ICS 07.080 CCS A 40 中华人民共和国国家标准 GB/T 40348—2021 植物源产品中辣椒素类物质的测定 液相色谱-质谱/质谱法 Determination of capsaicinoid in plant derived products- Liquid chromatography-tandem mass spectrometry 2022-03-01实施 2021-08-20发布 国家市场监督管理总局 发布 国家标准化管理委员会 GB/T 40348—2021 前言 本文件按照GB/T1.1一2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由全国生化检测标准化技术委员会（SAC/TC387）提出并归口。 本文件起草单位：中国测试技术研究院生物研究所、四川大学、甘肃中商食品质量检验检测有限公 司、深圳市计量质量检测研究院、上海市计量测试技术研究院、中国计量大学、四川赛纳斯分析检测有限 公司、甘肃省商业科技研究所有限公司。 本文件主要起草人：冯德建、吴微、李怀平、李延芳、叶子弘、蓝雄、田伟、孟娇然、孙羽婕、刘琦、 叶善蓉、周李华、黎燕玲、段嫂雷、张雅芬、马丽侠、刘海龙、夏文强、朱雨田、张剑、高志莹、钱滢文 1 GB/T403482021 植物源产品中辣椒素类物质的测定 液相色谱-质谱/质谱法 1范围 本文件规定了植物源产品中辣椒素类物质含量的液相色谱-质谱/质谱测定方法 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文 本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 辣椒素类物质 capsaicinoid 在辣椒果实中产生辣味的N-香草基酰胺类生物碱物质的统称 注：其中辣椒素、二氢辣椒素两种物质的含量约占辣椒素类物质总量的90%，是影响辣度最主要的成分。 ［来源：GB/T21266—2007,3.3，有修改］ 4原理 Sa 试样用甲醇超声提取，提取液经过滤后进样，反相色谱柱分离，液相色谱-质谱/质谱仪测定，采用外 标法定量。 5试剂或材料 5 5.1试剂 除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水 5.1.1无水硫酸钠（NazSO,）。 5.1.2甲酸(CHOOH)：色谱纯。 5.1.3甲醇(CH,OH)：色谱纯。 5.2标准品 5.2.1N-王酸香草酰胺标准品：纯度≥98%分子式：C1H27NO；CAS号：2444-46-4。 5.2.2 辣椒素标准品：纯度>99%；分子式：C18H27NO3；CAS号：404-86-4。 1 GB/T40348—2021 5.2.3二氢辣椒素标准品：纯度≥98%；分子式：ClsH2NO：；CAS号：19408-84-5。 5.3标准溶液 0.1mg），用甲醇溶解并配制成质量浓度均为100mg/L的辣椒素类物质单一标准储备液，于4℃下避 光保存备用，有效期为2个月。 酸香草酰胺质量浓度为0.100mg/L，辣椒素和二氢辣椒素质量浓度均为1.00mg/L的混合标准溶 液I，现配现用。 5.3.3混合标准溶液IⅡI：分别准确移取适量各辣椒素类物质单一标准储备液，用甲醇稀释配制成N-王 酸香草酰胺质量浓度为0.100mg/L，辣椒素和二氢辣椒素质量浓度均为10.0mg/L的混合标准溶 液Ⅱ，现配现用。 5.3.4低浓度混合标准工作溶液：分别准确移取适量混合标准溶液I，用甲醇稀释配制成N-王酸香草 酰胺质量浓度为1.50ng/mL、3.00ng/mL、5.00ng/mL、10.0ng/mL、15.0ng/mL、20.0ng/mL、 30.0ng/mL，辣椒素和二氢辣椒素质量浓度均为15.0ng/mL、30.0ng/mL、50.0ng/mL、100ng/mL、 150ng/mL、200ng/mL、300ng/mL的低浓度混合标准工作溶液，现配现用。 5.3.5高浓度混合标准工作溶液：分别准确移取适量混合标准溶液Ⅱ，用甲醇稀释配制成N-王酸香草 酰胺质量浓度为1.50ng/mL、3.00ng/mL、5.00ng/mL、10.0ng/mL、15.0ng/mL、20.0ng/mL、 30.0ng/mL，辣椒素和二氢辣椒素质量浓度均为150ng/mL、300ng/mL、500ng/mL、1000ng/mL、 1500ng/mL、2000ng/mL、3000ng/mL的高浓度混合标准工作溶液，现配现用， 5.4材料 0.22μm尼龙滤膜。 5ZI6仪器设备 6.1 液相色谱-质谱/质谱仪：配电喷雾离子源（ESI源）。 6.2 分析天平：感量0.01mg和0.0001g。 6.3离心机：转速不低于8000g。 6.4元 超声波发生器：功率250W，工作频率40kHz，温度可调20℃~80℃。 6.5涡旋混匀器。 6.6 组织捣碎机。 6.7 电动粉碎机。 7样品 7.1鲜辣椒、辣椒酱及半固态辣椒制品 取鲜辣椒（辣椒酱或半固态辣椒制品）约1kg，用组织捣碎机制成匀浆，混匀，制备好的试样均分成 两份，装人洁净的盛样容器内，密封并标识，现制现用 7.2干辣椒、辣椒粉及固态辣椒制品 取干辣椒（辣椒粉或固态辣椒制品）约250g，用电动粉碎机粉碎过425μm（40目）筛，制备好的试 样均分成两份，装入洁净的盛样容器内，密封并标识，于0℃～4℃保存。 2