2016 最大拟长针线虫检疫鉴定方法 Detection and identification of Paralongidorus maximus(Bitschli,1874) Siddiqi,1964 2016-06-14发布 2017-01-01实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布 中国国家标准化管理委员会 GB/T32766—2016 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准由全国植物检疫标准化技术委员会（SAC/TC271)提出并归口。 本标准起草单位：中国检验检疫科学院、深圳出人境检验检疫局、中国农业科学研究院植物保护研 究所、上海出人境检验检疫局、南通出人境检验检疫局、天津出人境检验检疫局 本标准主要起草人：葛建军、王旭、熊玉芬、李芳荣、彭德良、戚龙君、张明、龙海、王金成 GB/T32766—2016 最大拟长针线虫检疫鉴定方法 1范围 本标准规定了最大拟长针线虫的检疫鉴定方法。 本标准适用于观赏植物、蔬菜、果树等多种植物、土壤及栽培介质中最大拟长针线虫的检疫和鉴定。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T24831—2009香蕉穿孔线虫检疫鉴定方法 SN/T2122一2008进出境植物及植物产品检疫抽样 3最大拟长针线虫基本信息 学名：Paralongidorusmarimus(Butschli,1874)Siddiqi,1964。 异名:Dorylaimus marimus Butschli,1874;Dorylaimus(Longidorus）marimus(Butschli,1874) Micoletzky,1922;Longidorus ma.rimus(Butschli,1874)Thorne &Swanger,1936;Longidorus ma.ri musMeyl,1954；LongidorusmeyliSturhan，1963；最大异长针线虫。 分类地位：线虫门Nematoda，无侧尾腺纲Adenophorea，矛线目Dorylaimida，矛线亚目Dorylaimina，长 针总科Dorylaimoidea，长针科Longidoridae，长针亚科Longidorinae，拟长针属Paralongidorus。 4方法原理 最大拟长针线虫成虫的形态学特征、寄主范围和地理分布（参见附录A)作为主要的鉴定依据。 5器材和试剂 5.1器材 生物显微镜、体视显微镜（具透射光源）、加热板、水浴锅、离心机。自封袋、钟面皿或培养皿、载玻 片、盖玻片、网筛（20目、100目、500目）、烧杯（500mL、1000mL）、漏斗、漏斗架、乳胶管或硅胶管、止 水夹、小镊子、剪刀、挑针、浅盘、滤纸或卫生纸、酒精灯、干燥器和试管等。 5.2试剂 4%甲醛、指甲油、甘油、无水乙醇、冰醋酸、石蜡和蔗糖等。 6现场检疫 将其主要寄主植物（参见附录A)作为现场检疫最重要的对象。注意观察植株的生长状况、根部为 1 GB/T32766—2016 害状，以及根际是否带土壤或栽培介质。重点选择上述可疑植物材料及土壤或栽培介质取样。如无可 疑症状则按要求随机取样。 具体抽样方法详见SN/T2122一2008中5.5。 7实验室检测鉴定 7.1 线虫分离 植物栽培介质或少量的土壤样品，采用直接过筛法或悬浮过滤法分离线虫；大量的土壤样品，采用 蔗糖离心法分离线虫。 具体分离方法参见附录B。 SAG 7.2体视显微镜镜检 在体视显微镜下观察分离获得的线虫样品。最大拟长针线虫的虫体较大，呈长蠕虫形，行动较为缓 慢。挑取线虫若干条制成临时玻片或永久玻片在生物显微镜下观察线虫形态。 具体玻片标本制作方法参见GB/T24831一2009中附录C。 7.3 3生物显微镜镜检和测计 对照最大拟长针线虫雌、雄虫的主要鉴定特征进行重点观察、拍摄、测量和计算。在线虫样品数量 充足时，应观察雌、雄虫各20条以上。 8形态鉴定特征 8.1拟长针线虫属形态鉴定特征 8.1.1雌虫 线虫虫体大，头部连续，缢缩显著；侧器口横裂状，侧器囊漏斗状至倒马状；齿尖针细长，有时高度 硬化，基部平滑或呈叉状；齿托基部无凸缘，有时明显增厚；齿针导环为单环，位于齿尖针前半部；双生殖 腺，对伸回折，子宫无骨化结构；尾短，呈半球形或圆锥形。 8.1.2雄虫 双生殖腺，对伸；交合刺粗壮、有侧附导片；泄殖腔区有1对交配乳突，其前紧接着有1列腹中交配 乳突。 8.2最大拟长针线虫形态鉴定特征 8.2.1测计值 最大拟长针线虫的测计值见表1。 表1最大拟长针线虫测计值（Sturhan，1963） 测计项目 雌虫 雄虫 n 46~83 2 L/mm 9.84(7.60~12.35) 8.55.10.70 2