WS 中华人民共和国卫生行业标准 WS/T50-1996 尿中苯酚的气相色谱测定方法 （二）FFAP柱法 Urine-Determination of phenol-Gas chromatographic method- IFFAP column 行业标准信息服务平台 1996-10-14发布 1997-05-01实施 中华人民共和国卫生部 发布 中华人民共和国卫生行业标准 尿中苯酚的气相色谱测定方法 （二）FFAP柱法 WS/T50-1996 Urine-Determination of phenol-Gas chromatographic method IFFAP column 1主题内容与适用范围 本标准规定了尿中酚的气相色谱测定方法 （二)FFAP柱法。 本法最低检测浓度为1.5mg/L。 本标准适用于正常人和接触苯工人尿中苯酚的测定。 2原理 尿样加盐酸加热，使结合态的酚水解，乙醚萃取，经FFAP柱将尿中苯酚及人体正常代谢物对甲酚 分离。用氢焰离子化检测器检测。以保留时间定性，外标法峰高定量。 3仪器 3.1气相色谱仪，氢焰离子化检测器。 3.2电热恒温水浴。 3.3冰壶。 3.4容量瓶，10mL，50mL。 业标准信息服务平台 3.5具塞离心管，10mL。 3.6聚乙烯塑料瓶，150mL。 3.7尿比重计。 4试剂 本法所用试剂除另有说明者外，均为分析纯试齐 4.1实验用水：为经全玻璃蒸馏器蒸馏的水。 4.2盐酸，Pzo=1.19g/mL。 4.3无水乙醚，用前重蒸。 4.4固定相：FFAP（改性的聚乙二醇）。 4.5载体：ChromosorbWHP，80100目。 4.6苯酚。 4.7苯酚标准溶液：称取苯酚0.0125g溶于少量无水乙醚中，将此溶液定量转移至50mL容量瓶中， 用无水乙醚稀释至刻度。此标准溶液1mL=0.25mg苯酚。 4.8质控样：用加标的模拟尿、接触者混合尿或加标的正常人混合尿作质控样 中华人民共和国卫生部1996-10-14批准 1997-05-01实施 1 WS/T50-1996 5采样、运输和保存 用聚乙烯塑料瓶收集班末尿约50mL，尽快测定比重，于室温下运输，但夏季运输需要冷藏，于 一8℃下可保存一周。 6分析步骤 6.1仪器操作条件 色谱柱：柱长2.5m，内径3mm，玻璃柱。 固定液：载体=10：100。 柱温：165℃。 汽化室温度：180℃。 检测室温度：180℃ 载气：氮气，45mlmin 6.2空白试验 用模拟尿按 6.3条处理、6.5条测定 6.3样品处理 取5mL尿样于具塞试管中，加入1mL盐酸，于90C水浴中加热水解1h。 取出放冷加水稀释至 10mL。置冰浴中冷至0℃，加人3mL乙醚，振摇1min萃取，静置分层，将乙酵层补足至体积为3mL， 必要时离心。 6.4标准曲线的绘制 取3只10mL容量瓶，按下表配制标准管 苯酚标准管的配制 2 3 苯酚标准溶液（4.7）mL 1.2 2.0 乙醚，mL 9.4 8.8 8.0 苯酚含量，ug 15 30 50 取2μL上述标准管中溶液，进气相色谱仪测试。以苯酚的含量（ng）为横坐标，峰高（mm）为纵坐标， 绘制标准曲线。 6.5样品测定 取2μL经处理的样品乙醚液（6.3），进气相色谐仪测试见图1。根据测得的苯酚峰高值查标准曲 线（6.4），再根据公式（1）、（2）进行计算，得标准比重下的尿酚浓度。 服务平台 2 WS/T50-1996 min 图接触者尿酚气相色谱图 1-苯酚253.4mg/L，2-对甲酚 7计算 7.1按式（1)计算尿样换算成标准比重（1.020）下的浓度校正系数k。 1.020-1.000 R= (1) 实测比重一1.000 7.2按式（2)计算尿中酚的浓度， （2） a 式中：X一 尿中酚的浓度，mg/L； 息服务平台 由标准曲线查得的苯酚含量，ng， 进样量，μL； 乙醚提取液体积，mL， V- 尿样体积，mL。 8说明 8.1 本法最低检测浓度为1.5mg/L（取尿样5mL）；标准曲线线性范围0~50mg/L，精密度 CV=3.3%~5.4%（酚浓度为15~50μg/mL，n=6），加标回收率为82.8%~87.0%（尿样本底浓度 25.2~116.4μg/mL，加标量34.5~69mg/L，n=2）。 8.2一般对正常人取晨尿分析，对接触者取班末尿分析。采样时应注意防止污染。采样后须将塑料瓶 盖旋紧，并尽快运输，以避免苯酚的挥发及氧化。 8.3影响测定的因素 3