ICS 67.050 SN C 53 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 5146—2019 准 出口食品中左旋肉碱的测定 高效液相色谱和液相色谱-质谱/质谱法 业标准信息服务平台 2019-10-25发布 2020-05-01实施 中华人民共和国海关总署 发布 SN/T5146—2019 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草 请注意本文件的某些内容可能涉及专利，本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 和国上海海关。 本标准主要起草人：于玥、徐敦明、丁亦男、张欣、郭卫军、丁慧、王传现、伊雄海、邓晓军。 标准信息服务平台 SN/T 5146—2019 出口食品中左旋肉碱的测定 高效液相色谱和液相色谱-质谱/质谱法 1范围 本标准规定了出口食品中左旋肉碱的高效液相色谱和液相色谱-质谱/质谱测定方法。 本标准适用于乳粉，饮料等食品中左旋肉碱的测定 注：若样品中存在右旋肉碱，液相色谱-质谱/质谱法的测定结果为左旋肉碱和右旋肉碱的总和。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件， 日期的版本适用于本文 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法（GB/T6682,neqISO3696：1987) 3方法提要 出版文 试样中的左旋肉碱经稀盐酸提取，皂化后使结合态的左旋肉碱游离出来。阳离子交换固相萃取柱 净化，在氯甲酸丁酯、三乙胺的催化下与丙酰胺-β-萘胺发生取代反应，生成紫外吸收较强的化合物， 供配有二级管阵列检测器或紫外检测器的高效液相色谱仪测定，外标法定量。 4试剂和材料 息服务平台 除特殊注明外，所有试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水 4.1乙：色谱纯。 甲醇：色谱纯。 4.3氨水：分析纯。 4.4 盐酸：优级纯。 4.5 氢氧化钾：分析纯。 4.6 三氯甲烷：分析纯。 4.7 氯甲酸丁酯：分析纯。 4.8 三乙胺：分析纯。 4.9L-丙酰胺-β-萘胺：分析纯。 4.10 碳酸氢钠：优级纯。 4.11 磷酸二氢钾：优级纯。 4.12 磷酸：优级纯。 4.13 1mol/L盐酸溶液：取90mL盐酸（4.4），加水定容至1000mL。 4.14 0.1mol/L盐酸溶液：取9mL盐酸（4.4），加水定容至1000mL 1 SN/T 5146—2019 4.1510mmol/L盐酸溶液：取10mL0.1mol/L盐酸溶液（4.14），加水定容至100mL 4.161mol/L氢氧化钾溶液：取56g氢氧化钾（4.5），加水定容至1000mL。 4.174%氨水甲醇溶液：取4mL氨水（4.3）用甲醇（4.2）定容至100mL。 4.18混合型阳离子交换固相萃取柱（Mixed-modecationionexchangeSPE）：OasisMCXl>3mL， 60mg或相当者。使用前依次用3mL甲醇（4.2）、3mL水和3mL10mmol/L盐酸（4.13）对柱子进行 活化。 4.19衍生试剂：称取0.45gL-丙酰胺-β-萘胺，加乙腈溶解并定容至100mL。 4.20催化剂I：称取0.50g三乙胺，加三氯甲烷（4.5）混匀定容至100mL。 4.21 催化剂Ⅱ：称取0.50g氯甲酸丁酯，加三氯甲烷（4.5）混匀定容至100mL。 4.22 50mmol/L碳酸氢钠溶液：称取0.42g碳酸氢钠（4.9），加水溶解并定容至100mL。 4.23 50mmol/L磷酸二氢钾缓冲溶液（pH2.8）：称取6.80g磷酸二氢钾，用1000mL水溶解，用磷酸 调节pH值到2.8。 4.24乙腈溶液（90+10）（/v）：量取90mL乙腈和10mL水，混合均匀。 4.25标准品：左旋肉碱（L-carnitine），CAS号：541-15-1，纯度大于98%。 4.26左旋肉碱标准储备液：准确称取适量的标准物质（4.25），用乙睛浴液（4.24）配置成浓度为 1mg/mL的标准储备液。4℃以下避光保存。 稀释至刻度。配置成浓度为10.0μg/mL的标准工作溶液。4℃以下避光保存。 4.280.22μm水系微孔滤膜。 5仪器和设备 检测器。 5.2分析天平：感量为0.01g和0.1m 5.3旋涡混合器。 标准信息服务平台 5.5 5.6 固相萃取装置。 5.7 氮吹浓缩仪。 5.8 超声波清洗器。 恒温水浴锅。 5.10 pH计:0.01 pH。 6 试样的制备与保存 6.1试样制备 取有代表性样品约500g，混合均匀，装入洁净容器内密封并做好标识。 6.2试样保存 试样于4℃冰箱内保存。制样和样品保存过程中，应防正样品受到污染和待测物损失。 1）1非商业性声明：本标准采用的固相萃取柱为Waters公司产品，此处列出仅为提供参考，并不涉及商业目的，鼓 励标准使用者尝试不同厂家的固相萃取柱。 2