ICS 67.120 SN B 45 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 5117—2019 进出口食用动物、饲料 链霉素类 （链霉素、二氢链霉素）药物残留测定 液相色谱-质谱/质谱法 Determination of streptomycin, dihydrostreptomycin residues in live animals and feeds for import and export-HPLC MS/MS method 业标准信息服务平台 以 2019-09-03发布 2020-03-01实施 中华人民共和国海关总署发布 SN/T5117—2019 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准由中华人民共和国海关总署提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国大连海关、沈阳农业大学 本标准主要起草人：徐静，孙兴权，苏明明，田宏哲，杨璐，李一尘，肖珊珊，代弟，曹际娟 业标准信息服务平台 SN/T 5117—2019 进出口食用动物、饲料链霉素类 （链霉素、二氢链霉素）药物残留测定 液相色谱-质谱/质谱法 1范围 本标准规定了链霉素、二氢链霉素药物残留量的液相色谱-质谱/质谱测定方法。 本标准适用于猪、牛、羊、兔、鸡血清及猪、牛、羊、兔尿液，以及玉米粉、小麦粉、高梁粉饲料中链霉 素、二氢链霉素药物残留量的测定和确证。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本 文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3原理 定容后供液相色谱-质谱/质谱法测定，外标法定量 4试剂与材料 4.12 乙睛：高效液相色谱纯。 甲酸：高效液相色谱纯。 4.3 甲醇：高效液相色谱纯。 4.4 磷酸二氢钾（KH,PO）。 4.5 三氯乙酸。 4.6盐酸(HCI)。 4.7氢氧化钠(NaOH) 4.8氨水(NH·H,O) 4.9乙二胺四乙酸二钠盐（Na2·EDTA） 4.10提取液：10mmol/LKH,PO，溶液（含0.4mmol/LEDTA和2%三氯乙酸），称取2.72g KH,PO4，加人2L水，用1mol/LHCl溶液调节pH值为4.0，再加人0.3g乙二胺四乙酸二钠盐（含 2个结晶水）和40g三氯乙酸，混匀即可。 4.110.1%甲酸：取1.0mL甲酸溶于1L水中即可。 4.12链霉素标准物质：CAS号57-92-1，纯度98.0% 4.13双氢链霉素标准物质：CAS号128-46-1，纯度99.0%。 4.14标准储备溶液的配制：分别准确称取适量的标准物质，用水配制成100g/mL的标准储备溶液， 1 SN/T 5117—2019 置于一4℃避光保存，有效期1个月。 4.15混合标准溶液的配制：取适量标准储备溶液（4.14）至100mL容量瓶中，用水定容至刻度，配制成 混合标准溶液，各组分浓度均为1ug/mL。一4℃避光保存，有效期5天。 4.16标准工作溶液的配制：根据需要，吸取一定量的混合标准溶液（4.15），用空白基质提取液稀释至 所需浓度，临用现配。 4.17HLB固相萃取柱或相当者：60mg，3mL。使用前依次用3mL甲醇、5mL超纯水预洗活化 4.18滤膜：0.22μm，水相。 4.19 水：GB/T6682规定的一级水。 5 仪器和设备 5.1高效液相色谱串联二级质谱仪：配有电喷雾离子源（ESI）。 5.2电子天平：感量分别为0.01g0.0001g。 5.3离心机：转速8500r/min以上。 5.4涡旋震荡器。 5.5氮吹仪。 5.6 固相萃取装置。 5.7 pH计。 5.810mL塑料离心管。 6i 试样的制备与保存 6.1试样制备 出版文本为准 无菌采集待检动物非抗凝血（>8mL），分离血清于洁净容器内作为试样，加封并标明标记。尿液 样品（≥5mL）装入洁净容器内加封并标明标记。饲料样品（≥500g）经粉碎机粉碎，过20目筛，混匀， 密封，作为试样，标明标记。在制样的操作过程中，应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化 6.2试样保存 血清和尿液样品于一20℃以下条件下保存。饲料样品于常温下保存 息服务平 7 测定步骤 7.1提取 称取约2g（精确至0.01）样品于50mL具塞离心管中，准确加人8mL提取液（4.10），涡旋振荡提 取3min后，8500r/min离心5min，倾出上清液。重复提取一次，合并上清液。上清液用氨水（4.8）调 至pH3~4,待净化 7.2净化 将提取液转移到已活化的HLB固相萃取柱（4.17），流速控制在1d/s左右，用3mL水淋洗，弃去 流出液，用5mL甲醇（4.3）洗脱，洗脱液收集于10mL刻度塑料离心管（5.8）中，并于45℃氮气吹干，用 1mL水溶解残渣，过微孔滤膜（4.18）后，待上机检测。 2