SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T4504—2016 出口化妆品中氯倍他索、倍氯米松、氯倍 他索丙酸酯的测定 液相色谱-质谱/ 质谱法 Determination of clobetasol,beclomethasone and clobetasol propionate in cosmeticsHPLC-MS/MS method 行业标准信息服务平台 2016-06-28发布 2017-02-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T4504—2016 前 言 本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中国检验检疫科学研究院。 本标准主要起草人：白桦、李海玉、张庆、马强、孟宪双、王婉、郭项雨、王志娟。 行业标准信息服务平台 1 SN/T4504—2016 出口化妆品中氯倍他索、倍氯米松、氯倍 他索丙酸酯的测定液相色谱-质谱/ 质谱法 1范围 本标准规定了水剂、膏霜类出口化妆品中氯倍他索、倍氯米松、氯倍他索丙酸酯的液相色谱-质谱/ 质谱检验方法 本标准适用于水剂、膏霜类出口化妆品中氯倍他索、倍氯米松、氯倍他索丙酸酯的检验。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3原理 直接称取水剂膏霜类化妆品，用甲醇溶解，涡旋混勾，然后超声提取激素类药物，离心取上清液，经 固相萃取柱净化，用反相高效液相色谱串联质谱测定，外标法定量。 4试剂和材料 除另有规定外，所有试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水， 4.1乙腈：色谱纯。 甲醇：色谱纯。 甲酸：分析纯。 4.4 氯倍他索标准物质：C2H28CIFO4CAS号25122-41-2，纯度≥98%。 4.51 倍氯米松标准物质：C22H2gCIO5，CAS号4419-39-0，纯度98%。 4.6 氯倍他索丙酸酯标准物质：C25H32CIFO5，CAS号25122-46-7.纯度99% 4.7标准储备液：分别准确称标准物质氯倍他索（4.4）、倍氯米松（4.5）氯倍他索丙酸酯（4.6）各50mg 标准单标储备溶液，于4℃保存。 4.8标准混合工作溶液：分别取标准储备液（4.7）1mL混合，用甲醇定容于100mL容量瓶，制成浓度 10mg/L的标准混合储备液，于4℃C保存，临用时用初始流动相溶液稀释成100ng/mL、50ng/mL、 20ng/mL、10ng/mL、5ng/mL、2ng/mL、lng/mL等系列浓度的标准混合工作溶液，用于制作标准 曲线。 4.9OasisHLB固相萃取柱或相当者：60mg，3mL。 4.10微孔滤膜：有机膜，孔径0.2μm。 1 SN/T 4504—2016 5仪器和设备 5.1 高效液相色谱-串联质谱仪：配有电喷雾离子源（ESI源）。 5.2 分析天平，感量为0.001g和0.1mg。 5.3 超声波清洗器。 5.4 离心机，10000r/min。 5.5 涡旋混合器。 5.6 固相萃取装置。 5.7 氮吹仪。 6 测定步骤 6.1 样品处理 6.1.1提取 称取化妆品试样0.5g（精确到0.001g），置于10mL具塞离心管中，准确加人5mL甲醇，涡旋分散 溶解，充分混匀，超声提取20min，低温10000r/min离心10min，转出上清液于50mL锥形瓶中，加人 20mL超纯水，混匀，直接上固相萃取小柱净化。 6.1.2净化 将HLB固相萃取柱置于固相萃取装置上，小柱预先依次用5mL甲醇，10mL水活化，将待净化的 样品清液（6.1.1)全部流经柱子（有的样品过滤的特别慢，需要加压或抽滤），待样品溶液完全流尽后，用 5mL30%的甲醇水清洗锥形瓶，并淋洗固相萃取柱，淋洗完后，用5mL甲醇缓慢洗脱HLB柱，收集洗 脱液于10mL比色管中，最后真空抽滤，吸出小柱中的残留液，然后加入5mL高纯水，混合，经0.2μm 微孔滤膜过滤后待上机。 厂业标 6.2测定 6.2.1 液相色谱条件 色谱柱：XBridgeCis柱：150mm×2.1mm，粒径3.5μm，或相当者； a) 信息服 b) 柱温：30℃： c) 进样体积：5μL； d) 液相色谱流动相及参考分离条件见表1。 表1 液相色谱流动相及参考分离条件文 时间/min 流速/(mL/min) 乙睛/% 含0.1%甲酸的水溶液/% 607 0.0 0.3 40 1.5 0.3 50 50 5.0 0.3 70 30 5.1 0.3 90 10 7.0 0.3 90 10 2