ICS 11.020 C50 WS 中华人民共和国卫生行业标准 WS/T 342—2011 红细胞比容测定参考方法 Referencemethodforhematocrit 行业标准信息服务平台 2011-09-30发布 2012-04-01实施 中华人民共和国卫生部 发布 WS/T342—2011 前 言 本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。 本标准由卫生部临床检验标准专业委员会提出。 本标准主要起草单位：卫生部临床检验中心。 本标准主要起草人：彭明婷、谷小林、李臣宾、施丽飞、陆红、申子瑜。 行业标准信息服务平台 I WS/T342—2011 红细胞比容测定参考方法 1范围 本标准规定了红细胞比容测定参考方法的技术要求。 本标准适用于建立并运行红细胞比容测定参考方法的实验室。 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 2. 1 红细胞比容hematocrit，HCT 一定体积的全血中红细胞所占容积的相对比例。 2.2 参考方法 referencemethod -种可清楚和准确描述的用于特定检测的技术，该技术要有依据，可提供足够准确和精密的实验数 据以评价其他实验方法检测结果的有效性。若有决定性方法，参考方法的准确性应与决定性方法进行 比较，并且须标示不准确度和不精密度 2. 3 微量比容法 microhematocritmethod 应用少量全血、毛细管和高速离心机来测定红细胞比容的方法。 2. 4 相对离心力 relativecentrifugalfield,RCF 在离心力场中，作用于颗粒的离心力相当于地球重力的倍数，用重力加速度g”表示。 3总则 为了保证参考方法测定结果的准确性，建立参考方法的实验室应与其他参考实验室进行结果比对。 4一般技术要求 4.1设备与器具 4.1.1微量比容测定离心机 应使用专用的微量比容测定离心机，半径大于8cm；能在30s内达到最大速度离心机转子边缘 RCF能维持10000g15000g，离心时间至少为5min；配有一个经校准的自动定时器，最大刻度应不 小于5min，且每隔30s都标有刻度。 4.1.2红细胞比容测定参考方法专用毛细管规格 4. 1.2. 1 材质：钠钙硅酸盐玻璃； 1 WS/T 342—2011 4.1.2.2 2长度：75mm±0.5mm； 4.1.2.3内径：1.155mm±0.085mm； 4.1.2.4管壁厚度：0.18mm~0.23mm，推荐为0.20mm； 4.1.2.5毛细管要直，管孔的内径的变化不能超过内径的2%。 4.1.3显微镜 选用一台带有台式游标卡尺的光学显微镜，要求配有4×或10×物镜以及带十字标示的目镜。此 种测量仪器可获得准确的测量值（准确到0.1mm）。 4.1.4密封剂 推荐使用黏土样的密封剂。不得使用加热方法为毛细管封口。 4.1.5毛细管固定架 用一块标准的载玻片（25mm×75mm）固定于另一块大的载玻片（50mm×75mm）上，制成毛细 管固定架。 4.2血液标本的采集 应使用带有抗凝剂的真空管采集血液标本。推荐抗凝剂为EDTA·K，（终浓度为1.4mg/mL～ 2.0mg/mL），也可用EDTA·K，（终浓度为1.6mg/mL~2.4mg/mL），摩尔浓度均为3.7μmol/mL~ 5.4μmol/mL。血液加人抗凝管后，管内剩余空间至少占试管体积的20%。标本置于22℃土4℃条件 下，如使用EDTA·K3，应在3h内完成测定，使用EDTAK，可在6h内完成测定，避免红细胞体积 随时间延长而膨胀产生的误差。标本采集应避免红细胞溶血。 5测定步骤 5.1将标本颠倒8次，使其充分混匀。 5.2取两根长75mm的毛细管，各充人血液至管长的2/3~3/4处，每根毛细管大约需要50μL血。 用柔软且有吸水性的材料擦净管外壁，水平倾斜毛细管，使吸人血柱的下端与毛细管口的距离至少为 5mm. 5.3将毛细管垂直插人专用的密封剂里，轻轻旋转毛细管，从密封剂中取出。插入毛细管中封口剂的 长度不少于4mm，仔细观察封口，确保封口平整，且与毛细管长轴垂直。 5.4将封口的毛细管放人离心机，封口端朝向离心机转子的边缘。在毛细管对面，放置另一根毛细管， 记录位置编号。拧紧转头的盖子。 5.5在RCF10000g~15000g条件下离心5min。 5.6在离心机自动停止后，从离心机中取出毛细管，读数前垂直放置，应在60min内读取结果 5.7于显微镜下观察每根毛细管，确定界面位置用于计算红细胞比容结果。 5.7.1先将毛细管固定在固定架上，再将毛细管固定架置于载物台上。在视野里，确保架子和毛细管 呈水平摆放，通过水平移动载物台进行观察， 5.7.2在低倍镜下观察每一支毛细管，用游标卡尺标注下列界面读数： a) 红细胞/黏土； b）红细胞/白细胞； c）血浆/空气。 5.8通过5.7.2中的界面读数来计算红细胞比容HCT，见式（1）。 2