SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 4532.1—2016 商品化试剂盒检测方法 β-内酰胺类 方法一 Commercial kit methodBeta-lactamsTest method I 行业标准信息服务平台 2017-02-01实施 2016-06-28发布 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T4532.1—2016 前言 本部分为SN/T4532《商品化试剂盒检测方法β-内酰胺类》的第1部分。 本部分按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本部分由中华人民共和国北京出入境检验检疫局、中国农业大学、维德维康生物技术有限公司负责 起草。 本部分主要起草人：刘萤、沈建忠、李向梅、温凯、张朝晖、刘旭辉、崔凤云、吴小平、江海洋。 行业标准信息服务平台 1 SN/T4532.1—2016 商品化试剂盒检测方法 B-内酰胺类 方法一 1范围 SN/T4532的本部分规定了出口原奶中β-内酰胺类抗生素的检测方法。 本部分适用于原奶中青霉素G、阿莫西林、氨苄西林、氯唑西林、萘呋西林、苯唑西林、头孢哌酮、头 孢西林、头孢喹、头孢唑林、头孢噻呋等11种β-内酰胺类抗生素的快速检测。 2 方法提要 本方法的测定原理基于胶体金免疫技术。微孔中含有金标受体蛋白，试纸条胶体金的检测区（T 区）和质控区（C区）分别包被有抗原和受体蛋白抗体。当样品中含有β-内酰胺类抗生素时，会与检测区 包被的抗原竞争结合金标受体蛋白，检测区不显色，颜色较浅或相等；反之若样品中不含有β-内酰胺类 抗生素时，金标受体蛋白到达检测区形成一条颜色较深的红色条带。检测区显色的强度与样品所含药 物浓度成反比，检测区浅于或等于控制区为阳性；检测区深于控制线为阴性，控制区不全或没有颜色为 无效检测。 3试剂和材料 β-内酰胺类抗生素快速检测试纸条包括了检测试纸条和金标微孔。 4仪器和设备 4.1 4.3计时器。 5操作步骤 5.1样品要求 避免使用结块或感官性状有问题的液态奶，待测奶样应冷藏保存，保存时间不得超过4d。 5.2测定步骤 打开温育器，设置温度至50℃，温度稳定后待用；取出金标微孔，置于平整的台面上，取200uL待 检试样于微孔中，缓慢、充分混勾；将加人试样溶液后的金标微孔放置于50℃温育器中，孵育3min；取 出试纸条插人孵育后的金标微孔中，并将其置于50℃温育器中，孵育3min，取出试纸条，10min内判 1）给出该信息是为了方便本部分的使用者，并不表示对某一产品操作步骤的认可。如果其他产品的操作步骤有 不同，需经实验评估后采用。 1 SN/T 4532.1—2016 读结果。 有试剂的温度均应回升至室温后方可使用。 6 结果判定 6.1 阴性：试纸条上检测区（T）与质控区（C）各出现一条红色条带，且检测区（T）条带颜色较深（参见 图 A.1)。 6.2阳性：试纸条上仅在质控区（C)出现一条红色条带，检测区（T)不出现色带，或检测区（T)出现与质 控区（C)相比颜色较浅、颜色相当的红色条带（参见图A.2）。 6.3无效：质控区（C)未见红色条带（参见图A.3）。此情况下，应重新检测。 7 检测限 11种β-内酰胺类抗生素的检测限详见表1。 表 1检测限 检测物 检测限/(μg/L) 青霉素G 2. 阿莫西林 4. 氨芋西林 4 氯唑西林 6 蔡峡西林 8 苯唑西林 10 头孢哌酮 6 头孢西林 8 头孢喹肘 10 头孢唑林 50 头孢噻味 100 8报告方法 8.1胶体金检测结果为阴性：报告为“结果阴性” 8.2 2胶体金检测结果为阳性：报告为“结果阳性”。胶体金检测结果为初筛阳性的样品，应以液相色谱 质谱/质谱方法对结果进行确证。 2