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ICS 11.020 C 61 Ws 中华人民共和国卫生行业标准 WS/T 632—2018 巴贝虫检测血涂片镜检法 Detection of Babesia spp. -Blood smear microscopy examination method 行业标准信息服务平台 2018-09-26发布 2019-04-01实施 中华人民共和国国家卫生健康委员会发布 WS/T632—2018 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准由国家卫生标准委员会寄生虫病标准专业委员会提出。 本标准起草单位:中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所、第二军医大学、中国农业科学院上 海兽医研究所。 本标准起草人:张仪、周晓农、刘琴、陈韶红、朱淮民、周金林。 行业标准信息服务平台 I WS/T632-—2018 巴贝虫检测 血涂片镜检法 1范围 本标准规定了检测巴贝虫的血涂片镜检法。 本标准适用于各级疾病预防控制机构和医疗机构对巴贝虫的检测。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 WS/T569疟原虫检测血涂片镜检法 WS/T564巴贝虫病诊断 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3. 1 巴贝虫Babesiaspp 一类寄生于人和脊椎动物红细胞内的原虫,可引起巴贝虫病(Babesiosis)。感染人体的巴贝虫有 田鼠巴贝虫(Babesiamicroti)、分歧巴贝虫(B.divergens)、邓肯巴贝虫(B.duncani)和猎户巴贝虫(B 行业标准 venatorum)等。 3. 2 血涂片blood smears 赠息服务平台 将血液涂制于载玻片上制成的涂片,分为厚血膜涂片和薄血膜涂片。 仪器和器材 4 4.1光学显微镜(100×油镜、10×目镜) 4. 2 血涂片染色架 4. 3 血涂片干燥架 4. 4 玻片盒 4.5 染色盘和染色缸 1 WS/T632—2018 4.6计数器 5试剂和材料 5.1 吉氏染色原液(Giemsa) 5. 2 pH7.2磷酸盐缓冲液(PBS) 5.3标准级载玻片(洁净载玻片,或表面带正电荷的粘附玻片) 5. 4 甲醇(分析纯) 5.5 香柏油或专用浸油(折射率≥1.5) 5.6 二甲苯(分析纯) 5.7甘油 6检测步骤 6.1血涂片的制作 6.1.1采血部位及取血方法 末梢(无名指指尖或耳垂)取血。用75%酒精棉球消毒取血部位,待酒精挥发后,用拇指和食指紧 捏耳垂上方或无名指指尖,另一只手手持一次性采血针迅速刺入皮肤,轻轻挤压出血。婴儿可从拇趾或 足跟扎刺取血。 6.1.2厚血膜制作 取1张已消毒的载玻片(或粘附玻片)作推片,用推片的一角,取4uL~5μL的血量,使血与另1 张平置的载玻片(或粘附玻片)中央偏右的位置接触,由里向外旋转,画2圈~4圈,涂成直径0.8cm~ 1cm大小圆形厚血膜(见附录A)。 6.1.3薄血膜制作 干棉球抹净推片下角的血渍,用同→张推片中部取约1μL~1.5μL的血量。将血置于离厚血膜左边 缘约0.3cm的位置,推片的边缘紧贴载玻片,上下轻轻移动,使血沿推片的边缘散开至2cm宽,使两 张玻片保持25°~35°角,从右向左迅速推动推片向前,推成舌状薄血膜(见附录A)。 6.1.4编号 血涂片制好后水平放置,充分干燥后,在玻片一侧毛玻璃上或在靠近厚血膜一端边上标注编号和日 期。 6.2固定与溶血 6.2.1薄血膜固定 将薄血膜一端朝下呈45°角,用一次性吸管吸取甲醇溶液,均匀轻抹于薄血膜表面,避免碰触厚血 膜。
WS-T 632-2018 巴贝虫检测 血涂片镜检法
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