ICS97.200.50 CCSY57 中华人民共和国国家标准 GB/T41413—2022 玩具中N-亚硝胺及其前体物迁移量的测定 高效液相色谱-串联质谱法 Determination of migration of N-nitrosamines and N-nitrosatable substances in toysHigh performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry 2022-04-15发布 2022-04-15实施 国家市场监督管理总局 发布 国家标准化管理委员会 GB/T41413—2022 目 次 前言 范围 1 2 规范性引用文件 术语和定义 原理 试剂和材料 5 6 仪器设备 样品制备 7 8 测定 结果计算 10 方法定量限· 11 精密度 12 测试报告 LO 附录A（资料性） 本文件的背景和基本原理 11 附录B（规范性） 本文件检测的13种N-亚硝胺 CT 附录C（资料性） 13种N-亚硝胺的总离子流色谱图 16 附录D（资料性） 精密度试验结果 参考文献 GB/T41413—2022 前言 本文件按照GB/T1.1一2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任， 本文件由中国轻工业联合会提出。 本文件由全国玩具标准化技术委员会（SAC/TC253）归口。 本文件起草单位：深圳市计量质量检测研究院、北京中轻联认证中心有限公司、必维申美商品检测 （上海）有限公司、福建铭塔玩具股份有限公司、亿科检测认证有限公司、上海海关机电产品检测技术中 心、广州海关技术中心。 本文件主要起草人：冯岸红、陈秋华、高惊涛、张曜、兰文清、陶小美、望秀丽、蚁乐洲。 1 GB/T41413—2022 玩具中N-亚硝胺及其前体物迁移量的测定 高效液相色谱-串联质谱法 警示一一使用本文件的人员应有正规实验室工作的实践经验。本文件并未指出所有可能的安全问 题。使用者有责任采取适当的安全和健康措施，并保证符合国家有关法规规定的条件。 1范围 谱法。 弹性体玩具和玩具弹性体部件。 指画颜料。 示例：弹性体玩具如气球和牙胶 注：对于弹性体材料，目前主要在硫化材料中检出了N-亚硝胺及其前体物 本文件适用于以上玩具及玩具弹性体材料中13种N-亚硝胺及其前体物迁移量的测定。其他 N-亚硝胺及其前体物的检测经过验证后可参照本文件进行。 2规范性引用文件 2 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文 本文件。 GB/T6682 分析实验室用水规格和试验方法 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 指画颜料 finger paint 设计为儿童用手指或手直接涂抹于物体表面的黏土状或胶状的着色材料。 ［来源：GB6675.14—2014，3.1] 3.2 弹性体elastomer 在室温条件下，受力作用发生显著形变，释放后能迅速恢复到接近原有状态和尺寸的柔性交联大分 子材料。 注：并不是所有弹性体都可能含有N-亚硝胺和N-亚硝胺前体物。有关于弹性体中N-亚硝胺和N-亚硝胺前体物 的可能来源及其他相关信息见附录A。 来源：ENISO472：2013.2.327，有修改 3.3 N-亚硝胺 N-nitrosamine 含有一N一N=O特征官能团，通常是胺与硝化剂在酸性条件下反应生成的物质， 1 GB/T41413—2022 注1：参与反应的胺主要是仲胺 注2：例如亚硝酸盐就是一种硝化剂 3.4 N-亚硝胺前体物N-nitrosatablesubstance 在特定条件下，可迁移到测试溶液中经亚硝化作用转化成N-亚硝胺的物质。 4原理 移量。 前体物的测试溶液均为模拟唾液。 5试剂和材料 5.1试剂 除非另有说明，所有试剂均为分析纯，水为GB/T6682推荐使用的一级水。 5.1.1碳酸氢钠（NaHCO）（CAS号144-55-8）。 5.1.2氯化钠（NaCI)（CAS号7647-14-5）。 5.1.3碳酸钾（K，COs）（CAS号584-08-7）。 5.1.4亚硝酸钠（NaNO,）（CAS号7632-00-0）。 5.1.5浓盐酸（CAS号7647-01-0），质量分数为36.0%~38.0%。 5.1.6氢氧化钠（CAS号1310-73-2）。 5.1.7浓度为1mol/L的盐酸溶液：移取约85mL浓盐酸（5.1.5)于1L容量瓶中，加水稀释至刻度，有 效期为6个月。 有效期为6个月。 5.1.9浓度为0.1mol/L的盐酸溶液，移取10mL盐酸溶液（5.1.7）于100mL容量瓶中，加水稀释至刻 度，有效期为6个月。 