SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 4054—2014 出口保健食品中育亨宾、伐地那非、 西地那非、他达那非的测定 液相色谱-质谱/质谱法 Determination of yohimbin,tadalafil,sildenafil and vardenafil in health foods for export-LC-MS/MS method 行业标准信息服务平台 2014-11-19发布 2015-05-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T4054—2014 前 言 本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国湖南出人境检验检疫局、湖南省检验检疫科学技术研究院、湖南 师范大学。 本标准主要起草人：张莹、王美玲、朱绍华、张帆、颜鸿飞、付善良、李拥军、陈波。 行业标准信息服务平台 SN/T4054—2014 出口保健食品中育亨宾、伐地那非、 西地那非、他达那非的测定 液相色谱-质谱/质谱法 1范围 本标准规定了保健食品中育亨宾、伐地那非、西地那非、他达那非的液相色谱-质谱/质谱测定方法。 本标准适用于片剂、胶囊和口服液类保健食品中育亨宾、伐地那非、西地那非、他达那非的定量测定 和确证。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3原理 片剂、胶囊试样中的育亨宾、伐地那非、西地那非、他达那非用甲醇超声提取，提取液经稀释后过滤； 口服液经直接稀释后过滤，用液相色谱-质谱/质谱仪进行测定，外标法定量。 4试剂和材料 除特殊注明外，所有试剂均为分析纯，水为符合GB/T6682规定的一级水。 4.1甲醇：液相色谱级。 4.2 乙腈：液相色谱级。 4.3 乙酸：优级纯。 4.40.1%乙酸溶液：取1mL乙酸，用水稀释并定容至1000mL。 4.50.1%乙酸-甲醇混合溶液（1+1，体积比）：量取100mL0.1%乙酸溶液，加人100mL甲醇，混匀 备用。 4.6育亨宾（yohimbin，CAS号：146-48-5，分子式：C21H2.NO）标准品：纯度大于等于99.0%。 4.7 他达那非（tadalafil，CAS号：171596-29-5，分子式：C22Hi.NO）标准品：纯度大于等于99.0%。 4.8 西地那非（sildenafil，CAS号：139755-83-2，分子式：C22HNO,S）标准品纯度大于等于99.0%。 4.9 伐地那非（vardenafil.CAS号：224785-91-5，分子式：C2sH32NO,S·HCI）标准品：纯度大于等于 99.0%. 4.10标准储备液：准确称取适量的上述标准品，用甲醇分别配制成浓度为1.0mg/mL的标准储备溶 液，4℃下避光保存。 液，4℃下避光保存。 1 SN/T4054—2014 4.12标准工作溶液的配制：根据需要用0.1%乙酸-甲醇混合溶液（4.5）将混合标准中间溶液（4.11）稀 释成1ng/mL、5ng/mL、10ng/mL、50ng/mL、100ng/mL的混合标准工作溶液，使用前配制， 5仪器 5.1 高效液相色谱-质谱/质谱仪：配有电喷雾离子源（ESI）。 5.2超声波清洗器。 5.3捣碎机。 5.4 分析天平：感量为0.0001g和0.01g。 6 试样制备与保存 6.1试样制备 6.1.1固体试样 片剂研细，混匀，均分成两份，分别装入洁净容器内；胶囊连同胶囊壳一起捣碎，混匀，均分成两份， 分别装入洁净容器内。 6.1.2液体试样 口服液样品直接混匀，均分成两份，分别装入洁净容器内。密封作为试样，标明标记。 6.2试样的保存 将试样于0℃～4℃下保存。在取样、制样过程中，应防止样品受到污染或发生目标物含量的 变化。 7测定步骤 行业标 7.1提取 7.1.1片剂、胶囊试样 称取1g（精确至0.01g)试样于100mL具塞锥形瓶中，加入80mL甲醇超声提取30min。取出冷 却至室温，将样品全部转移至100mL容量瓶中，用15mL甲醇分数次清洗锥形瓶，合并清洗液至容量 瓶中并用甲醇定容至刻度，摇匀后，静置5min。移取1.0ml提取液至10mL容量瓶中，用0.1%乙酸 甲醇混合溶液（4.5）定容后混勾，溶液过0.45um微孔有机滤膜后，供液相色谱-质谱/质谱仪测定。 7.1.2口服液 准确移取1.0mL试样于10mL容量瓶中，用0.1%乙酸-甲醇混合溶液（4.5）定容至刻度，摇匀，溶 液过0.45um有机滤膜后，供液相色谱-质谱/质谱仪测定 7.2测定 7.2.1液相色谱条件 液相色谱条件如下： a） 色谱柱：Cis柱，150mmX4.6mm（内径），粒径5μm或相当者； 2