ICS 65.120 B 46 中华人民共和国国家标准 GB 9840—2017 代替GB/T9840—2006 饲料添加剂 维生素D3（微粒） Feed additiveVitamin Ds (powder form) 2017-10-14发布 2018-05-01实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布 中国国家标准化管理委员会 GB9840—2017 前言 本标准的第1章、第3章和第5章为强制性的，其余为推荐性的。 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准代替GB/T9840一2006《饲料添加剂维生素D：（微粒）》。 本标准与GB/T98402006相比，主要技术内容差异如下： 一本标准中增加了饲料添加剂维生素D（微粒）水分散型产品的相关技术要求 原标准中的英文名称为“Feedadditive一VitaminDbeadlets”；本标准改为“Feedadditive VitaminD,(powderform)". 原标准“本标准适用于...·作为维生素类饲料添加剂”，本标准改为“本标准适用于以饲料添加 剂维生素D3油为原料，配以一定量的抗氧化剂，采用明胶、淀粉等辅料制成的普通型饲料添加 剂维生素D（微粒）和采用麦芽糊精、乳化剂等辅料制成的水分散型饲料添加剂维生素D，（微 粒）。辅料应符合《饲料原料目录》《饲料添加剂品种目录》以及《饲料卫生标准》的规定” 一原标准中化学名称“9，10-开环胆留-5，7，10（19）-三烯-3β-醇”，本标准改为"（3β,5Z.7E)-9,10- 开环胆留-5，7，10（19）-三烯-3-醇” 一原标准技术指标中含量占标示量范围为“90.0%~120.0%”，本标准改为“90.0%~110.0%”。 一维生素D含量测定方法中检测波长由265nm改为254nm，修订了维生素D，校正因子的测定 方法，并增加了系统适用性，标准溶液的浓度由10μg/mL改为50ug/mL，称样量由0.2g~ 0.5g改为约1g（精确至0.1mg），第二法中增加正已烷萃取液的定容”。 型产品保质期为12个月”。 一增加附录A（资料性附录）。 本标准由全国饲料工业标准化技术委员会（SAC/TC76）提出并归口。 本标准起草单位：浙江省兽药饲料监察所、浙江花园生物高科股份有限公司、浙江医药股份有限 公司。 本标准主要起草人：施杏芬、朱聪英、吕伟军、张彩菊、姜红军、陈勇、钱国平、姚园园、黄娟、周志强、 梅娜、裘丞军、周丰超。 本标准所代替标准的历次版本发布情况为： —GB/T9840—1988、GB/T9840—2006。 1 GB 9840—2017 饲料添加剂 维生素D3（微粒） 1 范围 本标准规定了饲料添加剂维生素D（微粒）产品的要求、试验方法、检验规则、标签、包装、运输、贮 存和保质期 本标准适用于以饲料添加剂维生素D油为原料，配以一定量的抗氧化剂，采用明胶、淀粉等辅料制 成的普通型饲料添加剂维生素D（微粒）和采用麦芽糊精、乳化剂等辅料制成的水分散型饲料添加剂维 生素D（微粒）。辅料应符合《饲料原料目录》《饲料添加剂品种目录》以及《饲料卫生标准》的规定 化学名称：（3β，5Z，7E)-9，10-开环胆留-57,10（19）-三烯-3-醇 分子式：C27H440 相对分子质量：384.64（2007年国际相对原子质量） 化学结构式： 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有修改单）适用于本文件。 GB/T 601 化学试剂标准滴定溶液的制备 GB/T 603 化学试剂试验方法中所用制剂及制品的制备 GB/T6435 饲料中水分的测定 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 GB10648 饲料标签 GB/T 13088 饲料中铬的测定 GB/T14699.1饲料采样 3要求 3.1产品规格 3.1.1500000IU/g 3.1.2 产品规格也可根据合同要求确定（但不能低于500000IU/g）。 1 GB 9840—2017 3.2 外观和性状 本品为米黄色至黄棕色微粒，具有流动性，遇热、见光或吸潮后易降解，导致含量下降。水分散型微 粒遇水分散，可形成稳定均匀的乳状液。 3.3 3技术指标 技术指标应符合表1的要求。 表1 技术指标 指 标 项 目 普通型 水分散型 维生素D：的含量（占标示量）/% 90.0~110.0 100.0%通过孔径为0.85mm的试验筛 粒度 85.0%以上通过孔径为 95.0%以上通过孔径为 0.425mm的试验筛 0.425mm的试验筛 干燥失重/% ≤5.0 重金属（以Pb计）/（mg/kg) ≤10 总砷（As)/（mg/kg） 2 铬/(mg/kg) 2.0 水中分散性（1g/100mL，20℃） 形成稳定均勾的乳状液 4试验方法 除特殊说明外，所用试剂均为分析纯；色谱和光谱分析中所用水应符合GB/T6682中一级水的规 定，其他实验用水符合GB/T6682中三级水的规定；试剂和溶液的制备应符合GB/T601和GB/T603 的规定。 4.1 感官检验 取适量样品置于清洁、干燥的白瓷盘中，在自然光线下进行感官检查， 4.2鉴别 SAC 4.2.1 试剂和溶液 4.2.1.1 三氯甲烷。 