ICS 65.020.01 B 16 GB 中华人民共和国国家标准 GB/T33121—2016 玉米褐条霜霉病菌检疫鉴定方法 Detection and identification of Sclerophthora rayssiae Kenneth, Kaltin et Wahl var. zeae Payak et Renfro 2016-10-13发布 2017-05-01实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布 中国国家标准化管理委员会 GB/T 33121—2016 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准由全国植物检疫标准化技术委员会（SAC/TC271）提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国厦门出人境检验检疫局、中华人民共和国中山出入境检验检疫 局、中华人民共和国福清出人境检验检疫局、中国检验检疫科学研究院。 本标准主要起草人：王宏毅、陈定虎、黄智辉、林谷圆、郑万里、黄蓬英、方志鹏、林石明、严进 I GB/T33121—2016 玉米褐条霜霉病菌检疫鉴定方法 1范围 本标准规定了玉米褐条霜霉病菌（SclerophthorarayssiaeKenneth，KaltinetWahlvar.zeaePayak etRenfro)的形态学检疫鉴定方法，明确了样品现场采集、实验室鉴定、标本制作和样品保存等方法。 本标准适用于玉米（Zeamays）植株及其谷物中的玉米褐条霜霉病菌的检疫和鉴定。 规范性引用文件 2 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T18085—2000植物检疫小麦矮化腥黑穗病菌检疫鉴定方法 GB/T18086—2000植物检疫烟霜霉病菌检疫鉴定方法 SN/T 1157 进出境植物苗木检疫规程 SN/T 2122 进出境植物及植物产品检疫抽样方法 SN/T2504 进出口粮谷检验检疫操作规程 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 孢子囊 sporangium 孢囊梗顶端膨大，并在下方生出横隔与菌丝分开形成囊状结构的无性繁殖器官。 注1：成熟后易脱落，并在囊内形成游动孢子。 注2：孢子囊的英文复数形式为"sporangia”。 3.2 孢囊梗 sporangiophore 支持孢子囊的菌丝分枝。 3.3 藏卵器和雄器 oogonium&antheridium 生殖菌丝生出两个大小不同的异形配子囊，大的为雌配子囊，能在囊内形成一个雌配子（卵子），即 为藏卵器；小的能产生雄配子，即为雄器。 注1：玉米褐条霜霉病菌的藏卵器与雄器同体。 注2：藏卵器与雄器的英文复数形式分别为"oogonia"antheridia"。 3.4 卵孢子oospore 藏卵器中的卵子与雄器的雄配子相配合后形成。 病原菌基本信息 4 中文名：玉米褐条霜霉病菌，又称褐条指疫霉菌玉蜀泰变种。 GB/T33121—2016 英文名：Brownstripedownymildewofcorn，简称BSDM。 学名:Sclerophthora rayssiae Kenneth,Kaltin et Wahl var.zeae Payak et Renfro,1967。 分类地位：藻菌界Chromista，卵菌门Oomycota，卵菌纲Oomycetes，霜霉目Peronosporales，霜霉 科Peronosporaceae，指疫霉属SclerophthoraThirumalachar，Shaw&Narasimhan，1953，褐条指疫霉 菌Sclerophthora rayssiaeKenneth,Koltin etWahl,1964。 传播途径：该病菌可以由被病原菌污染过的种子，或带病植株，以及混杂于货物中的病残体作远距 离传播。 玉米褐条霜霉病菌的其他信息参见附录A。 5方法原理 本标准主要以玉米褐条霜霉病菌的为害症状，病原菌的孢囊梗、孢子囊和卵孢子形态特征为鉴定依 据。玉米褐条霜霉病菌的为害症状参见附录B和附录C，病原菌的孢子囊和卵孢子形态特征见附录D。 6仪器设备和试剂 6.1 仪器设备和器具 6.1.1仪器设备 件，或至少配带照相功能和镜台测微尺）、体视显微镜（总放大倍数不低于50倍）、超净工作台、振荡器、 高压灭菌锅。 6.1.2器具 医用解剖刀、解剖针、眼科手术剪刀、胶头滴管、微量可调加样器（2μuL～20uL）、枪头（2μL～ （直径为150mm~200mm）。 6.2试剂和材料 6.2.1试剂 无菌水、75%乙醇溶液、吐温20、10%氢氧化钠、席尔氏缓冲液（配制方法按GB/T18085一2000执 行）和0.05%苯胺蓝（棉蓝）乳酚油（配制方法按GB/T18086一2000执行）。 6.2.2材料 无菌滤纸、铝箔纸、Parafilm膜、载玻片和盖玻片。 7检疫和鉴定 7.1检疫 7.1.1现场检疫 7.1.1.1植株症状检查 现场对玉米植株的检疫，要在光线充足处，仔细检查植株叶片是否带有可疑症状，参见附录B和附 2SAC