ICS 65.120 B 46 中华人民共和国国家标准 GB7300.203—2020 代替GB/T21515—2008 饲料添加剂 第2部分： 维生素及类维生素 甜菜碱 Feed additive-Part 2:Vitamins,provitamins and chemically well-defined substances having similar effectBetaine 2020-12-01实施 2020-05-29发布 国家市场监督管理总局 发布 国家标准化管理委员会 GB7300.203—2020 前言 本部分的第1章、第4章和第6章为强制性的，其余为推荐性的。 GB7300《饲料添加剂》按产品分为若干部分。 本部分为GB7300的第203部分。 本部分按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本部分代替GB/T21515一2008《饲料添加剂天然甜菜碱》。 本部分与GB/T21515—2008相比主要技术差异如下： 适用范围增加了合成甜菜碱（见第1章）； 增加了合成甜菜碱技术指标（见4.2）； 天然甜菜碱增加了游离胺技术指标（见4.2）； 删除了抗结块剂技术指标（见4.2，2008年版的3.2）； 甜菜碱含量测定标准品改为甜菜碱（见5.3.1，2008年版的4.3.1)； 增加了总游离胺/氨检测方法（见5.8） 合成甜菜碱增加了氯化钠检测方法（见5.9.1)； 补充了甜菜碱标准溶液色谱图（见附录A）。 本部分由中华人民共和国农业农村部提出并归口。 本部分起草单位：山东省饲料质量检验所、中国饲料工业协会、宜兴市天石饲料有限公司。 本部分主要起草人：张芸、宫玲玲、李竞前、孙延军、李俊玲、邹益东， 本部分所代替标准的历次版本发布情况为： GB/T 21515—2008。 1 GB7300.203—2020 饲料添加剂第2部分： 维生素及类维生素甜菜碱 1范围 GB7300的本部分规定了饲料添加剂甜菜碱的要求、试验方法、检验规则、标签、包装、运输、贮存和 保质期。 本部分适用于由甜菜糖蜜分离、加工而成的天然甜菜碱产品，以及由氯乙酸钠盐和三甲胺化学合成 的饲料添加剂甜菜碱产品 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 601 化学试剂标准滴定溶液的制备 GB/T 602 化学试剂 厂杂质测定用标准溶液的制备 GB/T 603 化学试剂试验方法中所用制剂及制品的制备 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 GB10648饲料标签 GB/T13079—2006饲料中总砷的测定 GB/T14699.1饲料采样 3 3化学名称、分子式、相对分子质量和结构式 化学名称：三甲基甘氨酸 分子式：C5HNO2 相对分子质量：117.15（按2016年国际相对原子质量） 结构式： H,C-NO CH. 4要求 4.1 外观性状 天然甜菜碱为白色、类白色或微黄色至淡褐色结晶性粉末；合成甜菜碱为白色、类白色或微黄色结 晶性粉末。 4.2技术指标 饲料添加剂甜菜碱产品分为天然甜菜碱和合成甜菜碱，合成甜菜碱按含量分为I型和Ⅱ型两种规 格，技术指标应符合表1的要求。 1 GB7300.203—2020 表1甜菜碱技术指标 指 标 项 目 I 型 II 型 天然 98.0 96.0 甜菜碱(以干基计)/% 96.0 干燥失重/% 1.3 2.0 1.5 灼烧残渣/% 1.5 2.5 0.5 重金属（以Pb计）/（mg/kg） 10 10 10 总砷（以As计）/（mg/kg) 2.0 2.0 2.0 氯化钠(NaCI)/% 0.30 0.30 0.02 总游离胺/氨［以（CH，）N计/（mg/kg） 100 100 100 硫酸盐（以SO计)/% 0.1 5试验方法 除非另有说明，所有试剂均为分析纯，水为符合GB/T6682规定的三级水，色谱用水为符合 GB/T6682规定的一级水。分析中所用标准滴定溶液、杂质测定用标准溶液、制剂及制品，在没有注明 其他要求时，均按GB/T601、GB/T602、GB/T603的规定制备。 5.1 外观性状 取适量样品于白瓷盘中，在自然光下目视检验其色泽与形态。 5.2鉴别试验 5.2.1试剂 5.2.1.1盐酸溶液：盐酸十水=1十4（体积比）。 5.2.1.2碘化铋钾溶液：取0.85g碱式硝酸铋溶于10mL乙酸中，加40mL水。取40g碘化钾，用水 溶解并定容至100mL。将上述两种溶液等体积混合，棕色玻璃容器贮存。 5.2.1.3碘化铋钾盐酸溶液：取碘化钾溶液（5.2.1.2）1mL.加盐酸溶液（5.2.1.1）2mL，加水至10mL （现用现配）。 5.2.2鉴别方法 5.2.2.1 称取试样0.5g，加1mL水溶解，加人2mL碘化铋钾盐酸溶液（5.2.1.3）。振摇，产生橙红色 沉淀。 5.2.2.2 取5.3.1.4.1的溶液，按5.3.1.4.3.3上机测定，保留时间与标准溶液一致。 5.3 甜菜碱含量的测定 AG 5.3.1 离子色谱法（仲裁法） 5.3.1.1 方法原理 用水溶解试样，将溶液稀释至合适的浓度，用阳离子交换柱和非抑制型电导检测器分离测定。外标 2 GB7300.203—2020 法定量。 5.3.1.2试剂和材料 5.3.1.2.1甜菜碱标准品（≥99%）。 