4.2.1.2 乙酸酐。 4.2.1.3 硫酸。 注意：硫酸是强腐蚀液，操作者需戴防护眼镜、手套，以防灼伤。 4.2.2 鉴别试验 称取试样约100mg，加三氯甲烷（4.2.1.1)10mL,研磨数分钟，过滤。取滤液5mL，加乙酸酐 （4.2.1.2）0.3mL，硫酸（4.2.1.3）0.1mL，振摇，初显黄色，渐变红色，迅即变为紫色，最后呈绿色， 2 GB9840—2017 4.3维生素D3含量 警告：检测过程应避光操作！ 4.3.1原理 试样中维生素D经皂化回流（第一法）或超声提取（第二法），正已烷萃取后，注入色谱柱，用流动相 洗脱分离，在254nm处测定，外标法计算维生素D的含量 4.3.2 试剂和溶液 4.3.2.1 正已烷。 4.3.2.2 正已烷（色谱纯）。 4.3.2.3 正戊醇（色谱纯）。 4.3.2.4 无水乙醇。 4.3.2.5 95%乙醇。 4.3.2.6 无水硫酸钠。 4.3.2.7 二丁基羟基甲苯(BHT)。 4.3.2.8 维生素D标准品：含量≥99.0%（1IU=0.025μg）。 4.3.2.9 氢氧化钾溶液：500g/L。 注意：氢氧化钾溶液是强腐蚀液，操作者需戴防护眼镜、手套，以防灼伤。本液应临用新配。 4.3.2.10氢氧化钠溶液：c（NaOH）=1mol/L，按GB/T601配制。 注意：同4.3.2.9 4.3.2.11L-抗坏血酸溶液：称取L-抗坏血酸3.5g，于氢氧化钠溶液（4.3.2.10)20mL中溶解。本液应 临用新配。 4.3.2.12酚酞指示液：按GB/T603配制。 4.3.2.13内三醇淀粉润滑剂：称取内三醇22g，加入可溶性淀粉9g，加热至140℃并保持30min，并不 断搅拌，放冷。 4.3.2.14氯化钠溶液：100g/L。 4.3.2.15盐酸溶液I：c（HCI)=1mol/L，按GB/T601配制。 4.3.2.16盐酸溶液IⅡ：c（HCl)=0.01mol/L，吸取盐酸溶液I（4.3.2.15)1mL于100mL容量瓶中，用 水定容，摇勺。 4.3.3 仪器和设备 4.3.3.1 分析天平：感量0.1mg和0.01mg。 4.3.3.2 恒温水浴锅。 4.3.3.3 3超声波清洗器。 4.3.3.4 紫外灯。 4.3.3.5 高效液相色谱仪，带紫外检测器或二极管阵列检测器。 4.3.4 测定方法 第一法适用于普通型和水分散型的饲料添加剂维生素D：（微粒）的检测，第二法适用于普通型饲料 添加剂维生素D（微粒）的检测。 3 GB9840—2017 4.3.4.1标准溶液制备 4.3.4.1.1标准购备溶液制备 称取维生素D：标准品（4.3.2.8）50mg（精确至0.01mg）于50mL棕色容量瓶中，用正已烷 4.3.2.1）溶解并定容，摇匀，作为标准贮备溶液于冰箱中保存。 4.3.4.1.2标准溶液制备 吸取标准贮备溶液（4.3.4.1.1）5.00mL于100mL（第一法）或200mL（第二法）棕色容量瓶中，用正 已烷（4.3.2.1）定容并摇匀。该溶液含维生素D约为50μg/mL（相当于2000IU/mL）或25μg/mL（相 当于1000IU/mL)。 4.3.4.2试样溶液制备 4.3.4.2.1第一法（皂化萃取法，为仲裁法） 称取试样约1g（精确至0.1mg，相当于维生素D.5.0×10°IU）于皂化瓶中，加人乙醇（4.3.2.5） 冷凝管顶端加水冲洗冷凝管内壁2次，每次用水5mL。取出皂化瓶用流水迅速冷却，将皂化液移至 再用正已烷（4.3.2.1）洗涤2次，每次10mL，洗液并人500mL的分液漏斗中，加入正已烷（4.3.2.1） 60mL萃取，静置分层。水层转移至250mL分液漏斗中，再用正已烷（4.3.2.1）分2次萃取，每次 50mL；弃去水层，收集萃取液于500mL分液漏斗中，正已烷层先用氯化钠溶液（4.3.2.14）80mL洗 次，再用水洗涤数次（每次用水50mL～80mlL洗涤，洗涤时应缓缓转动，避免乳化），直至水层遇酚酰 指示液（4.3.2.12）不显红色为正。提取液用铺有脱脂棉与无水硫酸钠（4.3.2.6）的漏斗过滤，滤液放人 250mL棕色容量瓶，漏斗用正已烷（4.3.2.1）洗涤3次～5次，洗液并人容量瓶中，再用正已烷（4.3.2.1） 稀释至刻度，摇匀，即得试样溶液。 4.3.4.2.2第二法（超声提取法） 称取试样约1g（精确至0.1mg，相当于维生素D,5.0×10IU），于250mL棕色容量瓶中，加人盐 酸溶液I（4.3.2.15）10mL，50℃水浴超声提取5min，冷却。加无水乙醇（4.3.2.4）至容量瓶的80%左 右，常温超声5min，冷却，用无水乙醇（4.3.2.4）定容。 在250mL分液漏斗中加人盐酸溶液Ⅱ（4.3.2.16）17mL和正已烷（4.3.2.1）30mL，并加入上述样 品溶液25.00mL，振摇5min。弃去水层，把正已烷层倾人50mL棕色容量瓶，并用少量正已烷 （4.3.2.1)对分液漏斗润洗2次后并入容量瓶中，再用正已烷（4.3.2.1)定容，摇匀，即得试样溶液 4.3.4.3测定 4.3.4.3.1参考色谱条件 参考色谱条件如下： 色谱柱：硅胶，柱长250mm，内径4.6mm，粒度5μm或性能相当者； 一流动相：正已烷（4.3.2.2）十正戊醇（4.3.2.3）=99.6十0.4； 流速：2.0mL/mi