ICS11.020 C50 备案号：15864—2005 WS 中华人民共和国卫生行业标 WS/T248—2005 厌氧菌的抗微生物药敏感试验方法 Methods for Antimicrobial Susceptibility Testing ofAnaerobicBacteria 行业标准信息服务平台 2005-05-08发布 2005-12-01实施 中华人民共和国卫生部发布 PDF文件使用"pdfFactoryPro"试用版本创建www.fineprint.cn WS/T248—2005 前言 本标准是在卫生部颁发的全国临床检验操作规程》（第三版）的基础上，依据美国国家临床实验室 标准化委员会（NationalCommitteeforClinicalLaboratoryStandards，NCCLS）M1l-A5文件一庆氧菌 的抗微生物药敏感试验方法（已批准的标准一第五版）[ISBN1-56238-429-5]，结合中国实际悄况和要 求制定 本标准的附录A为资料性附录。 本标准从2005年12月1口起实施 本标准由卫生部提出。 本标准起草单位：北京大学人民医院检验科。 本标准主要起草人：张正、岳志红 本标准由卫生部负责解释。 行业标准信息服务平台 PDF文件使用“pdfFactoryPro"试用版本创建www.fineprint.cn WS/T248—2005 厌氧菌的抗微生物药敏感试验方法 1范围 本文件所述方法主要用于测试普通分离到的厌氧菌。琼脂稀释法可用于测试大多数厌氧病原菌。目 前微量肉汤稀释法仅用于测试脆弱拟杆菌菌群的病原菌。本标准适用于厌氧菌的抗微生物药敏感试验。 2术语和定义 下列术语和定义适用于本标准。 2.1琼脂稀释敏感试验 将某一种抗微生物药的系列浓度混人用于敏感试验的琼脂生长培养基进行的抗微生物药敏感试 验。 2.2敏感 指该菌株所致感染可以用推荐用于此型感染及病原菌的抗微生物药剂量进行合理地治疗。 2.3中介 药物在生理浓集的部位具有临床效力或者可用高于正常剂量的药物进行治疗；另外还包括一个“缓 2.4耐药 指常规剂量的抗微生物药不能抑制该菌株的生长和/或该菌株的MIC低于某范围内。在此范围 内，可存在某些特定的耐药机制（如β内酰胺酶类），并且临床治疗显示其疗效并不可靠。 2.5最低抑菌浓度 琼脂或肉汤释敏感试验中抗微生物药抑制某一种微生物可见生长的最低浓度 3厌氧菌敏感试验的指征 临床上有厌氧菌感染存在并在实验室分离出厌氧菌，原则上均应进行抗微生物药敏感试验。 3.1常规试验 从脑脓肿、心内膜炎、骨髓炎、关节感染、人工装置或人工血管感染及菌血症分离到的特殊感染的标 本应该测试，并应参考临床医生的合理建议。 当感染的性质不清楚，标本含有内源性厌氧菌菌群，而且病原菌与正在治疗的感染关系很小时，通 常不必做敏感试验。当存在多种厌氧菌时，参考临床情况选择可能引起厌氧菌感染的最重要菌种进行 敏感试验。一般分离到拟杆菌属、普雷沃菌属、梭杆菌属、梭菌属、嗜胆菌属和萨顿菌属的一些菌种应做 敏感试验。 缴感试验应使用分纯后菌悬液。一般不能直接用临床标本进行敏感试验。MIC试验一般采用倍 比稀释。采用本标准推荐方法，做好质控，结果报告采用在实际终点时的一个倍比稀释范围内较为科 学。例如：终点为16μg/ml，真正报告应（832）μg/ml范围更好。并做山敏感，中介或耐药判断，以供 临床参考。 3.2监测试验 当技术条件不允许每个实验室都进行厌氧菌敏感试验时，建议建立当地参考实验室，收集一定量临 床菌株（不少于50100株），集中测试后公布结果供大家参考。 4厌氧菌敏感试验的局限性 体外结果不足以预测某个病人对厌氧菌感染治疗的反应，仅供临床选药参考。此标准的试验方法 PDF文件使用"pdfFactoryPro"试用版本创建www.fineprint.cn WS/T248-—2005 也并不一定适用于所有的厌氧菌，需考虑以下两点。 4.1折点和临床相关 关于确定厌氧菌对大多数抗微生物药的敏感性的折点，现在并无一致意见。目前折点的确定是基 于动物模型或需氧和厌菌多重感染的病人的临床试验结果，因为大多数厌氧菌感染发生于密闭空 间，涉及多种微生物，单一抗微生物药抗单一微生物的体外活性并不直接与其体内效力相关。 水平，因为厌氧菌感染通常推荐最大剂量用药。建立中介范围是因为有些药物难于判读终点和MIC在 折点附近聚集 4.2病原菌 琼脂稀释法适用于测试多种不同的厌氧菌。至今为止，微量肉汤稀释法仅限于测试脆弱拟杆菌菌 群，当测试菌呈蔓延生长时（例风 对于败毒梭菌，每个平板只 5抗微生物药 5.1来源 抗微生物药标 考药品可 商·或来自 来自 药品及食品监督管理局检定所及其他 直花 中 的制品用于 可接受的药品 商业途径不应把 玫感试验 应贴有标签，标明药品的通用名，批号， 分析活力常用每 品中含ug或国际单位（IU）表示 和有效期忙存于规定的温度和湿度中。用 时防止冷凝水进 B 的称 5.2抗微生物药 量 实验室必须 核批待用药品的 分析结果来标化其抗微生物药溶液。抗微主物药品应使用经计量 认证的分析天平 公式如下 体积 x所需浓度（格/ml） 重量（mg） 分析活力邮 或 分析活力量R/mR） 体积（ml）= 所需浓度gm 5.3制备贮存液 抗微生物药贮存液制 浓度 1000ug/ml（如1 孩至少为 260ug/ml）或者是最高测试浓度 的10倍。某些药物必须落解 此时，应使用尽量少的容剂来济解抗微生物药。最终的贮 存液可用水或附录A表A. 适的稀样剂进行稀释 存液分装后贮存于规定温度下，一般 一60℃可保存半年。 5.4测试浓度的数目 一种特定抗微生物药的测试浓度应包含附录 2所示的解释性折点，但实测的浓度数目是由 实验室决定的。MIC结果报告推荐选用5个或更多浓度。建议选用的范围应包含质控菌株的在控数 值。 6常规试验和报告中抗微生物药的选择 敏感试验抗微生物药品种类选择可参考附录A表A1。在实际应用中，应结合我国实情，参考实 验室所在的临床单位医生及感染控制科意见做出合适选择，不断积累经验。 完整的报告单应包括惠者一般资料（姓名、性别、年龄和病理号等）。药品名称应按照我国药典颁布 名称。菌种名称按照卫生部已公布名词标准。应报告敏感、中介和耐药 2 PDF文件使用"pdfFactoryPro"试用版本创建www.fineprint.cn