SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T4654—2016 出口蜂蜜中氯舒隆残留量的测定 液相色谱-质谱/质谱法 Determination of clorsulon residue in honey for export- LC-MS/MS method 行业标准信息服务平台 2017-03-01实施 2016-08-23发布 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T4654—2016 前言 本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国秦皇岛出入境检验检疫局、中华人民共和国吉林出入境检验检 疫局。 本标准主要起草人：曹彦忠、贾光群、吴连鹏、王蕾、李响、石玉秋、宋翱。 行业标准信息服务平台 1 SN/T4654—2016 出口蜂蜜中氯舒隆残留量的测定 液相色谱-质谱/质谱法 1范围 本标准规定了出口蜂蜜中氯舒隆残留量的液相色谱-质谱/质谱测定方法 本标准适用于出口蜂蜜中氯舒隆残留量的定量测定和确证。 2规范性引用文件 下列文件对于本文的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。 凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3方法提要 试样中的氯舒隆用三羟甲基氨基甲烷缓冲溶液（pH=9)提取，提取液经C18固相萃取柱净化，液相 色谱-质谱/质谱仪检测和确证，外标法定量。 4 试剂和材料 除非另有规定外，所有试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。 4.1 甲醇：色谱纯。 4.2 乙睛：色谱纯。 4.3 三羟甲基氨基甲烷（Tris）：优级纯。 4.4 氯化钙（CaClz·2H,O）：优级纯 4.5 盐酸：优级纯。 4.6 氯舒隆（Clorsulon）标准物质：C.H.CN.O,S2.CASNo.60200-06-8，纯度≥99%。 4.7 钙（4.4），放人1000mL烧杯中，加人800mL水溶解，用盐酸（4.5）调至pH值为9.0，再用水定容 至1 000 mL。 4.80.1mg/mL标准储备溶液：准确称取适量的氯舒隆标准物质（4.6），用甲醇配成0.1mg/mL的标 准储备溶液。 4.91.0μg/mL标准工作溶液：准确吸取标准储备溶液（4.8)0.1mL移至10mL容量瓶中，用甲醇定 容至刻度。 4.10固相萃取柱：填料为ProElutC1：-UI或相当者，1000mg，6mL。使用前依次用5mL甲醇（4.1) 和10mL水活化，保持柱体湿润。 1）非商业性声明：文中列出的固相萃取柱填料类型仅是为了提供参考，并不涉及商业目的，鼓励标准使用者尝试 采用不同厂家或型号的固相萃取柱。 1 SN/T 4654—2016 4.11 滤膜：0.2uμm。尼龙。 仪器和设备 5 5.1 超高效液相色谱-质谱/质谱仪：配有电喷雾离子源（ESI）。 5.2 分析天平：感量0.0001g和0.01g。 5.3液体混匀器。 5.4玻璃贮液器：约50mL。下端带磨口，可连接固相萃取柱。 5.5固相萃取装置。 5.6 10mL玻璃刻度管。 5.7 玻璃棉：甲醇浸泡，使用前用去离子水将甲醇冲洗干净。 6试样的制备与保存 6.1 试样的制备 对无结晶的实验室样品，将其搅拌均匀。对有结晶的样品，在密闭情况下，置于不超过60℃的水浴 中温热，振荡，待样品全部融化后搅勾，冷却至室温。分出0.5kg作为试样。制备好的试样置于样品瓶 中，密封，并作上标记。 6.2试样保存 将试样于常温下保存。 7测定步骤 7.1提取 称取5g试样，精确至0.01g。置于150mL三角瓶中加入20mLTris缓冲溶液，于液体混匀器 上快速混匀1min，使试样完全溶解。 7.2净化 将塞有玻璃棉的玻璃贮液器连到ProElutC18-U固相萃取柱上，把样液倒入贮液器中，调节流速小 于3mL/min，待样液完全流出后，用10mL水洗柱，弃去全部流出液。用4mL乙腈洗脱于10mL刻 度管中，加水定容至10mL。过0.2μm滤膜后，供液相色谱串联质谱仪测定。 7.3基质空白溶液的制备 按7.1和7.2操作步骤，制备用于配制系列基质标准工作溶液的样品空白提取液。 7.4 测定条件 7.4.1 液相色谱参考条件： 色谱柱：Cis柱，100mm×2.1mm（内径），1.8μm； a) b) 流动相：A：乙睛，B：水。梯度洗脱条件见表1。 c) 进样量：10μL； 柱温：30℃； 2