5.3.1.2.2甲基磺酸储备液：准确移取2mL甲基磺酸于100mL容量瓶中，用水定容摇匀。浓度 为300mmol/L。 浓度为3.0mmol/L。超声脱气5min～10min。现用现配。 5.3.1.2.4甜菜碱标准储备液：称取于105℃土2℃烘干4h的甜菜碱标准品（5.3.1.2.1)0.10g（精确至 0.0001g），于100mL容量瓶中，用水定容，摇匀。该溶液浓度为1000μg/mL。 5.3.1.2.5滤膜：0.45μm，水系。 5.3.1.31 仪器设备 5.3.1.3.1 离子色谱仪：具有阳离子交换分析柱或性能相当的其他分析柱和电导检测器。 5.3.1.3.2分析天平：感量0.1mg。 5.3.1.3.3电热干燥箱：温度可控制为105℃土2℃。 5.3.1.4 分析步骤 5.3.1.4.1提取 称取预先在105℃烘箱干燥至恒重的试样约0.25g（精确至0.0001g），置于100mL容量瓶中，加 人约70mL的水，待试样溶解后定容。取2mL至50mL容量瓶定容，摇匀，过0.45μm滤膜，待测 5.3.1.4.2标准系列溶液制备 准确吸取甜菜碱标准储备液（5.3.1.2.4）1.00mL、5.00mL、10.00mL、20.00mL、50.00ml分别置 于100mL容量瓶中，用水定容后摇匀。此标准系列的浓度为10.0μg/mL、50.0μg/mL、100.0μg/mL、 200.0μg/mL、500.0μg/mL。现用现配。 5.3.1.4.3测定 5.3.1.4.3.1离子色谱参考条件 色谱柱：阳离子交换分析柱，内径4mm，长250mm，填料粒径4.5um：或性能相当的其他色谱柱 流速:1.0 mL/min。 柱温：40℃。 检测器：电导检测器。 进样量：20μL。 5.3.1.4.3.2标准曲线的绘制 待仪器稳定后，将上述标准系列（5.3.1.4.2)分别注入离子色谱仪，以甜菜碱的浓度为横坐标，峰面 积为纵坐标，绘制工作曲线，或计算回归方程。甜菜碱标准溶液色谱图参见附录A。 5.3.1.4.3.3试样测定 取试样溶液（5.3.1.4.1）注人离子色谱仪，以峰面积定量。 3 GB7300.203—2020 5.3.1.5 试验数据处理 试样中甜菜碱的含量W，以质量分数（%）表示，按式（1）计算： piVi × 25 W1= X100 ·(1) mi×1000×1000 式中： 试样色谱峰面积对应的甜菜碱的质量浓度，单位为微克每毫升（μg/mL）； V，一一定容体积，单位为毫升（mL）； mi 一试样的质量，单位为克（g）。 5.3.1.6结果表示 测定结果用平行测定的算术平均值表示，结果保留三位有效数字。 5.3.1.7 重复性 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不大于这两个测定值的算术平均值的3%。 5.3.2高氯酸滴定法 5.3.2.1方法原理 干燥至恒重的试样用冰乙酸溶解，以高氯酸为标准滴定溶液，结晶紫为指示剂进行滴定，由紫色变 为蓝绿色为滴定终点。 5.3.2.2 试剂或材料 5.3.2.2.1 冰乙酸。 5.3.2.2.2 乙酸酐。 5.3.2.2.3 结晶紫指示液：5g/L。 5.3.2.2.4 高氯酸标准滴定溶液：c（HCIO.）=0.1mol/L 5.3.2.3 仪器设备 5.3.2.3.1 酸式滴定管：25mL。 5.3.2.3.2 分析天平：感量0.1mg。 5.3.2.4 试验步骤 称取预先在105℃烘箱干燥至恒重的试样约0.2g（精确至0.0001g），加20mL冰乙酸（5.3.2.2.1） 溶解，加10mL乙酸酐（5.3.2.2.2）摇匀后，再加结晶紫指示液（5.3.2.2.3）2滴，用高氯酸标准滴定溶液 （5.3.2.2.4)滴定至溶液呈蓝绿色，同时做空白试验 5.3.2.5试验数据处理 试样中甜菜碱的含量2以质量分数（%）表示，按式（2）计算 C2(Vz-V20)M2 2= X 100 .( 2 ) m2×1000 式中： C2 高氯酸标准滴定溶液的浓度，单位为摩尔每升（mol/L）； V2 滴定试样时消耗高氯酸标准滴定溶液的体积，单位为毫升（mL）； 4 GB7300.203—2020 V20——空白试验消耗高氯酸标准滴定溶液的体积，单位为毫升（mL）； m2——试样的质量，单位为克（g）； M²——甜菜碱的摩尔质量，单位为克每摩尔（g/mol)（M=117.15）。 5.3.2.6 结果表示 测定结果用平行测定的算术平均值表示，结果保留三位有效数字。 5.3.2.7重复性 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不大于0.2%。 5.4干燥失重 5.4.1仪器设备 5.4.1.1 电热干燥箱：温度可控制为105℃土2℃。 5.4.1.2 干燥器：用氯化钙或变色硅胶作干燥剂。 5.4.2测定步骤 称取试样约1g（精确至0.0001g）于已恒重的称样皿中，放入105℃土2℃电热干燥箱（5.4.1.1） 中，打开称样皿盖，干燥3h。取出后盖好，放入干燥器中（5.4.1.2），冷却至室温，称重。再重复干燥1h 称量至恒重。 5.4.3试验数据处理 试样的干燥失重w以质量分数（%）表示，按式（3)计算： m30-m3 W3= X100 ...(3) m30 式中： m3o——干燥前试样的质量，单位为克（g）