SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 4656.3—2016 进出口纺织品生物安全检验方法 第3部分：大肠菌群 Biosafety testing methods of the textiles for import and export- Part 3 :Coliform 行业标准信息服务平台 2016-12-12发布 2017-07-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T 4656.3—2016 前 言 SN/T4656《进出口纺织品生物安全检验方法》共分为5部分： 第1部分：白假丝酵母菌； 一第2部分：大肠埃希氏菌； 一第3部分：大肠菌群； 一第4部分：金黄色葡萄球菌； 第5部分：菌落总数。 本部分为SN/T4656的第3部分。 本部分按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。 本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本部分起草单位：中华人民共和国河南出人境检验检疫局、四川农业大学。 本部分主要起草人：郭会清、李辑、徐超、禹建鹰、郭华麟、苗丽、乔晴、王永杰、杨娜、白杰。 行业标准信息服务平台 1 SN/T 4656.3—2016 进出口纺织品生物安全检验方法 第3部分：大肠菌群 1范围 SN/T4656的本部分规定了进出口纺织品中大肠菌群的定性、定量检验方法。 本部分适用于进出口纺织品大肠菌群检验。其他纺织类产品可参考使用本部分 2 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T8170数值修约规则与极限数值的表示和判定 SN/T1538.1培养基制备指南第1部分：实验室培养基制备质量保证通则 SN/T1538.2培养基制备指南第2部分：培养基性能测试实用指南 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件 3.1 纺织品生物安全biosafety of textiles 纺织品中携带的有害生物本身或其代谢产物对生态环境和人体健康产生的潜在威胁，及对其所采 取的一系列有效预防和控制措施。 3.2 大肠菌群 coliform 需氧及兼性厌氧，能在37℃48h分解乳糖产酸产气的一群革兰氏阴性无芽孢杆菌。 维信息服务平台 4 环境、设备和材料 4.1 常规微生物检测用的基本设备与材料。 4.2 无菌剪刀、镊子。 4.3 电子天平：0.01g。 4.4 全滤网无菌均质袋。 4.5 拍击式均质器：400mL。 4.6 无菌规格板：20cm²。 4.7 无菌干燥棉拭子。 4.8 微量移液器：200μL~1000μL、1mL~10mL。 4.9 无菌小三角瓶：25mL。 4.10 无菌吸头：1000μL、10mL 1 SN/T 4656.3—2016 4.11 无菌玻璃平皿或塑料平皿：15mmX90mm。 4.12 恒温水浴箱：45℃±1℃。 4.13 恒温培养箱：36℃士1℃。 4.14 放大镜（放大5倍～10倍）或菌落计数器 4.15 滤膜或一次性无菌滤膜：直径47mm，微孔径0.45μm。 4.16 烧杯：500mL。 4.17 无菌滤器。 4.18 抽滤设备。 4.19 接种环。 4.20 无菌三角瓶：300mL。 5培养基、试剂 5.1磷酸盐缓冲液：见A.2。 5.2无菌生理盐水：见A.3。 5.3结晶紫中性红胆盐琼脂（VRBA）：见A.4。 5.4煌绿乳糖胆盐肉汤（BGLB肉汤）发酵管：见A.5。 5.5Aliz-gal琼脂：见A.6。 5.6 月桂基硫酸盐胰蛋白陈肉汤（LST肉汤）发酵管：见A.7。 注：本部分中无菌稀释液均为磷酸盐缓冲液（5.1）或无菌生理盐水（5.2）。 6样品制备 6.1称量法 无菌方法打开送检的样品，用无菌剪刀（4.2）均匀剪样，在电子天平（4.3）上准确称取剪下的样品 25g样品。剪碎后加人到盛有225mL无菌稀释液的全滤网无菌均质袋（4.4）中，用拍击式均质器（4.5） 拍打1min～2min，充分混匀，得到一个1：10的样品匀液， 6.2 多点采样洗脱法 无菌方法打开送检的样品，在样品四周和中间均勾布控5个采样点，用无菌规格板（4.6）按每个采 样点20cm面积范围剪裁，每20平方厘米采样面积为1份检样，每个样品共采集5份检样，采样面积为 式均质器（4.5）拍打1min～2min，充分混匀，得到一个洗脱液，制成样品匀液作为原液。 6.3 3棉拭子涂抹法 布控5个采样点，用无菌规格板（4.6）比照按每个采样点20cm面积范围均匀涂抹，每个采样点用1个 无菌干燥棉拭子（4.7），立即用无菌剪刀（4.2）剪去棉拭子手接触部分，将涂抹部分一块放人盛有50mL 无菌稀释液的全滤网无菌均质袋（4.4）中，制成1：10的样品匀液 6.4样品制备方法的选择 样品制备一般依6.1方法25g样品十225mL稀释液为基准方法，但当样品为面积较大或较厚实或 2