稀释至刻度，有效期为6个月。 5.1.11模拟唾液：称取（4.2±0.021)gNaHCO，（5.1.1)、（0.5±0.0025)gNaCI(5.1.2）、(0.2±0.0010)g K，CO（5.1.3）和（0.03士0.00015）gNaNO，（5.1.4）于烧杯中，用水溶解并稀释至（950土5）mL，并用盐 保存时间不得超过5天 5.1.12甲醇，HPLC级（≥99.9%）。 5.1.13甲酸，LC-MS级（≥99.5%）。 5.2标准品 N-亚硝胺见紫外光易分解，迁移液或标准品应避免暴露于阳光或者日光灯下。 5.2.1N-亚硝胺标准物质，纯度≥97%，附录B给出了13种N-亚硝胺的具体信息 5.2.2内标，N-亚硝基二乙醇胺-D8（N-nitrosodiethanolamine-d8，简称NDELA-d8，CAS号1173019 2 GB/T41413—2022 53-8），纯度99%。 5.2.3内标，N-亚硝基二甲胺-D6（N-nitrosodimethylamine-d6，简称NDMA-d6，CAS号17829-05-9）， 纯度≥99%。 5.2.4N-亚硝胺标准储备液： 用甲醇将各N-亚硝胺标准物质（5.2.1)配制成质量浓度为10ug/mL的储备液，于（一18士3）℃避 光保存。 5.2.5内标溶液。 5.2.5.1弹性体用内标储备液： 用甲醇将NDELA-d8（5.2.2）和NDMA-d6（5.2.3）配制成质量浓度为1μg/mL的储备液，于（一18 土3）℃避光保存。 5.2.5.2指画颜料用内标工作溶液： 用水将NDELA-d8（5.2.2）配制成质量浓度为1μg/mL的工作溶液，有效期为1天。 5.2.6标准工作溶液。 5.2.6.1指画颜料中N-亚硝胺的标准工作溶液： 用水将N-亚硝胺标准储备液（5.2.4）逐级稀释得到6个标准工作溶液，质量浓度分别为0.5ug/L 1.0μg/L、2.0μg/L、5.0uμg/L、10μg/L和20μg/L，并加入适量内标工作溶液（5.2.5.2），使得每个系列 标准工作溶液的内标含量均为10ug/L，混合均匀，有效期为1天。 5.2.6.2指画颜料中N-亚硝胺前体物的标准工作溶液： 用模拟唾液（5.1.11)将N-亚硝胺标准储备液（5.2.4）逐级稀释得到至少5个标准工作溶液，质量浓 度分别为1.0μg/L、2.0ug/L、5.0ug/L、10.0ug/L和20ug/L。取系列标准工作溶液1mL于棕色进 样瓶中，加入0.020mL内标储备液（5.2.5.1），混合均匀，有效期为1天。 5.2.6.3弹性体中N-亚硝胺及其前体物的标准工作溶液： 用模拟睡液（5.1.11）将N-亚硝胺标准储备液（5.2.4）逐级稀释得到至少5个标准工作溶液，质量浓 度分别为0.2μg/L.0.5μg/L、1.0uμg/L、2.0μg/L和5.0μg/L。取系列标准工作溶液1mL于棕色进样 瓶中，加入0.020mL内标储备液（5.2.5.1），混合均匀，有效期为1天。 6仪器设备 6.1 高效液相色谱-串联质谱仪：配APCI源。 6.2 涡旋混合器 6.3 振荡器，振荡频率为400次/min或等效。 6.4 离心机，转速不低于10000r/min。 6.5 玻璃珠。 6.6 棕色锥形瓶。 6.7 恒温箱，可保持温度（40士2）℃。 6.8 滤膜，水相，0.22μm。 7样品制备 7.1概述 本文件采用高效液相色谱-串联质谱法进行测定分析。经验证后，也可以采用其他方法进行测定 3 GB/T41413—2022 值得注意的是，当采用其他方法进行测定时，需要对迁移后的溶液进行再处理。对于亚硝化过程，应使 用给定体积比的样品溶液、盐酸溶液和氢氧化钠溶液以及给定的时间和温度。 N-亚硝胺易见紫外光分解。样品分析前，应在低于25℃温度下密封避光保存，并应避免样品交叉 污染。 样品、萃取液、迁移液或标准溶液均应避免阳光和日光灯的照射。所有萃取液、迁移液和标准溶液 （5士3）℃避光保存，并在24h内进行测定。 进行指画颜料和弹性体样品分析时应同时进行方法空白试验。液相色谱用进样瓶已被报道含有 NDELA，可通过用乙醇预洗涤或用紫外光（UV）照射进样瓶去除NDELA。如果空白样品中检出N-亚 硝胺时，则在分析样品之前应检查其来源并去除。 7.2指画颜料 7.2.1N-亚硝胺 分析前指画颜料应混合均勾（例如，使用玻璃棒）。 称取样品1.0g（精确到0.0001g）于离心管中，依次准确加入0.20mLNDELA-d8工作溶液（5.2.5.2） 和18.8mL水，涡旋1min；置于振荡器（6.3）上连续振荡15min后，在4000r/min条件下离心15min。 转移部分上清液于新的离心管中，并在1