ICS 67.120 SN B 45 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 5111—2019 进出口食用动物、饲料吡喹酮药物残留测定 液相色谱-质谱/质谱法 Determination of praziquantel residue in live animals and feed for import and export-LC-MS/MS method 2019-09-03发布 2020-03-01实施 中华人民共和国海关总署发布 SN/T 5111—2019 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准由中华人民共和国海关总署提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国大连海关。 本标准主要起草人：苏明明、徐静、张瑜、王偷、王刚 业标准信息服务平台 SN/T 5111—2019 进出口食用动物、饲料吡喹响药物残留测定 液相色谱-质谱/质谱法 1范围 本标准规定了进出口食用动物、饲料中吡喹酮药物残留液相色谱串联质谱检测和确证方法。 本标准适用于猪、牛、羊、马、鸡、鸭以及鹅的血清，猪、牛、羊、马的尿液及玉米粉饲料中吡喹酮残留 量的测定和确定。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本 文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T14699.1饲料采样 3原理 文本为 甲醇洗脱，定容后供液相色谱-质谱/质谱法测定，外标法定量 4 试剂与材料 4.1乙：高效液相色谱纯 标 4.2甲醇：高效液相色谱纯。 4.3乙腈+水（4+1,体积比）：300mL乙睛（4.1)与100mL水混合。 4.4吡喹酮标准物质：分子式：C19H2N2O2，分子量：312.41CAS#：55268-74-1，纯度均≥98%。 4.5标准储备溶液的配制：分别称取适量的标准物质，用乙睛配制成100μg/mL的标准储备溶液。 4.6混合标准溶液的配制：取适量标准储备溶液（4.5）至100mL容量瓶中，用乙睛定容至刻度，配制成 混合标准溶液，各组分浓度均为1ug/mL。 4.7标准工作溶液的配制：根据需要，吸取一定量的混合标准溶液（4.6），用空白样品提取液稀释至所 需浓度，临用现配。 4.8HLB固相萃取柱或相当者：500mg，6mL。使用前依次用3mL甲醇，3mL水活化。 4.9滤膜：0.22μm，有机相。 5 仪器和设备 5.1高效液相色谱串联质谱仪：配有电喷雾离子源（ESI）。 5.2电子天平：感量分别为0.01g，0.0001g。 5.3高速离心机。 5.4涡旋混合器。 SN/T 5111—2019 5.5旋转蒸发仪。 5.6固相萃取装置。 6i 试样的制备与保存 6.1血清制备 将采集到的血液样本于室温下避光静止过夜，离心，上层清液即为血清。转移血清至洁净容器内作 为试样，加封并标明标记。 6.2尿液制备 尿液样品装人洁净容器内加封并标明标记。制样过程中应防止试样受到微生物或化学物的污染或 发生残留变化。 6.3饲料制备 依据饲料种类分别选取常用的玉米粉饲料，装人洁净容器内加封并标明标记。 。制样过程中应防止 试样受到微生物或化学物的污染或发生残留变化。 6.4试样保存 血清样品和尿液样品于-5℃~-2℃条件下保存。饲料按GB/T14699.1采样。选取代表性饲 料样品至少500g，四分法缩减至100g，磨碎，全部通过40日目筛，混匀，装人密闭容器中并标明标记，避 光低温保存，备用。 7测定步骤 7.1提取 分别称取饲料约2g（精确至0.01g），量取血清、尿液2mL，于50mL具塞离心管中，加人20mL 乙睛-水溶液（4.3)高速震荡提取2min后，80001/min离心5min，移取乙睛层过滤至鸡心瓶中。再用 10mL乙-水（4.3）重复提取一次，合并乙腈层于同一鸡心瓶中。 7.2净化 将提取液于45℃下旋转蒸发至约5mL左右，混匀后转移到已活化的HLB固相萃取柱上，再用 2mL乙睛-水溶液（4.3）洗涤鸡心瓶两次，洗液一并转移到柱上，控制流速小于2mL/min。用3mL水 淋洗并抽干HLB柱，用3mL甲醇（4.2）洗脱并收集于10mL带刻度的玻璃管中（控制流速小于 2mL/min）。用乙睛定容至1.0mL，涡旋混合后，过0.22μm滤膜供LC-MS/MS分析。 7.3空白基质溶液的制备 分别取阴性的血清、尿液2mL和饲料样品2g，按7.1和7.2操作。 7.4测定条件 7.4.1 液相色谱参考条件 a) 色谱柱：C18,5μm，150X2.0mm（内径），或相当者； b) 色谱柱温度：30℃； 2