ICS 11.020 wS C 50 中华人民共和国卫生行业标准 WS/T4992017 下呼吸道感染细菌培养操作指南 Performance guideline for bacterial culture of lower respiratory tract infections 行业标准信息服务平台 2017-01-15发布 2017-07-01实施 中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会 发布 WS/T499—2017 目 次 前言 引言 1 范围 2 规范性引用文件 3 术语和定义 4 分析前 4.1 标本采集 4.2 标本运送 4.3 筛选并拒收的标本 5 分析中 5.1 痰及气管吸出物标本处理 5.2 气管镜标本处理 5.3 连续培养并观察慢生长菌 5.4 分离并鉴定下呼吸道重要致病菌（见附录C) 5.5 质量控制 分析后报告结果 6.1 革兰染色报告 6.2 报告有临床意义的微生物 6.3 对非致病菌的报告 6.4平板上无细菌生长· 6.5与结果有关的说明 12 附录A（规范性附录） 下呼吸道感染的主要类型及主要病原体 1.3 附录B（规范性附录） 纤维支气管镜采集的标本适合诊断的病原体和检验项目 附录C（规范性附录） 常见可疑菌落形态及常规快速鉴定方法 15 参考文献 17 WS/T499—2017 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准起草单位：国家卫生和计划生育委员会临床检验中心、陕西省人民医院、安徽省立医院、北京 医院、北京大学人民医院、中国医学科学院北京协和医院、首都医科大学附属北京友谊医院、解放军总医 院、浙江省温州医科大学附属第二医院。 本标准主要起草人：胡继红、任健康、马筱玲、胡云建、王辉、徐英春、苏建荣、罗燕萍、李向阳。 行业标准信息服务平台 WS/T 499—2017 引言 0.1口咽部定植菌群的变化 人类口咽部位定植着大量需氧菌、兼性厌氧菌和厌氧菌等微生物，口腔菌群总数可达1010CFU/ mL～1012CFU/mL。健康人咽部定植细菌最少，咽部需氧的正常菌群主要由革兰阳性菌组成。人体基 础条件的变化会改变咽部定植菌群的种类和数量。长期接触某些携带侵袭性定植菌人群，如日托儿童 的父母的肺炎链球菌、流感嗜血杆菌定植数量会增加；在免疫抑制、慢性肺病、广谱抗菌药物治疗或住院 患者等人群中，革兰阴性杆菌的优势明显增加。 0.2肺部感染的常见机制 肺部感染的最常见机制是肺泡内吸入了口咽部定植菌。健康宿主吸人定植菌后通常无临床症状， 细菌可被黏液、柱状纤毛清除；吸入性肺炎患者咽部菌群种类趋向于侵袭性细菌或耐药细菌，如肺炎链 球菌或革兰阴性杆菌等。吸人定植菌能否引起肺部感染取决于吸人菌的致病性及数量、患者免疫系统 和呼吸道防御功能等因素。 其次，吸入含微生物的气溶胶亦可引发下呼吸道感染，如使用不清洁呼吸机导致的交叉感染。 血液播散是下呼吸道感染第三位的原因，感染通常造成双肺下叶肺炎 0.3痰涂片对下呼吸道感染病原菌诊断的作用 除引起社区非典型肺炎的病原不能常规培养外，其他常见肺部感染的病原菌均可用常规培养方法 分离，但培养方法的敏感性低，且无法判断分离菌的来源 痰涂片可提高下呼吸道感染病原学诊断的特异性和敏感性。涂片革兰染色可评估痰标本的质量， 具有减少口咽部污染菌的影响、提高病原菌诊断特异性的作用。痰涂片还可发现培养不能生长的细菌。 0.4纤维支气管镜标本定量培养的临床意义 经纤维支气管镜获取的支气管肺泡灌洗液和保护毛刷标本适合做细菌定量培养，当可能致病菌的 菌落数大于阈值时，其诊断下呼吸道感染的特异性可达82%～91%，诊断价值远高于痰标本。 0.5下呼吸道感染细菌培养的局限性 微生物实验室选择的培养方法不支持病原菌生长、抗菌药物影响、标本送检时间延长、口腔正常菌 群污染等可导致假阴性结果出现；而污染菌对标本检测结果的影响以及过度解读细菌学结果等可导致 假阳性报告。 IV