SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T4144—2015 出口动物源性食品中卡拉洛尔残留量 的测定 液相色谱-质谱/质谱法 Determination of Carazolol in foodstuffs of animal origin for export- LC-MS/MS method 行业标准信息服务平台 2015-02-09发布 2015-09-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T4144—2015 前言 本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准主要起草单位：中国检验检疫科学研究院、中华人民共和国重庆出人境检验检疫局。 本标准主要起草人：陈冬东、李贤良、于静、郗存显、李淑娟、周超、彭涛。 行业标准信息服务平台 1 SN/T 4144—2015 出口动物源性食品中卡拉洛尔残留量 的测定液相色谱-质谱/质谱法 1范围 本标准适用于猪肉、鱼肉、虾肉、肝脏、肾脏、脂肪、奶、鸡蛋和蜂蜜中卡拉洛尔的测定和确证。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3方法提要 试样中的卡拉洛尔用甲醇（脂肪用乙酸乙酯-正已烷溶解提取）提取，提取液经MCX柱净化（脂肪 用GPC净化后，供液相色谱-质谱/质谱仪测定，外标法峰面积定量。 4 试剂和材料 除特殊注明外，所有试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。 4.1甲酸：色谱级。 4.2 正已烷：色谱级。 业标准信息居 4.3 乙睛：色谱级。 4.4 甲醇：色谱级。 4.5 乙酸铵：色谱级。 4.6 三乙胺。 4.7 乙酸乙酯。 4.8 环已烷。 4.9 95%三乙胺甲醇：取三乙胺（4.6)5mL加甲醇（4.4）95mL，混勺 4.10 ）乙酸乙酯-环已烷（1+1，体积比）溶液：将乙酸乙酯（4.7）和环已烷（4.8）等体积混合。 4.1150%乙腈溶液：将乙睛（4.3）与水等体积混合。 4.12乙睛饱和正已烷：量取100mL正已烷和100mL乙睛，充分混匀，静置分层，取下层溶液待用。 4.13卡拉洛尔标准品：分子式C1sH22N,O2，CASNo.57775-29-8，纯度大于等于99.0%。 4.14卡拉洛尔标准储备液：准确称取适量卡拉洛尔标准品（4.13），用乙睛配制成浓度为100μg/mL的 标准储备液。此溶液在0℃~4℃避光保存。 4.15空白样品提取液：用不含卡拉洛尔残留的样品，按照7.1、7.2制备空白样品提取液。 4.16基质工作溶液：根据需要用空白样品提取液将标准储备液稀释成0.1ng/mL、0.2ng/mL、0.5ng/ml、 1.0ng/mL、2.0ng/mL、5.0ng/mL、10.0ng/mL、100.0ng/mL、200.0ng/mL的标准工作溶液。置于 1 SN/T4144—2015 0℃~4℃避光保存。 4.17MCX固相萃取柱：60mg/3mL，或相当者。使用前依次用3mL甲醇、3mL水进行活化后备用。 4.18凝胶色谱柱填料:Bio-Beads S-X3(38μm~75μm）。 4.19 0.45μm微孔滤膜：有机系。 5仪器和设备 5.1高效液相色谱-质谱/质谱仪，配电喷雾离子源（ESI）。 5.2凝胶净化色谱仪。 5.3日 电子天平：感量为0.01g和0.1mg。 5.4组织捣碎机。 5.5 5涡旋混匀器。 5.6氮吹仪。 5.7均质器：最高转速不低于10000r/min。 5.8 离心机：最高转速不低于6000r/min。 5.9 具塞塑料离心管：50mL。 6试样的制备与保存 6.1肌肉（猪肉）、内脏（包括肝脏、肾脏）、脂肪和水产品（鱼肉、虾肉）：取代表性样约500g，用组织捣碎 机捣碎，装人洁净容器作为试样，密封并做好标识，于一18℃下保存。 6.2奶、蜂蜜、鸡蛋：取代表性样品约500g，搅拌均匀后装入洁净容器内密封并做好标识，于4℃下 保存。 7测定步骤 7.1提取 7.1.1肌肉（猪肉）、内脏（肝脏、肾脏）、鱼肉、虾肉 称取5g试样（精确至0.01g）于50mL具塞离心管中，加人15mL甲醇，于涡旋混匀器上混合提取 2min，用均质器（10000r/min）均质2min，5500r/min离心3min，将有机相转移至50mL容量瓶中， 残渣再用15mL甲醇均质提取一次。离心合并有机相用水定容至50mL，待净化。 7.1.2奶、蜂蜜、鸡蛋 准确称取5g试样（精确至0.01g）于50mL具塞离心管中，加入15mL甲醇，涡旋提取2min， 合并有机相，用水定容至50mL，待净化。 7.1.3脂肪 溶解并混匀，5500r/min离心3min，将有机相转移至50mL容量瓶中。残渣再加人20mL乙酸乙酯 环已烷溶解提取，离心后合并有机相，用乙酸乙酯-环已烷定容至刻度，待净化 2