SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T4583—2016 出口动物源食品中氨丙啉残留量的测定 液相色谱-质谱/质谱法 Determination of amprolium residues in animal origin foods for export- LC-MS/MS method 行业标准信息服务平台 2016-08-23发布 2017-03-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T4583—2016 前言 本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准负责起草单位：中华人民共和国河北出入境检验检疫局。 本标准主要起草人：马育松、窦彩云、艾连峰、陈瑞春、段永生、葛世辉。 行业标准信息服务平台 1 SN/T4583—2016 出口动物源食品中氨丙琳残留量的测定 液相色谱-质谱/质谱法 1范围 本标准规定了出口动物源食品中氨内嘛残留量的液相色谱-质谱/质谱测定方法 本标准适用于鸡肉、鸡肝、鸡肾、鸡蛋、牛肉、牛肝、牛肾、牛脂肪和牛奶中氨丙啉残留量的测定和 确证。 2规范性引用文件 2 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3方法提要 试样中的氨丙啉用1%三氯乙酸-乙睛溶液（3十7，体积比）提取，经HLB固相萃取柱净化，用液相 色谱-质谱/质谱测定，外标法定量。 4试剂和材料 除另有规定外，所有试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。 4.12 乙腈，色谱纯。 业标准信 4.2 甲醇，色谱纯。 4.3 甲酸，色谱纯。 4.4 正已烷，色谱纯。 4.5 乙酸铵，色谱纯。 4.6 三氯乙酸。 4.7 1%三氯乙酸溶液：称取10g三氯乙酸（4.6)溶解于1000mL水中，混匀。 4.81%三氯乙酸-乙腈溶液（3+7.体积比）：量取300mL1%三氯乙酸溶液（4.7），700mL乙腈，混匀。 4.9含0.1%甲酸的0.005mol/L乙酸铵溶液：称取0.39g乙酸铵（4.5）适量水溶解，加1mL甲酸 （4.3），用水稀释并定容至1000mL。 4.10定容液：量取40mL的含0.1%甲酸的0.005mol/L乙酸铵溶液（4.9）60mL乙，混匀。 4.11盐酸氨丙啉标准物质：AmproliumhydrochlorideCiuH2oCl,N4，CAS号：137-88-2，纯度大于或等 于95%。 4.12标准储备液：准确称取11.3mg盐酸氨丙啉标准物质（精确至0.1mg），用约2mL水溶解后乙睛 定容至100mL，配成溶液浓度以氨丙啉计为100μg/mL的标准储备液。 4.13标准中间液：准确吸取1.0mL标准储备溶液（4.12）于100mL容量瓶中，以乙睛稀释并定容至刻 度，溶液浓度相当于1ug/mL。 1 SN/T4583—2016 4.14基质标准工作液：吸取适量标准中间液，用空白样品基质配成0ng/mL、10ng/mL、20ng/mL、 50ng/mL、100ng/mL，500ng/mL的标准工作液，临用前配制 4.15二乙烯基苯-N-乙烯基吡咯烷酮聚合物（HLB)固相萃取小柱：500mg，6mL，或相当者。使用前 用6mL甲醇，6mL水预处理，保持柱体润湿。 4.16微孔滤膜：0.22μm，有机系。 5仪器和设备 5.1液相色谱-质谱/质谱仪：配有电喷雾离子源（ESI）。 5.2分析天平：感量为0.01g和0.1mg。 5.3均质器，转速不小于15000r/min。 5.4离心机，转速不小于5000r/min。 5.5涡旋振荡器。 5.6 氮气吹干仪。 5.7具塞塑料离心管，50mL。 比色管，50mL。 6样品制备和保存 6.1 1制样要求 制样操作过程中应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化 6.2肌肉、肝脏、肾脏、鸡蛋、脂肪 取样品中有代表性的可食部分约500g，用粉碎机粉碎，装人洁净容器作为试样，密封并做好标识， 于一18℃冰箱内保存。 6.3牛奶 从所取全部样品中取出有代表性样品500mL，充分混匀，装人洁净容器中，密封，并标明标记，于 标准信息服 4℃以下冷藏存放 7测定步骤 7.1提取 称取试样约5g（精确到0.01g）于50mL塑料离心管中，加人20mL1%三氯乙酸-乙腈溶液（4.8）， 15000r/min均质提取1min，5000r/min离心5min，上清液转移至50mL比色管中（5.8），残渣再用 20mL三氯乙酸-乙睛溶液重复提取一次，合并提取液于比色管中，定容至刻度，混匀。提取液经滤纸过 滤后待净化。 7.2净化 分取10mL提取滤液（7.1），于45℃氮气吹至约3mL，加入2mL正已烷（4.4），涡旋振荡30s， 5000r/min离心5min，弃去正已烷层，下层溶液以小于2mL/min流速过HLB柱（4.15），3mL水洗 涤样品管后上柱，再用6mL水淋洗小柱，抽干10min，以6mL甲醇洗脱并收集，洗脱液在45℃氮气吹 2