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ICS 65.020.01 B 16 GB 中华人民共和国国家标准 GB/T 33122—2016 花园葱蜗牛检疫鉴定方法 Detection and identification of Cepaea hortensis (Muller, 1774) 2016-10-13发布 2017-05-01实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布 中国国家标准化管理委员会 GB/T33122—2016 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准由全国植物检疫标准化技术委员会(SAC/TC271)提出并归口。 本标准主要起草人:周卫川、王沛、李敏、杨海芳、沈建国、于文涛、钱周兴、虞赞、林阳武。 GB/T33122—2016 花园葱蜗牛检疫鉴定方法 1范围 本标准规定了花园葱蜗牛Cepaeahortensis(Muller,1774)的检疫鉴定方法。 本标准适用于花园葱蜗牛的检疫鉴定 规范性引用文件 2 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 SN/T3067软体动物常规检疫规范 3 术语和定义 SN/T3067界定的以及下列术语和定义适用于本文件 3.1 genitalia 生殖器 蜗牛的交配和繁殖器官。 注:雄性生殖器主要包括输精管、阴茎、阴茎本体、阴茎牵引肌、鞭状体等部分,雌性生殖器主要包括矢囊、副矢囊、 恋矢、黏液腺、受精囊、受精囊柄、盲管等部分。 3.2 鞭状体 flagellum 蜗牛雄性生殖系统中的附器,由阴茎本体末端分支形成。 3.3 盲管 Fdiverticulum 由受精囊柄分支形成的管状结构。 注:盲管为大蜗牛科Helicidae的基本特征。 3.4 矢囊 dartsack 蜗牛雌性生殖系统中一个藏有1枚或多枚骨针的肌肉质的囊状结构。 3.5 恋矢 Lovedart 矢囊中钙质或壳质的骨针,为蜗牛交配时刺激器官。 注:恋矢的质地和形状常用于分类。 3.6 壳口 aperture 贝壳开口部位,为蜗牛头和腹足的出口。 注:壳口的边缘为口唇,按其在壳口中的位置不同可分为内唇、外唇、轴唇、基唇、上唇和下唇 1 GB/T33122—2016 4基本信息 学名:Cepaea hortensis(Muiller,1774)。 异名:HelixhortensisMuller,1774。 英文名:White-lipped banded snail,White-lipped grove snail,White-lipped garden snail。 分类地位:软体动物门Mollusca,腹足纲Gastropoda,柄眼目Stylommatophora,大蜗牛科 Helicidae,葱蜗牛属CepaeaHeld,1837。花园葱蜗牛的近似种有森林葱蜗牛C.nemoralis(Linnaeus, 1758)、维也纳葱蜗牛C.vindobonensis(Pfeiffer,1828)。 5方法原理 花园葱蜗牛昼伏夜出,常隐藏在人们难以发现的地方,易于传播。其传播特点是不需要特定的寄 主,凡接触过地面的物品都可能传播。传播方式和传播途径是确定现场检疫方式的依据。贝壳形态、软 体解剖和分子特征是实验室鉴定的主要依据。 6器具与试剂 6.1器具 体视显微镜、放大镜、手电筒、塑料自封袋、广口标本瓶、4mm孔径土壤筛、小铁铲、游标卡尺、塘瓷 盘、培养血、解部针(直径0.15mm)、镊子、剪刀、小剪刀、显微镊子、显微剪刀、解剖腊盘、标、移液枪 微型离心机、PCR仪、1.5mL离心管、0.2mLPCR反应管、恒温金属浴。 6.2试剂 除另有规定外,所有试剂均为分析纯。 75%乙醇、无水乙醇、硫酸镁、动物基因组DNA提取试剂盒、PCR反应液、ddHzO。 7现场检测 对来自疫区(参见附录A)的运输工具和货物实施重点查验。仔细检查运输工具、木质包装物、未经 阴暗蔽光处的检查,用手电筒仔细寻找蜗牛的行迹。蜗牛爬行过后,会留下银灰色的丝带状黏液痕迹, 这是判定是否有蜗牛污染的重要依据。发现蜗牛,随时装人塑料自封袋或标本瓶,带回实验室做进一步 的检验鉴定。发现盆景等携带土壤或其他细碎衬垫材料时,需过筛检查是否有卵或幼螺。 8实验室鉴定 8.1 测量观察和软体解部 用游标卡尺测量蜗牛贝壳的壳高和壳宽、卵粒长和宽。用肉眼或放大镜或体视显微镜仔细观察卵 和螺的形态特征。 将闷杀(见10.1)处理后的标本,参照SN/T3067解剖软体,分离出生殖系统, 2
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