SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 3398—2012 大豆检疫性病毒多重实时荧光RT-PCR 检测方法 Detection for quarantine viruses on soybean by multiple-real time RT-PCR 行业标准信息服务平台 2012-12-12发布 2013-07-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T 3398—2012 行业标准信 中华人民共和国出入境检验检疫 行业标准 大豆检疫性病毒多重实时荧光RT-PCR 检测方法 SN/T3398—2012 中国标准出版社出版 北京市朝阳区和平里西街甲2号（100013） 北京市西城区三里河北街16号（100045） 总编室：（010）64275323 网址 www.spc.net.cn 中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷 * 开本880×12301/16 印张0.75字数16千字 2013年7月第一版2013年7月第一次印刷 印数1—1600 * SN/T3398-2012 书号：155066·2-25248定价16.00元 SN/T3398—2012 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国深圳出入境检验检疫局、深圳市检验检疫科学研究院。 本标准主要起草人：郑耘、章桂明、冯建军、卢小雨、汪莹、李一农。 行业标准信息服务平台 I SN/T3398—2012 大豆检疫性病毒多重实时荧光RT-PCR 检测方法 1 范围 本标准规定了烟草环斑病毒、南芥菜花叶病毒、番茄环斑病毒、南方菜豆花叶病毒和菜豆荚斑驳病 毒的多重实时荧光RT-PCR检测方法。 本标准适用于大豆及其加工产品中上述五种病毒的检测。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 SN/T2122进出境植物及植物产品检疫抽样 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 逆转录-聚合酶链式反应reversetranscriptionpolymerasechainreaction；RT-PGR 逆转录-聚合酶链式反应，简称RT-PCR，在适宜的反应条件下，以样品中抽提出的RNA为模板，逆 转录酶在适宜的反应条件下，RNA被道转录成cDNA，再以cDNA为模板进行PCR扩增。 3.2 多重实时荧光RT-PCRmultiple-realtimeRT-PCR 依据荧光信号随着RT-PCR产物数量增加而同步放大的原理，在RT-PCR扩增的过程中，同时连 续监测反应体系中不同标记的多种病毒扩增片段荧光信号的变化，根据荧光信号基线的平均值和平均 4原理 采用多重实时荧光RT-PCR方法检测烟草环斑病毒、南芥菜花叶病毒、番茄环斑病毒、南方菜豆花 叶病毒和菜豆荚斑驳病毒（参见附录A）。 5仪器设备和用具 烘箱、高压灭菌锅、水浴锅、低温冰箱、纯水仪、高速冷冻离心机、实时荧光PCR仪、微量移液器 （0.1μL～2.5μL.2μL~20μL20μL～200μL，100L1000μL）旋涡振荡器、超净工作台、电泳 仪、水平电泳槽、凝胶成像仪、各种吸头（1000μL、200μL、10μL）、离心管（1.5mL、0.6mL、0.2mL）。 1