SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 4521—2016 出口番茄酱中链霉素和双氢链霉素的测定 液相色谱-质谱/质谱法 Determination of streptomycin and dihydrostreptomycin residues in tomato paste for export-LC-MS/MS method 行业标准信息服务平台 2017-02-01实施 2016-06-28发布 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T4521—2016 前 言 本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国新疆出人境检验检疫局、中华人民共和国浙江出入境检验检 疫局。 本标准主要起草人：巩志国、季新诚、苏敏、李世雨、谢文、王静静、齐冬琴、叶青。 行业标准信息服务平台 1 SN/T4521—2016 出口番茄酱中链霉素和双氢链霉素的测定 液相色谱-质谱/质谱法 1范围 本标准规定了番茄酱中链霉素和双氢链霉素的测定一一液相色谱-质谱/质谱法。 本标准适用于番茄酱中链霉素和双氢链霉素残留量的测定 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和实验方法 3方法提要 采用磷酸盐缓冲溶液提取链霉素和双氢链霉素，经硅藻土吸附和串联双柱固相萃取净化相结合的 处理方法净化，用液相色谱-质谱/质谱仪进行测定和确证，外标法定量。 4 试剂和材料 除特殊注明外，所有试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。 4.1甲醇和乙睛：色谱级。 甲酸：纯度98%，色谱级 磷酸：优级纯。V 4.4 乙二胺四乙酸二钠。 4.5 盐酸：优级纯。 4.6 磷酸二氢钾。 磷酸盐缓冲溶液（pH=4.8：称取1.36g的磷酸二氢钾（KH,PO,）溶解到950mL水中，用 1mol/L的盐酸（HCI)调节pH为4.8，然后加人0.15g的乙二胺四乙酸二钠，充分溶解，最后用水去定 容到1000mL。 4.83%的甲酸甲醇溶液：取3.0mL的甲酸，用甲醇定容至100mL。 4.91mol/L的盐酸：取8.5mL的盐酸，用水定容至100mL。 4.10 乙-水（50+50，体积比，含0.1%甲酸）：量取50mL水和50mL乙晴混匀，并加入0.1mL 甲酸。 4.110.15%的甲酸溶液：量取1.5mL甲酸，用水定容至1L。 4.1250%甲醇水溶液：量取50mL水和50mL甲醇混匀。 4.13标准品：链霉素（Streptomycin）（CAS号57-92-1）和双氢链霉素（Dihydrostreptomycin）（CAS号 128-46-1)；纯度：>98%。 4.14标准储备液：称取适量4.13标准品（精确至0.1mg），用0.3%的甲酸水配制成500mg/L的储备 1 SN/T4521—2016 液，于0℃～4℃冰箱中避光保存。 4.15标准工作液：根据需要用空白样品溶液将标准储备液稀释成：0.05mg/L，0.10mg/L， 0.20mg/L，0.40mg/L，0.80mg/L的标准系列工作溶液。现用现配。 4.16固相萃取柱：反相固相萃取柱1:Strata-X（500mg/6mL）或HLB（200mg/6mL）和弱阳离子交 换固相萃取2:Strata-X-CW（200mg/6mL)或WCX(150mg/6mL)。 4.17再生纤维素微孔滤膜：0.2μm。 4.18硅藻土（40μm~60μm）。 5 仪器和设备 5.1 液相色谱-质谱/质谱仪，配有电喷雾离子源（ESI）。 5.2 pH计。 5.3固相萃取装置（SPE)。 5.4分析天平：感量为0.1mg和0.01g。 5.5振荡器。 5.6超声仪。 5.7离心机。 5.8涡旋仪。 5.9 氮吹仪。 6试样制备和保存 从所取全部样品中取出有代表性样品约500g，混合均匀，均分成两份，分别装人洁净容器作为试 样，密封，并标明标记。将试样于一18℃冷冻保存 在抽样和制样的操作中，应防止样品污染或发生残留物含量的变化。 行业标准信 7测定步骤 7.1样品处理 7.1.1提取 称取5.00g样品，加人提取液磷酸盐缓冲溶液（4.7）于样品中，定容至20mL。涡旋仪上涡旋 1min，超声30min，以8000r/min离心10min，离心后的上清液待后续净化。 7.1.2初净化 取10.0mL7.1.1中离心后的上清液于15mL的离心管中，同时往离心管中加人1.0g的硅藻土， 充分涡旋1min，超声5min，以6000r/min离心10min，离心后的上清液待再净化。 7.1.3串联双柱再净化 活化溶液全部流出后，用固相萃取柱转接头串接好反相柱（在上部：柱1）和弱阳离子交换柱（在下部： 柱2），取7.1.2中离心后待净化的上清液4.0mL加人柱1中，控制流速约为1.0mL/min通过两串接的 2