SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 4812—2017 进出口食用动物氨丙琳药物残留量的测定 液相色谱-质谱/质谱法 Determination of amprolium residues in live animal for import and export- LC-MS/MS method 行业标准信息服务平台 2017-07-21发布 2018-03-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T4812—2017 前言 本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国深圳出人境检验检疫局、深圳市检验检疫科学研究院。 本标准主要起草人：涂小珂、陈沛金、曾少灵、罗耀、岳振峰、胡运发、叶刚、康海宁。 行业标准信息服务平台 1 SN/T4812—2017 进出口食用动物氨丙啉药物残留量的测定 液相色谱-质谱/质谱法 1范围 本标准规定了兔、猪、牛、羊、鸡、鸭、鹅等进出口食用动物中氨丙啉药物残留量的液相色谱-质谱/质 谱检测和确证方法。 本标准适用于兔、猪、牛、羊、鸡、鸭、鹅的血液及兔、猪、牛、羊尿液中氨丙啉药物残留量的测定。 本标准适用于出人境检验检疫工作。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3方法提要 试样用乙腈沉淀蛋白后，经无水硫酸镁及氯化钠盐析分层，上清液用PSA吸附剂和石墨化炭黑萃 取净化，吹氮浓缩后用流动相溶解，液相色谱-质谱/质谱仪测定，外标法定量。 4 试剂材料 除另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。 4.1甲醇：色谱纯。 业标准 4.2 甲酸：色谱纯。 4.3乙腈：色谱纯。 4.4 乙酸铵：色谱纯。 4.50.005mol/L乙酸铵溶液（含0.1%甲酸）：准确称取0.3854g乙酸铵（4.4），用水溶解并转移至 1000mL容量瓶中，加入1.00mL甲酸（4.2），用水定容至刻度。 4.6乙酸铵溶液-甲醇溶液（9：1体积比）：准确量取90mL乙酸铵溶液（4.5）至100mL容量瓶中，加 人甲醇（4.1），定容至刻度 4.7无水硫酸镁：550℃灼烧4h，干燥器内冷却至室温，贮于密封瓶中备用。 氯化钠：优级纯。 4.9 乙二胺-N-丙基硅烷（PSA）吸附剂。 4.10石墨化炭黑。 4.11标准物质：盐酸氨丙啉（amproliumhydrochlorideCAS：137-88-2），纯度大于98%。 4.12标准储备溶液：准确称取适量标准物质（4.11），以甲醇溶液配制氨丙啉浓度为1000μg/mL的标 准溶液，一18℃避光保存 4.13标准工作溶液：移取适量的标准储备溶液（4.12），以甲醇配制浓度为10μg/mL的标准溶液，4℃ 1 SN/T4812—2017 避光保存，可使用1个月。 4.14微孔滤膜：0.22μm，水系。 5仪器和设备 5.1 液相色谱-质谱/质谱仪：配有电喷雾离子源（ESI）。 5.2电子天平：感量0.0001g、0.001g和0.1g。 5.3离心机：10000r/min。 5.4氮吹浓缩仪。 5.5旋涡混匀器。 5.6移液器：量程10μL~100L100μL~1000μL和1000μL~5000μL。 5.7聚丙烯离心管：15mL，具塞。 6试样的制备与保存 血浆：将新鲜血液采集后加入含抗凝剂的试管中，混匀，10℃以下，5000r/min离心10min，取血 浆备用；尿液：5000r/min离心去除沉淀物，取上清液备用。 血浆、尿液试样均分为两份，装人洁净容器，密封，并标明标记，于一18℃以下冷冻存放。 在制样操作过程中，应防止样品被污染或残留物含量发生变化。 7测定步骤 7.1提取 吸取1mL试样于15mL聚丙烯离心管中，加人2.5mL乙睛（4.3），涡旋混匀1min，再加人0.5g 后再加人2.5mL乙睛，涡旋1min，10000r/min离心5min，合并两次提取的上清液并用乙睛定容到 5 mL。 7.2净化 上清液加50mg乙二胺-N-丙基硅烷（PSA）（4.9），如血液样品色素过重再加入10mg石墨化炭 黑（4.10），涡旋1min，静止10min。准确吸取2.5mL上清液于氮吹浓缩仪40℃吹氮浓缩至近干，加 人1mL0.005mol/L乙酸铵溶液（含0.1%甲酸）甲醇（9：1，体积比）（4.6），涡旋混勾1min，过 0.22μm水系滤膜，液相色谱-质谱/质谱仪测定。 7.3标准工作溶液的制备 取空白样品，按7.1和7.2操作，制备空白样品提取液。吸取适量标准工作溶液（4.13）.用空白样品 提取液配制一系列标准工作溶液，质量浓度为2μg/L、5μg/L、10μg/L、20μg/L，、50μg/L、100μg/L。 7.4测定 7.4.1液相色谱条件 液相色谱条件如下： a)t 色谱柱：Cis色谱柱，2.1mm×150mm（内径），1.7μm，或相当者； 2