ICS 71.040.40 SN B 40 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 5118—2019 进出口食用动物、饲料中三聚氰胺残留测定 液相色谱-质谱/质谱法 Determination of melamine residues in live animal and feed for import and 2019-09-03发布 2020-03-01实施 中华人民共和国海关总署发布 SN/T5118—2019 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利，本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本标准由中华人民共和国海关总署提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国重庆海关、中华人民共和国南京海关。 本标准主要起草人：夏明星、李光满、陈宗祥、王凯民、吴杰、唐柏彬、王昱、胡硕、李应国。 业标准信息服务平台 SN/T5118—2019 进出口食用动物、饲料中三聚氰胺残留测定 液相色谱-质谱/质谱法 1范围 本标准规定了进出口食用动物、饲料中三聚氰胺残留量液相色谱-质谱/质谱检测方法。 本标准适用于进出口食用动物（如猪、牛、羊、兔、鸡、鸭）血液、尿液以及动物饲料中三聚氰胺的测定 和确证。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本 文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 GB/T14699.1饲料采样 GB/T20195动物饲料试样的制备 3方法提要 确证，内标法定量。 4试剂材料 信息服务平台 除非另有说明，所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。 4.1甲醇：高效液相色谱级。 4.2乙睛：高效液相色谱级。 4.3乙酸：高效液相色谱级。 4.4乙酸铵 4.5 50%甲醇水溶液（5+5，V/V）：量取500mL甲醇和500mL水，混匀 4.6 95%乙腈水溶液：取50mL水与950mL乙腈混匀。 4.7 5%乙酸溶液：取5mL乙酸溶于95mL水中。 4.85%氨水甲醇：取5mL氨水溶于95mL甲醇中。 4.9 酸性甲醇提取液：990mL50%甲醇水溶液（4.5）中加10mL乙酸混匀。 4.105mmol/L乙酸铵溶液：称取0.385g乙酸铵溶于1000mL水中。 4.11标准物质：三聚氰胺（Melamine，CAS号：108-78-1）、三聚氰胺同位素内标（15N3-Melamine，CAS 号：287476-11-3），纯度均大于98%。 4.12标准储备液：准确称取三聚氰胺标准品0.1g（精确到0.0001g），用50%甲醇水溶液（4.5）充分溶 解，稀释定容于100mL容量瓶中，配制成浓度为1.00mg/mL的标准储备溶液，将三聚氰胺同位素内 标标准品1mg，用50%甲醇水溶液（4.5）充分溶解，稀释定容于10mL容量瓶中，配制成浓度为 1 SN/T 5118—2019 0.100mg/mL的标准储备溶液，分别将定容后的标准储备液倒入棕色试剂瓶中，一18℃以下避光保存。 4.13标准中间储备液：准确移取100μL三聚氰胺标准储备液（4.12）和100μL三聚氰胺内标标准储备 液（4.12）于两个100mL容量瓶中，用乙睛稀释定容，分别配成1.00ug/mL的三聚氰胺标准溶液和 0.100μg/mL三聚氰胺同位素内标标准溶液，该溶液置于棕色试剂瓶中，一18℃以下避光保存。 4.14标准工作液：根据需要用95%乙睛水溶液（4.6）将标准中间储备液（4.13）稀释成合适浓度的混合 标准工作曲线溶液，参考线性浓度范围为5ng/mL～100ng/mL，三聚氰胺同位素内标浓度为2ng/mL 临用时现配。 4.15MCX固相萃取柱（60mg，3mL）l或相当者：使用前依次用3mL甲醇、3mL水和3mL5%乙酸 溶液（4.7)活化。 4.16微孔滤膜：有机系，0.22μm。 5仪器与设备 5.1液相色谱-质谱/质谱仪：配电喷雾离子源（ESI）。 5.2天平：感量为0.0001g和0.01mg。 5.3离心机：转速不低于8000r/min。 5.4旋涡混匀器。 5.5超声清洗器。 5.6固相萃取装置。 5.7氮吹仪。 6i 试样制备与保存 6.1试样采集制备 6.1.1饲料：按照GB/T14699.1采集代表性样品，按照GB/T20195制备。 6.1.2 血液：动物血液用肝素钠抗凝采血管收集，采集数量不得少于10mL，密封，并表明标记。 6.1.3 尿液：用洁净的离心管收集，采集数量不得少于10mL，充分搅拌均匀后，密封，并标明标记。 6.2试样保存 饲料样品常温保存，待检血液和尿液试样于4℃保存，留存血液和尿液试样于一18℃冷冻保存。 服务平 7分析步骤 7.1提取 （4.13，相当于三聚氰胺同位素内标质量为4ng）和20mL酸性甲醇提取液（4.9）旋涡混匀2min，超声提 取10min，以8000r/min10℃冷冻离心5min，取上清液10mL转移至15mL试管中，待净化 1）MCX固相萃取柱为Waters公司生产，给出这一条信息是为了给本标准使用者提供方便，而不是标准管理部门 对这一产品的认可。 2