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ICS 65.020 SN B 43 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 5114—2019 进出口食用动物、饲料氟苯尼考 (氟甲砜霉素)测定 液相色谱-质谱/质谱法 Determination of chloramphenicol in live animals and feed for import and exportLC-MS/MS 2019-09-03发布 2020-03-01实施 中华人民共和国海关总署发布 SN/T 5114—2019 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准由中华人民共和国海关总署提出并归口。 本标准起草单位:中华人民共和国天津海关。 本标准主要起草人:董志珍、李淑静、赵光洲、肖研、张永年、朱建民。 业标准信息服务平台 SN/T 5114—2019 进出口食用动物、饲料氟苯尼考 (氟甲霉素测定 液相色谱-质谱/质谱法 1范围 本标准规定了进出口食用动物、饲料中氟苯尼考的检测方法。 本标准适用于出人境检验检疫工作中动物血清(牛、羊、猪、鸡)、尿液(牛、猪、羊)和预混合饲料、配 合饲料、浓缩饲料中氟苯尼考的检测。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法。 GB/T14699.1—2005《饲料采样》 GB/T20195一2006《动物饲料试样的制备》 3方法原理 友文本为 谱测定。 4i 试剂和材料 业标准信息服 4.1 甲醇:色谱纯。 4.2 乙酸乙酯:色谱纯。 4.3 磷酸二氢钠:分析纯。 4.4 二氯甲烷:分析纯。 4.5 乙腈:色谱醇。 4.6 氢氧化钠:分析纯。 4.7 标准物质:氟苯尼考(参见附录A),纯度≥95%。 4.8标准储备液:0.1mg/mL。称取4.7所述标准物质,用甲醇配成0.1mg/mL的标准储备溶液, -15℃~-20℃保存。 4.9标准工作溶液:1.0μg/mL。吸取4.8所述标准储备溶液1mL于100mL容量瓶中,用甲醇定容 至刻度,2℃~8℃保存。 4.10pH7.0磷酸盐缓冲溶液:称取0.68g磷酸氢二钾、0.1164gNaOH溶于100mL水中。 4.1150mL具塞离心管。 4.120.22μm滤膜。 4.13 3水:GB/T6682规定的一级水。 5仪器和设备 5.1液相色谱-质谱质谱仪:配有电喷雾离子源。 1 SN/T 5114—2019 5.2天平:感量分别为0.01g和0.0001g。 5.3氮吹浓缩仪。 5.4高速冷冻离心机(最高转速可达10000r/min)。 6禾 样品的采集与保存 6.1血样的采集 采集动物血样,待自然凝固后离心分离取上清为血清,分装于小管,加盖密封。 6.2尿样的采集 采集动物尿样,于4℃,3000r/min离心10min后,上清液分装于小管,加盖密封。 6.3饲料的采集 样品的采集按照GB/T14699.1—2005的规定进行。样品的制备按照GB/T20195一2006的规定 进行。 6.4试样的保存 将分装后的血清、尿样于一15℃~一20℃保存。 7测定步骤 7.1提取 7.1.1血清试样 称取约0.50g血清(精确至0.01g)于15mL离心管中,再加入5.0mL乙睛,超声提取5min, 5000r/min离心5min,取上层清液(乙睛层),过0.22μm滤膜,待测。 7.1.2尿样 称取约1.00g尿样(精确至0.01g),加入适量氨水调节pH=9.5,再加入5.0mL二氯甲烷,涡旋 3min,5000r/min离心5min,取二氯甲烷层(下层)置于15mL离心管中40℃十1℃水浴氮吹至近 干,以1.0mL水复溶,过0.22μm滤膜,待测。 7.1.3饲料 称取约1.00g饲料(精确至0.01g),加人4.0mL磷酸盐缓冲溶液(4.10)加入10mL氨水碱化乙 酸乙酯(乙酸乙酯:氨水=98:2),涡旋3min,5000r/min离心5min,取乙酸乙酯(上层)置于50mL 离心管中,重复提取1次,合并两次提取液,40℃士1℃水浴氮吹至近干,以1.0mL水复溶,过0.22μm 滤膜,待测。 7.2工作曲线的配制 分别吸取10μL、50μL、100μL、200μL、500μL混合标准工作溶液(4.9),依次加人相应试剂瓶中, 用水定容至1.0mL,获得0.0lμg/mL、0.05μg/mL0.10μg/mL0.20μg/mL和0.50μg/mL的系列标 准溶液。 2
SN-T 5114-2019 进出口食用动物、饲料氟苯尼考(氟甲砜霉素)测定 液相色谱-质谱-质谱法
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