SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 4671—2016 进出口棉花中草甘膦及其代谢物 残留量的测定 液相色谱-质谱/质谱法 Determination of glyphosate and its metabolite residue in cotton for import and export- Liquid chromatography-tandem mass spectrometry method 行业标准信息服务平台 2016-12-12发布 2017-07-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T4671—2016 前言 本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国浙江出人境检验检疫局检验检疫技术中心、中华人民共和国浙江 出入境检验检疫局丝类检测中心。 本标准主要起草人：黄超群、谢文、陆勋元、董锁拽、吴娟、童赞恺、谢韵第、何建敏。 行业标准信息服务平台 1 SN/T4671—2016 进出口棉花中草甘麟及其代谢物 残留量的测定 液相色谱-质谱/质谱法 1范围 本标准规定了进出口棉花中草甘麟及其代谢物氨甲基麟酸农药残留量的液相色谱-质谱/质谱仪 方法。 本标准适用于棉花中草甘麟及其代谢物氨甲基麟酸的测定和确证。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3原理 定量。 4试剂和材料 除特殊注明外，所用试剂均为色谱纯，所用水为符合GB/T6682规定的一级水。 4.1甲醇。 4.3乙酸铵。 4.4 硼酸钠：分析纯。 苏甲氧羰酰氯（FMOC-CI)：纯度不低于97.0%，低于5℃保存。 4.6 乙酸铵溶液：5mmol/L，称取0.39g乙酸铵（4.3），用水溶解并定容至1000mL。 硼酸盐缓冲溶液：5%，称取5g硼酸钠（4.4），用水溶解并定容至100mL。 4.8 FMOC-Cl丙酮溶液：20g/L，称取0.2gFMOC-Cl(4.5），用丙酮溶解并定容至10mL。 4.9标准物质：草甘膦，CAS号1071-83-6，纯度不低于98%；氨甲基麟酸CAS号1066-51-9，纯度不低 于98%；草甘膦-13C15N100μg/mL;氨甲基膦酸-13C15N,100μg/mL。 4.10标准储备液：分别准确称取适量的草甘麟和氨甲基麟酸标准物质（精确至0.1mg），用水溶解并定 容，配制成浓度为100μg/mL的标准储备液，4℃保存。 释并定容，配制成浓度为1.0ug/mL的混合标准中间液I，4℃保存； 容，配制成浓度为1.0μg/mL的混合标准中间液Ⅱ 4.13标准工作液：根据需要，移取一定混合标准中间液I和Ⅱ，用水配制成浓度分别为0.5ug/L、 1 SN/T 4671—2016 酸-13C15N的浓度为0.005μg/mL。 4.14微孔滤膜：0.22μm，水相。 5仪器和设备 5.1液相色谱-质谱/质谱仪：配有电喷雾离子源（ESI）。 5.2分析天平：感量分别为0.1mg和0.01g。 5.3振荡器：频率250r/min。 5.4禾 移液器：容量为20uL～200L和100L～1000uL。 6试样制备与保存 取10g以上有代表性的试样，剪碎至2mm×2mm以下，混匀。 在制样的操作过程中，应防止样品污染或发生残留物含量的变化。 7分析步骤 7.1样品前处理 准确称取0.5g试样（精确至0.01g），置入50mL塑料离心管中，准确加人125μL1.0μg/mL同位 素内标工作液（4.12）和25mL水，振摇30min后，过滤。取1.0mL滤液，加人100μL硼酸盐缓冲溶液 （4.7)和50μLFMOC-C1丙酮溶液（4.8）进行衍生化反应，常温放置过夜。将反应后溶液过0.22μm滤 膜，供液相色谱-质谱/质谱仪测定。 7.2标准工作液衍生化 准确移取1.0mL标准工作液，加人100μL硼酸盐缓冲溶液（4.7）和50uLFMOC-Cl丙酮溶液 （4.8）进行衍生化反应，常温放置过夜。将反应后溶液过0.22um滤膜，供液相色谱-质谱/质谱仪测定。 业标准 7.3仪器条件 7.3.1 液相色谱条件 a) 色谱柱：Cis，100mm×2.1mm（内径），3.5um，或相当者； b) 流动相：甲醇-5mM乙酸铵溶液，梯度洗脱程序见表1； 表 1 梯度洗脱程序 时间/min 5mmol/L乙酸铵溶液/% 甲醇/% 80 0.0 20 4.0 80 20 10.0 40 60 14.0 40 60 15.0 80 20 18.0 80 20 2